Изучение особенностей возбудителя бурого цитоспорозного некроза тополя микромицета Cytospora chrysosperma Pers. Fr. в урбанистической среде (на примере г. Красноярска)
ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1. ГРИБЫ РОДА CYTOSPORA EHRENB И ИХ РОЛЬ В ПАТОГЕНЕЗЕ РАСТЕНИЙ 6
1.2. ВОЗДЕЙСТВИЕ ТЕХНОГЕННЫХ ВЫБРОСОВ АЛЮМИНИЕВОГО ЗАВОДА НА
ОКРУЖАЮЩУЮ СРЕДУ 9
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 13
2.1. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 13
2.2. ПОЛУЧЕНИЕ СПОР CYTOSPORA CHRYSOSPERMA (PERS.) FR
ВЫВОДЫ 17
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 19
ПРИЛОЖЕНИЕ
Урбанистические насаждения в городах с высокой плотностью населения имеют огромную ценность. Для города Красноярска, численность населения которого превышает один миллион, наличие «зеленых» зон является естественной потребностью. Для комфортного проживания необходимо развитие средовосстанавливающей системы, которая в определенных пределах регулировала бы состав воздуха, степень его загрязненности и снижала развитие шумового фактора. В этой связи приоритетными становятся задачи интенсивного озеленения городской среды и поддержание на высоком уровне состояния растений в условиях города [26].
При озеленении городских ландшафтов крайне высокую распространенность имеет тополь. Только на территории города Красноярска содержится достаточное количество насаждений, представленных Populus balsamifera L. (тополь бальзамический).
Одним из наиболее распространенных заболеваний представителей Populus sp., а также остальных растений семейства ивовых является бурый цитоспоровый некроз, вызываемый несовершенным грибом Cytospora chrysosperma Pers. Fr. (телеоморфой является аскомицет Valsa sordida Nitchke). Патоген, развиваясь в тканях коры, вызывает ее отмирание [10, 11, 41]. Подобное вмешательство в конечном итоге ведет к ослаблению и медленной гибели насаждений, что является серьезной проблемой для ряда стран Среднего Востока, Восточной Азии, Африки и Австралии [55, 57].
Усиление деструктивных (негативных) факторов среды способствует ускоренному протеканию патологического процесса, что может вызывать массовую гибель насаждений. Цитоспороз возникает на фоне предварительного ослабления растений, причинами которого могут быть неблагоприятные почвенно-климатические условия среды, а также повышенная загрязненность воздуха [24, 37, 41]. Первичное ослабление деревьев главным образом связано со степенью загрязнения среды [24]. В условиях Красноярска наиболее распространенными поллютантами являются соединения фтора, что связано с деятельностью Красноярского алюминиевого завода (КрАЗ) [14].Разные уровни загрязнения почв и воздуха фтором по-разному влияют на степень загрязнения различных вегетативных органов растений [21, 35], что вполне может привести к ослаблению иммунитета растительного организма. Таким образом, логично предположить, что поражаемость тополей C. chrysosperma,произрастающих в зоне выбросов КрАЗа будет выше, чем у деревьев из относительно благополучных районов города. Однако некоторые патогенные грибы очень чувствительны к наличию техногенных поллютантов [33] и, возможно, для возбудителя бурого цитоспороза деятельность КрАЗа является стрессирующим фактором.
Знание особенностей развития патогенного организма позволяет выбрать наиболее эффективные меры борьбы с ним. Для изучения развития любого микроорганизма необходимо наличие чистой культуры, не привязанной к фазам жизни растения-хозяина. Создание музейной культуры предполагает определение наиболее оптимальных условий для эффективно культивирования любого микроорганизма с учетом влияния внешних факторов среды и индивидуальных потребностей в органических и неорганических веществах, которые присутствуют в питательных средах [28, 45].
Исходя из выше изложенного, целью данной работы являлось изучение особенностей развития фитопатогенного гриба Cytospora chrysosperma Pers. Fr. в урбанистической среде на примере г. Красноярска.
В задачи исследования входило:
1. Провести оценку зараженности тополевых насаждений возбудителем бурого цитоспорового некроза на территории г. Красноярска.
2. Оценить возможность выделения фитопатогенного гриба Cytospora chrysosperma Pers Fr. в чистую культуру.
