Тип работы:
 Предмет:
 Язык работы:


ОПРЕДЕЛЕНИЕ РОДИТЕЛЬСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ И ВРЕМЕНИ ВОЗНИКНОВЕНИЯ АНЕУПЛОИДИИ У СПОНТАННЫХ АБОРТУСОВ 1 ТРИМЕСТРА БЕРЕМЕННОСТИ

Работа №190346

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы47
Год сдачи2020
Стоимость4300 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
6
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ 3
ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Анеуплоидия в этиологии спонтанного прерывания беременности 6
1.2 Происхождение анеуплоидий 9
1.2.1 Митотическое происхождение анеуплоидий 11
1.2.2 Мейотическое происхождение анеуплоидий 17
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ 22
2.1 МАТЕРИАЛ 22
2.2 МЕТОДЫ 23
2.2.1 Выделение ДНК из крови микрометодом 23
2.2.2 Выделение ДНК из эмбриональных тканей (хориона и мезодермы)23
2.2.3 Амплификация STR локусов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) 24
2.2.4 Электрофорез полученных продуктов ПЦР 25
2.2.5 Анализ происхождения анеуплоидий с помощью капиллярного электрофореза 25
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 26
ВЫВОДЫ 35
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 36
ПРИЛОЖЕНИЕ 44

Невынашивание беременности является одной из центральных проблем в акушерстве и репродуктологии. Частота спонтанных абортов (СА) среди клинически распознаваемых беременностей составляет 12 -15 % (Ellish N. J. et al., 1996) и большая часть приходится на первый триместр беременности.
В качестве причин невынашивания беременности рассматривают инфекции, нарушения эндокринной системы, иммунный статус, анатомические дефекты половых органов, влияние эмбриотоксических и тератогенных веществ, возраст и многие другие факторы (Чиряева О. Г. и др., 2012). Одной из главных причин невынашивания принято считать генетический фактор, под которым понимают спонтанное прерывание беременности плодом с хромосомными нарушениями. Хромосомным аномалиям принадлежит важное место в этиологии спонтанного прерывания беременности.
Наиболее распространенными хромосомными патологиями, приводящими к ранней эмбриональной летальности, являются числовые аномалии - анеуплоидии (моносомии и трисомии) и полиплоидии. Большинство из этих аномалий являются спорадическими и возникают de novo.
Среди причин анеуплоидий выделяют нарушение сегрегации хроматид в митозе в соматических клетках на раннем этапе развития или нарушение сегрегации хромосом или хроматид в мейозе при образовании гамет у родителей (Tsuiko O. et al., 2018).
Понимание природы и частоты хромосомной нестабильности на стадиях гаметогенеза и на ранних стадиях эмбриогенеза позволяет понять причины бесплодия и механизмы, лежащие в основе числовых хромосомных аномалий.
Таким образом, целью данного исследования являлось изучение происхождения и частоты анеуплоидий.
Для достижения цели поставлены следующие задачи:
1. Оценка частоты анеуплоидий у спонтанных абортусов на основе анализа базы данных абортусов НИИ Медицинской генетики (данные на март 2020).
2. Выявление корреляции между возрастом родителей и наличием анеуплоидии у спонтанного абортуса.
3. Определение происхождения анеуплоидий у спонтанных абортусов I триместра беременности.
Работа выполнена на базе НИИ медицинской генетики ФГБНУ Томского национального исследовательского медицинского центра РАН в лаборатории цитогенетики под руководством кандидата биологических наук Толмачевой Екатерины Николаевны. Автор выражает благодарность научному руководителю за помощь при написании выпускной квалификационной работы.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!
ДИПЛОМНЫЕ МАГИСТЕРСКИЕ ДИССЕРТАЦИИ
КУРСОВЫЕ СТАТЬИ ВКР

1. Наиболее частой числовой аномалией хромосом плода, приводящей к невынашиванию беременности, является трисомия 16, которая выявляется в 24,62%. Вторая по встречаемости анеуплоидия - моносомия Х, регистрируется в 15, 38% случаев.
2. Показано, что средний возраст матерей, имеющих абортуса с анеуплоидным кариотипом значимо выше (30,6 ± 6,3), чем средний возраст матерей, абортус которых имел эуплоидный кариотип (27,8 ± 5,7). Средний возраст отцов анеуплоидных абортусов также оказался значимо выше (32,0 ± 6,8), по сравнению со средним возрастом отцов эуплоидных абортусов (30,3 ± 6,3).
