Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
ℹ️Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
ВВЕДЕНИЕ 7
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9
1.1 Биоразрушаемые материалы применяемые в биомедицине 9
1.1.1 Синтетические полимеры 9
1.1.2 Природные полимеры 10
1.1.3 Природные полигидроксиалканоаты 11
1.2 Требования, предъявляемые к материалам для клеточной и тканевой
инженерии 12
1.2.1 Дизайн инъекционных скафолдов на основе микро- и наносителей 14
1.3 Тканевая инженерия мягких тканей: реконструкция кожи 18
1.3.1 Применение коллагена для реконструкции мягких тканей 19
1.3.2 Применение факторов роста для реконструкции мягких тканей 22
1.4 Разнообразие материалов на основе микро- и наночастиц 22
1.4.1 Микро- и наночастицы в качестве носителей для контролируемой
доставки препаратов 22
1.4.2 Микро- и наночастицы в качестве каркасов для клеточной и
тканевой инженерии 25
1.4.3 Микро- и наночастицы в составе гидрогелей 27
1.4.4 Поверхностные модификации микро- и наночастиц 28
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 32
2.1 Материалы 32
2.2 Получение микрочастиц из ИГА 32
2.3 Модификации поверхности полимерных микрочастиц 33
2.3.1 Реакция карбоксилирования 33
2.3.2 Карбодиимидная реакция 33
2.4 Количественное определение белка 34
2.4.1 Биуретовый метод 34
2.4.2 Метод Лоури 35
2.5 Определение морфологических свойств полимерных микрочастиц 36
2.6 Оценка стабильности амидной связи в микрочастицах из П(3ГБ)/БСА и
П(3ГБ/3ГВ)/БСА 37
2.7 Анализ жизнеспособности клеток 38
2.7.1 Тест alamarBlue® 38
2.8 Статистическая обработка данных 39
СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..
📖 Введение
Современное развитие науки приводит к широкому внедрению в медицине высокомолекулярных соединений, включая полиэфиры, синтезируемые живыми системами. Наиболее приоритетными полимерами в последнее десятилетие наряду с полилактидами и полигликолидами считаются полигидроксиалканоаты (ПГА) - полиэфиры алкановых кислот микробиологического происхождения [1].
Анализ литературы показывает, что полигидроксиалканоаты (ПГА) обладают физико-химическими свойствами, подходящими для различных применений в биомедицине, в том числе для конструирования микро- и наноносителей [1, 2].
Микрочастицы из биосовместимых и биодеградируемых полимеров - это современные лекарственные формы, способные элиминировать побочные эффекты и преодолевать неудовлетворительную фармакокинетику уже существующих лекарственных препаратов [3, 4], при этом микрочастицы могут быть использованы в тканевой инженерии и клеточных технологиях в качестве матриксов - носителей для клеток. Выступая в роли имплантатов, микрочастицы используются в качестве материала для клеточной и тканевой инженерии [5].
Коррекция дефектов в мягких тканях является важной проблемой в эстетической пластической хирургии, и является одним из перспективных направлений по использованию материалов на основе ПГА, так как этот класс биополимеров имеет широкий спектр свойств, влияющих на сроки биорезорбции частиц [6]. Для совершенствования свойств биосовместимости материала актуальна модификация поверхности полимерных микрочастиц различными соединениями, к примеру - молекулами белка. За счет белковых молекул происходит уменьшение количества отрицательно заряженных СООН- групп в составе ПГА и улучшаются адгезионные свойства поверхности микрочастиц по отношению к клеткам.
В связи с этим, целью данного исследования явилось получение и изучение свойств материала, потенциально пригодного для реконструктивных инъекционных технологий мягких тканей на основе биоразрушаемых полигидроксиалканоатов.
Исходя из поставленной цели, были сформулированы следующие задачи:
1. Получить ПГА-микрочастицы различного химического состава: из П(3ГБ) и П(3ГБ/3ГВ).
2. Присоединить молекулы белка к функциональным группам на поверхности ПГА-микрочастиц с применением карбодиимидной реакции.
3. Изучить характеристики полученных микрочастиц (среднего диаметра, электрокинетического потенциала, химического состава полимера, молекулярной массы полимера).
4. Определить концентрацию белка, ковалентно-связанного с ПГА- микрочастиц.
5. Оценить стабильность амидной связи между NH2-rpynnaMH белка и СООН-группами полимера на поверхности ПГА-микрочастиц.
6. Исследовать цитотоксичность модифицированных белком П(3ГБ)- микрочастиц в первичной культуре фибробластов in vitro.
Работа проводилась на базе лаборатории биотехнологии новых биоматериалов Сибирского федерального университета.