3. Определить способности роста изолятов патогена на фторсодержащих средах в лабораторных условиях.
4. Изучить морфометрические характеристики спор исследуемого микромицета, сформированные при различных условиях
1. Наибольшее количество пикнид патогена обнаружено на тополях Железнодорожного и Свердловского районов: плотность пикнид на 1 см2 составила 0,31 шт. и 0,29 шт. соответственно. Насаждения Советского, Кировского, Ленинского и Октябрьского районов заражены в меньшей степени. При этом в Советском районе (наиболее подверженному воздействию КРАЗа) доля жизнеспособных пикнид оказалась меньшей по городу, а размер конидий достоверно меньше по сравнению с показателями из других районов города.
2. Показано, что фитопатогенный гриб Cytospora chrysosperma Pers. Fr. способен расти на плотных питательных средах. Микромицет проходит стадии развития вегетативного мицелия, формирования пикнид и спороношения только на органических средах, при этом оптимальной является среда на основе пивного сусла с добавлением тополевого отвара. Выявлено, что повышенная температура (26°C) способствует росту вегетативного мицелия, но подавляет спороношение. Температурный режим в диапазоне 20 °C оптимален для закладки пикнид и образования конидий.
3. Установлено, что в лабораторных условиях возможно культивирование Cytospora chrysosperma Pers. Fr. на фторсодержащих средах, однако происходит торможение процессов формирования пикнид и спороношения. Предельно допустимая концентрация фторида натрия, при которой возможен вегетативный рост - 0,15%.
Чем ниже концентрация соли NaF в питательной среде, тем активнее и в большем объеме происходит прирост вегетативной массы.
4. Выявлено, что размер спор патогена с природного материала достоверно отличается от спор, полученных при выращивании в лабораторных условиях. Размеры последних соответствуют литературным источникам (3,5-6 x 1-2 мкм), в то время как длина и ширина конидий с черенков превышают эти значения (10,53x3,26 мкм).
Увеличение размеров мы считаем компенсационным явлением по отношению к агрессивной городской среде.
1. Аншиц, А. Г. Экологические аспекты производства алюминия электролизом. Аналитический обзор / А. Г. Аншиц, П. В. Поляков, А. В. Кучеренко. - Новосибирск : Изд. ГПНТБ СО АН СССР, 1991.
2. Базерашвили, Л. Г. Комплексы грибов, сопутствующие цитоспорозному усыханию персика и абрикоса, и экологическое обоснование мер борьбы с ними / Л. Г. Базерашвили - Тбилиси : Госкомиздат Груз. ССР, 1985. - 24 с.
3. Бейли, Н. Статистические методы в биологии / Бейли Н. - Изд. : Мир, 1959. - 272 с.
4. Бекер, М. Е. Введение в биотехнологию. / Бекер М. Е. - Изд. : «Пищевая промышленность», 1978. - 248 с.
5. Берлянд, М. Е. Методика расчета концентраций в атмосферном воздухе вредных веществ, содержащихся в выбросах предприятий. ОНД - 86 / М. Е. Берлянд, Е. Л. Генрихович. - Ленинград : Госкомгтдромет, 1987. - 17 с.
6. Бызова, 3. М. Флора споровых растений Казахстана. Несовершенные грибы - Fungi imperfecti (Deuteromycetes)т. 5, ч. 2. / 3. М. Бызова, М. П. Васягина. - Алма - Ата : Наука, 1967. - 382 с.
7. Возняковская, Ю. М. Эпифитная микрофлора растений. Использование микроорганизмов в сельском хозяйстве / Ю. М. Возняковская. - В кн.: М.-Л.: Сельхозиздат, 1962. - 155-161 с.
8. Возняковская, Ю. М. Микрофлора растений и урожай / Ю. М. Возняковская. - Л.: Колос, 1969. - 240 с.
9. Гарибова, Л. В. Основы микологии: Морфология и систематика грибов и грибоподобных организмов. Учебное пособие / Л.В. Гарибова, С.Н. Лекомцева. - Москва : Товарищество научных изданий КМК, 2005. - 220 с.
10. Гвритишвили, М. Н. Грибы рода Cytospora FR. в СССР : монография / Гвритишвили М. Н. - Тбилиси : Издательство Сабчота Сакартвело,1982. -215 с.