3. Определено происхождение анеуплоидий у спонтанных абортусов I триместра беременности по хромосомам 7, 9, 15, 16, 18, 21 и 22. У 32% анализируемых СА анеуплоидия была мейотического происхождения (нерасхождение в I делении мейоза). В 56% случаях анеуплоидия имела либо мейотическое (нерасхождение во II делении мейоза) , либо митотическое происхождение .



1. Чиряева О. Г. Сравнительный анализ аномалий кариотипа при неразвивающейся беременности, наступившей естественным путем и с применением вспомогательных репродуктивных технологий / О. Г. Чиряева [и др.] // Журнал акушерства и женских болезней. - 2012. - Т. LXI, № 3. - С. 132-138.
2. Чиряева О. Г. Цитологический анализ хориона при неразвивающейся беременности / О. Г. Чиряева [и др.] // Журнал акушерства и женских болезней. - 2007. - №1. - С. 35-45.
3. Лупояд В. С. Диагностика анеуплоидии в I и II триместрах беременности / В. С. Лупояд [и др.] // Мзжнародний медичний журнал. - 2017. - Т. 23, № 1. - С. 42-44.
4. Allen E.G. Maternal age and risk for trisomy 21 assessed by the origin of chromosome non-disjunction: a report from the Atlanta and National Down Syndrome Projects / E.G. Allen [et al.] // Hum Genet. - 2009. - Vol. 125. - P. 41¬52.
5. Artus J. The cell cycle of early mammalian embryos: lessons from genetic mouse models / Artus J. [et al.] // Cell Cycle. - 2006. - №5. - P. 499-502.
6. Bielanska M. Chromosomal mosaicism throughout human preimplantation development in vitro: incidence, type, and relevance to embryo outcome / M. Bielanska, S.L. Tan, A. Ao // Hum. Reprod. - 2002. - Vol. 17. - P. 413-419.
7. Capalbo A. Sequential comprehensive chromosome analysis of polar bodies, blastomeres and trophoblast: insights into female meiotic errors and chromosomal segregation in the preimplantation window of embryo development / A. Capalbo [et al.] // Hum Reprod. - 2013. - №28. - P. 509 -518.
8. Carr D. H. Chromosome studies in spontaneous abortions // Obst. Gynecolol. - 1965. - Vol. 26. - P. 308-326.
9. Cheng E. Y. Meiotic recombination in human oocytes / E. Y. Cheng [et al.] // PLoS Genet. - 2009. - № 5. - P. e1000661.
10. Chiang T. Meiotic origins of maternal age-related aneuploidy / T. Chiang [et al.] // Author Notes Biology of Reproduction. - 2012. - Vol. 86. - № 3. - P. 1-7.
11. Cimini D. Merotelic kinetochore orientation is a major mechanism of aneuploidy in mitotic mammalian tissue cells / Cimini D. [et al.] // Cell Biol. 2001. - №153. - P. 517-527.
12. Coonen E. Anaphase lagging mainly explains chromosomal mosaicism in human preimplantation embryos / Coonen E. [et al.] // Mol. Hum. Reprod. - 2008. - №14. - P. 117-125.
13. Crow J. The origins, patterns and implications of human spontaneous mutation // Nat Rev Genet. - 2000. -Vol. 1. - P. 40-47.
14. Daphnis D.D. Analysis of the evolution of chromosome abnormalities in human embryos from Day 3 to 5 using CGH and FISH / D.D. Daphnis // Mol. Hum. Reprod. - 2008. - №14. - P. 117-125.
15. Decordier E. Mitotic checkpoints and the maintenance of the chromosome karyotype / E. Decordier, M. Cundari, Kirsch-Volders // Mutat. Res. - 2008. - №651. - P. 3-13.
16. Delhanty J. D. A. Triploid cell in a human embryo/ Delhanty J.D.A., Ellis J.R., Rowley P.T. // Lancet. - 1961. - Vol. 1. - P. 1286.
17. Delhanty J. The origins of genetic variation between individual human oocytes and embryos: implications for infertility // Hum. Fertil. - 2013. - Vol. 16. - № 4. - P. 241-245.
18. Eiben B. Cytogenetic analyses of 750 spontaneous abortions with the direct preparation method of chorionic vilii and its implications for studying genetic causes of pregnancy wastage / Eiben B. [et al.] // Am. J. Hum. Genet. - 1990. - Vol. 47. - P. 656-663.
19. Ellish N. J. A prospective study of early pregnancy loss / Ellish N. J., Saboda K., O'Connor J. O. [et al.] // Hum. Reprod. - 1996. - Vol. 11. - P. 406¬412.