11. Гвритишвили, М. Н. Предварительные результаты исследования внешне здоровых ветвей тополей на зараженность грибами рода Cytospora Fr. / М. Н. Гвритишвили, Н. О. Джибгашвили. - Тбилиси : 41 ссылка, 1982. 169 - 173 с.
12. Гербаневская, Е. В. Природа усыхания косточковых плодовых пород : сборник научных фитопатологических работ Среднеазиатского филиала ВИЗР / Гербаневская Е. В. - Ташкент: ВИЗР, 1958. - 23 - 30 с.
13. Громов, О. Б. К вопросу обезвреживания газовых выбросов заводов по производству алюминия / О. Б. Громов, В. К. Прокудин. - Химическая технология. Т. 9. №7
14. Давыдова, Н. Д. Проблемы загрязнения природной среды Сибири / Н. Д. Давыдова. - Успехи современного естествознания, 2014. № 5-1. - 186 - 189 с.
15. Добровольскене, А. Биологические исследования цитоспороза (возбудитель Cytospora capitata Sacc. et Schulz.) плодовых деревьев в Литовской ССР / А. Добровольскене. - Интенсификация производства сельского хозяйства. Научные труды, т. 16, вып. 2 (41). - Вильнюс : Минтис, 1969. - 48 с.
16. Дьякова, Ю.Т. Фундаментальная фитопатология / Ю. Т. Дьякова. - М.: КРАСАНД, 2012. - 512 с.
17. Ибрагимов, И. А. Цитоспороз тополей в лесных культурах Башкирской АССР и меры борьбы с ним : Ав.дис.к.бм / И. А. Ибрагимов. - Харьков : 1965. - 22 с.
18. Исин, М. М. Специализация некоторых видов Cytosporaна плодово-ягодных и древесно-кустарниковых породах. Защита растений от вредителей и болезней / М. М. Исин : Мин. с/х СССР, Литовская с/х Академия, Евлага № 8, 1981. - 76 - 78 с.
19. Кабата-Пендиас, А. Микроэлементы в почвах и растениях / А. Кабата-Пендиас, Л. Пендиас. - М., 1989. - 439 с.
20. Константинов, Л. К. Цитоспороз плодовых / Л. К. Константинов, В. С. Шкреба. - М. : Защита растений. Колос, 1972. - 60 с.
21. Косицына, А. А. Влияние водорастворимого фтора на загрязнение почв и растений : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук, 2009. - 19 с.
22. Кропис, Э.П. Инфекционное усыхание плодовых косточковых деревьев и меры борьбы с ним / Э. П. Кропис. - Кишинев : Упр-е с-х науки МСХ МССР, Молдавская станция ВИЗР, 1958. - 11 с.
23. Крупкин, П. И. Пути рационального использования почв, загрязненных фтором / П. И. Крупкин. - Агрохимия, №3, 2005. -79 - 87 с.
24. Кузьмичев, Е. П. Справочник Болезни и вредители в лесах России. Том 1. Болезни древесных растений. / Е. П. Кузьмичев, Э. С. Соколова, Е. Г. Мозолевская. - М : ВНИИЛМ, 2004. - 129 с.
25. Лакин, Г. Ф. Биометрия : учебное пособие для университетов и педагогических институтов. - М. : Высшая школа, 1973 - 343 с.
26. Макарова, Т. А. Некрозо-раковые болезни растений и меры борьбы с ними в насаждениях города Сургута / Т. А. Макарова, П. Н. Макаров. - Вестник НВГУ №2, 2016. - 81 - 87 с.
27. Минкевич, И. И. О паразитизме грибов рода Cytosporaна косточковых плодовых деревьях / И. И. Минкевич, О.Н. Барсукова, Ю.Ф. Кулибаба. - М. : Бюлл. Гл. ботан. сада, вып. 80. Наука, 1971. - 89 - 93 с.
28. Нетрусов, А. И. Практикум по микробиологии: учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений. ; под ред. А. И. Нетрусова / А. И. Нетрусов, М. А. Егорова, Л. М. Захарчук. - М. : Изд. центр Академия, 2005. - 608с.
29. Осташева, Н. А. Цитоспороз плодовых / Н. А. Осташева. - М. : Защита растений, № 9, Агропромиздат, 1987. - 34 с.
30. Павлов, И. Н. Древесные растения в условиях техногенного загрязнения / И. Н. Павлов. - Улан-Удэ : БНЦ СО РАН, 2005. - 370 с.
31. Павлов, И. Н. Изучение сорбции фтора в листьях древесных растений. - Химия растительного сырья №2, 1998, - 37 - 43 с.
32. Петрушова, Н. И. Роль грибов рода Cytospora Fr. в усыхании косточковых культур в Крыму / Н. И. Петрушова, Г. В. Овчаренко, А. Ф. Евмененко. - Микология и фитопатология, т. 9, вып. 4, 1975. - 315 - 319 с.
33. Плешанов, А. С. Микромицеты пихты сибирской и атмосферное загрязнение лесов / А. С. Плешанов, Т. И. Морозова ; Рос. акад. наук, Сиб. отд-ние, Сибирский ин-т физиол. И биохим. растений. - Новосибирск: Академическое издательство «Гео», 2009. - 115 с.
34. Полонский, В. И. Фторидное загрязнение почвы и фиторемедиация (обзор) / В. И. Полонский, Д. Е. Полонская. - С.-х. биол., Сельхозбиология №1, 2013. - 3 - 14 с.
35. Рожков, А. С. Действие фторсодержащих эмиссий на хвойные деревья / А.С. Рожков, Т.А. Михайлова. - Новосибирск : Наука. Сиб. отд-ние, 1989. - 159 с.
36. Семенкова, И. Г. Лесная фитопатология: учебник для вузов - 2-е изд., перераб. и доп. / И. Г. Семенкова, Э.С. Соколова. - М. : Экология, 1992. - 345 с.
37. Семенова, М. А. Мониторинг состояния молодых посадок Москвы и распространение в них некрозно-раковых болезней (по данным обследования в 2003 г.). - Лесной вестник 2, 2006. - 148 - 153 с.
38. Смит, У. Поглощение загрязняющих веществ растениями. Загрязнение воздуха и жизнь растений. - Л. : 1988. - 461 - 499 с.
39. Смольякова, В. М. Биологические особенности гриба возбудителя цитоспороза косточковых пород. Защита плодово-ягодных культур и винограда от вредителей и болезней в зоне Сев. Кавказа / В. Н. Смольякова. - Новочеркасск : ВНИИ виноградарства и виноделия, 1983. - 3 - 8 с.
40. Смольякова, В. М. Болезни плодовых пород юга России. - Краснодар: Весть, 2000. - 192 с.
41. Соколова, Э. С. Цитоспороз в зеленых насаждениях Москвы. - Москва : МГУЛ, Лестной вестник 2/99. - 57 - 62 с.
42. Сперанская, Н. Ю. Состав и жизненное состояние древесных насаждений г. Барнаула: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Барнаул: Алтайский гос. ун-т, 2007. - 26 с.
43. Стайкова, Т. Б. Анализ выбросов загрязняющих веществ в атмосферу ОАО «КРАСНОЯРСКИЙ АЛЮМИНИЕВЫЙ ЗАВОД» / Т. Б. Стайкова, Е. Н. Окладникова. - Актуальные проблемы авиации и космонавтики. Техн. науки, 2011. -260 - 262 с.
44. Танделов, Ю. П. Фтор в системе почва-растение. - 2-е изд., перераб. и доп. / Ю.П. Танделов ; под ред. акад. РАСХН В.Г. Минеева. - Красноярск, 2012. - 146 с.
45. Федоров, М. В. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. Второе издание. - Москва - 1951. - 280 с.
46. Филиппова, И. А. Грибы против рака. - СПб. : Питер, 2014. - 224 с.
47. Хлебопрос, Р. Г. Красноярск. Экологические очерки: монография / Р. Г. Хлебопрос, О. В. Тасейко, Ю. Д. Иванова. - Красноярск: Сибирский федеральный университет, 2012. - 130 с.
48. Хохряков, М. К. Определитель болезней растений / М. К. Хохряков, Т. Л. Доброзракова, К. М. Степанов. - СПб : Лань, 2003. - 592 с.