20. Fisher J. M. Trisomy 18: studies of the parent and cell division of origin and the effect of aberrant recombination on nondisjunction / Fisher J. M. [et al.] // Am J Hum Genet. - 1995. - Vol. 56. - P. 669-675.
21. Fragouli E. The cytogenetics of polar bodies: insights into female meiosis and the diagnosis of aneuploidy / Fragouli E. [et al.] // Mol Hum Reprod. - 2011.
- Vol. 17. - P. 286-295.
22. Griffin D.K. Non-disjunction in human sperm: evidence for an effect of increasing paternal age / Griffin D.K. [et al.] // Hum Mol Genet. - 1995. -Vol.4.
- P. 2227-2232.
23. Gruhn J. R Chromosome errors in human eggs shape natural fertility over reproductive life span / Gruhn J. R [et al.] // Science. - 2019. - Vol. 365. - № 6460. - P. 1466-1469.
24. Haering C. H. Structure and stability of cohesin’s Smcl -kleisin interaction / C. H. Haering [et al.] // Mol Cell. - 2004. - Vol.15. - P. 951-964.
25. Hall H. The origin of trisomy 13 / Hall H. [et al.] // Am. J. Med. Genet. - 2007. - Vol.143A. - P. 2242-2248.
26. Hall H. The origin of trisomy 22: evidence for acrocentric chromosome-specific patterns of nondisjunction / Hall H. [et al.] // Am. J. Med. Genet. - 2007.
- Vol. 143A. - P. 2249-2255.
27. Hassold T. J. Molecular studies of non-disjunction in trisomy 16 / T. J. Hassold [et al.] // J Med Genet. - 1991. - Vol. 28. - P. 159-162.
28. Hassold T. The origin of human aneuploidy: where we have been, where we are going / T. Hassold, H. Hall, P. H. Human // Molecular Genetics. - 2007. - Vol. 16. - P. 203-208.
29. Hassold T. To err (meiotically) is human: the genesis of human aneuploidy / Hassold T., Hunt P. // Nat. Rev. Genet. - 2001. - Vol. 2. - P. 280-291.
30. Hassold T. Trisomy in humans: incidence, origin and etiology / T. Hassold, P.A. Hunt, S. Sherman // Curr Opin Genet Dev. - 1993. - № 3. - P. 398-403.
31. Huang A. Prevalence of chromosomal mosaicism in pregnancies from couples with infertility / Huang A. [et al.] // Fertil. Steril. - 2009. - № 91. - P. 2355-2360.
32. Huisjes H. J. Early pregnancy failure / Huisjes H. J., Lind T. - Churchill Livingstone in Edinburgh, New York, 1990. - 263 p.
33. Katz-Jaffe M.G. Mitotic errors in chromosome 21 of human preimplantation embryos are associated with non-viability / M.G. Katz-Jaffe, A.O. Trounson, D.S. Cram. // Mol. Hum. Reprod. - 2004. - №10. - Р. 143-147.
34. Kiessling A.A. Evidence that human blastomere cleavage is under unique cell cycle control / A.A. Kiessling [et al.] // J. Assist. Reprod. Genet. - 2009. - №26. - P. 187-195.
35. Kiessling A.A. Genome-wide microarray evidence that 8-cell human blastomeres over-express cell cycle drivers and under-express checkpoints / A.A. Kiessling [et al.] // J. Assist. Reprod. Genet. - 2010. - №27. - P. 265-276.
36. Lamb N.E. Effect of meiotic recombination on the production of aneuploid gametes in humans / N.E. Lamb, S.L. Sherman, T.J. Hassold // Cytogenet. And Genome Res. - 2005. - Vol. 111. - P. 250-255.
37. Lejeune J. Study of somatic chromosomes from 9 mongoloid children / Lejeune J., M. Gautier, R. Turpin // C. R. Hebd. Seances Acad. Sci. - 1959. - № 248. - P. 1721 - 1722.
38. LeMaire-Adkins R. Lack of checkpoint control at the metaphase/anaphase transition: mechanism of meiotic nondisjunction in mammalian females / R. LeMaire-Adkins, K. Radke, P. A. Hunt // J Cell Biol. - 1997. - Vol. 139. №7. - P. 1611-1619.
39. Li Q.Y. Parental origin and cell stage of non-disjunction of double trisomy in spontaneous abortion / Li Q.Y. [et al.] // Congenit Anom (Kyoto). - 2005. - Vol.45. - P. 21-25.
40. Lin С. Gytogenetic studies in spontaneous abortions: the Calgary experience / Lin С., De Braekeleer M., Jamro H. // Can. J. Genet. Cytol. - 1985. - V.27. - P.565-570.