49. Цакадзе, Т. К. Изучению паразитизма Cytospora leucostoma (Pers.) Sacc. на косточковых культурах ; Тр. Инст-та защиты растений, т. 2. - Тбилиси : Академия наук Груз. ССР, 1956. - 209 - 219 с.
50. Черепкова, Н. А. Поражение плодовых культур цитоспорозом в субтропиках Краснодарского края /Н. А. Черепкова.- Л. : Бюлл. ВИЗР, 1977.
51. Чиндяева, Л. Н. Анализ арборифлоры урбанизированных районов Сибири / Л. Н. Чиндяева, Е. В. Банаев, О. Н. Потемкин. - Сибирский экологический журнал № 3, 2007. - 401 - 408 с.
52. Чиндяева, Л. Н. Особенности использования древесных растений в зеленом строительстве в крупных городах Сибири (на примере Новосибирска) / Л. Н. Чиндяева, Е. В. Банаев, О. Н. Потемкин. - М.: Экология большого города. Альманах Прима-М, 2002. - 113-115 с.
53. Adams G. C., Phylogenetic relationships and morphology of Cytospora species and related eleomorphs (Ascomycota, Diaporthales, Valsaceae) from Eucalyptus / G. C Adams, M. J Wingfield, R. Common. - Stud Mycol, 2005.
54. Adams G. C., Cytospora species (Ascomycota, Diaporthales, Valsaceae), introduced and native pathogens of trees in South Africa / G. C Adams, J. Roux, M. J Wingfield. - Australas Plant Pathol, 2006.
55. Aktas Huseyin, Cytospora chrysosperma “PERS” FR.'nin in-vitro kosullarinda morfolojik ozelliklerinin ve en uygun inokulasyon yonteminin belirlenmesi / Huseyin Aktas, Ziya Simsek. - Cankin karatekin universitesi orman fakultesi cankiri, bartin orman fakultesi dergisi, 2010.
56. Burks Susan, Cytospora canker development on aspen in response to nitrogen fertilization / Susan Burks, William R. Jacobi, Gary A. Mclntyr. - Journal of Arboriculture, 1998.
57. Chen M. M., Forest fungi phytogeography, forest fungi phytogeography of China, North America, and Siberia and international quarantine of tree pathogens. - Sacramento, California, USA, 2002.
58. Deacon J. W., Modern Mycology, third edition. - Wiley, 1997. - 303 p.
59. Ji S. D., Heterologous expression of the Hsp24 from Trichoderma asperellum improves antifungal ability of Populus transformant Pdpap-Hsp24 s to Cytospora chrysosperma and Alternaria alternate / S. D. Ji, Z. Y. Wang, H. J. Fan, R. S. Zhang, Z. Y. Yu, J. J. Wang, Z. H. Liu. - The Botanical Society of Japan and Springer Japan, 2016.
60. Kaczynski Kristen M., Susceptibility of Salix monticola to Cytospora canker under increased temperatures and decreased water levels / Kristen M. Kaczynski, David J. Cooper. - Forest Ecology and Management, 2013.
61. Karthikeyan S., Functional and structural responses of degradative microbial community to substrates with varying degrees of complexity in chemical structure / S. Karthikeyan, G. M. Wolfaardt, D. R. Korber, D. E. Caldwell. - Microb. Ecol, 1999, vol. 38, 215-224 pp.
62. Malayeri B. E., Using the pollen viability and morphology for fluoride pollution biomonitoring / B. E. Malayeri, M. Noori, M. Jafari. - Biol. Trace Elem. Res. -2012 - Vol. 147 (1-3). 315-319 pp.
63. Singlair W. A., Diseases of trees and shrubs. / W. A. Singlair, H. H. Lyon. - New York: Cornell university Press, Sage House, 2005. - 660 p.
64. Xin-Lei Fan, Morphological and phylogenetic studies of Cytospora (Valsaceae, Diaporthales) isolates from Chinese scholar tree, with description of a new species / Fan Xin-Lei, Liang Ying-Mei, Ma Rong, Tian Cheng-Ming. - The Mycological Society of Japan, 2013.
65. Yang Qin, Cytospora from Ulmus pumila in Northern Chin. / Qin Yang, Xin-Lei Fan, Pedro W. Crous, Ying-Mei Liang, Cheng-Ming Tian. - Mycol Progress, 2015.