41. Ljunger E. Chromosomal anomalies in first-trimes-ter miscarriages. / Ljunger E. [et al.] // Acta Obstet. Gynecol. Scand. - 2005. - Vol. 66. - P. 1516-1521.
42. Los F.J. The development of cytogenetically normal, abnormal and mosaic embryos: a theoretical model / F.J. Los, D. Van Opstal, C. Van den Berg // PLoS One. - 2011. - №6. - P. e21557-94.
43. Lynn A. Covariation of synaptonemal complex length and mammalian meiotic exchange rates / A. Lynn [et al.] // Science. - 2002. - №296. - P. 2222-2225.
44. Mantikou E. Molecular origin of mitotic aneuploidies in preimplantation embryos / E. Mantikou [et al.] // Mol Genet Hum Reprod Fail. - 2012. - №12. - P. 1921-1230.
45. McCoy R. C. Common variants spanning PLK4 are associated with mitotic- origin aneuploidy in human embryos / R. C. McCoy [et al.] // Science. - 2015. - №348. - 235-238.
46. Morris I.D. The spectrum of DNA damage in human sperm assessed by single cell gel electrophoresis (Comet assay) and its relationship to fertilization and embryo development / Morris I.D [et al.] // Hum Reprod. - 2002. - Vol. 17. - P. 990-998.
47. Nagaishi M. Chromosome abnormalities identied in 347 spontaneous abortions collected in Japan / Nagaishi M. [et al.] // J Obstet Gynaecol Res. -
2004. - Vol. 30(3). - P.237-241.
48. Nagaoka S. I. Human aneuploidy: mechanisms and new insights into an age- old problem / S. I. Nagaoka, T. J. Hassold, P. A. Hunt // Nature Reviews Genetics. - 2012. - Vol.13. - P. 493-504.
49. Ohno M. A cytogenetic study of spontaneous abortions with direct analysis of chorionic villi / Ohno M., Maeda Т., Matsunobi A. // Obstet. Gynecol. -1991. -V.77. - P. 394-398.
50. Pai G. S. Handbook of Chromosomal Syndromes / Pai G. S., Lewandowski R. C., Borgaonkar D. S. // Hoboken: Wiley - Liss. - 2003.
51. Pepling M.E. A novel maternal mRNA storage compartment in mouse oocytes // Biol. Reprod. - 2010. - №82. - P. 807-808.
52. Picton H.M. Association between amino acid turnover and chromosome aneuploidy during human preimplantation embryo development in vitro / H.M. Picton [et al.] // Mol. Hum. Reprod. - 2010. -№16. - P. 557-569.
53. Qumsiyeh M. B. Cytogenetics and mechanisms of spontaneous abortions: increased apoptosis and decreased cell proliferation in chromosomally abnormal villi / Qumsiyeh M. B. [et al.] // Cytogenet. Cell Genet. -2000. -Vol. 88. - P. 230-235.
54. Reddy K. S. Triple aneuploidy in spontaneous abortions // Clin Genet. - 1999. - Vol. 56. -103-4.
55. Reddy K.S. Double trisomy in spontaneous abortions // Hum Genet. - 1997. - Vol.101. - P.339-345.
56. Rius M. Comprehensive embryo analysis of advanced maternal age-related aneuploidies and mosaicism by short comparative genomic hybridization / M. Rius [et al.] // Fertil. Steril. - 2011. - Vol. 95 - № 1. - P. 413-416.
57. Robinson W. P. The origin of abnormalities in recurrent aneuploidy/polyploidy / Robinson W. P., McFaddem D. E., Stephenson M. D. // Am. J .Hum. Genet. - 2001. - Vol. 69. - P. 1245-1254.
58. Subramaniyam S. Double and multiple chromosomal aneuploidies in spontaneous abortions: Asingle institutional experience / Subramaniyam S., Pulijaal V.R., Mathew S. // J Hum Reprod Sci. - 2014. - Vol. 7.4. - P. 262-268.
59. Sutcliffe M. J. Spermatogenesis in XY, XYSxra and XOSxra mice: a quantitative analysis of spermatogenesis throughout puberty / M.J. Sutcliffe, S.M. Darling, P.S. Burgoyne // Mol Reprod Dev. - 1991. - Vol. 30. - №2. - P. 81-89.
60. Sutherland G.R. Rare fragile sites // Mol. Hum. Reprod. - 2008. - №14. - P. 117-125.
61. Taylor T. H. The origin, mechanisms, incidence and clinical consequences of chromosomal mosaicism in humans / T. H. Taylor // Human Reproduction Update. - 2014. - №20. - P. 571-581.
62. Templado C. An analysis of human sperm chromosome aneuploidy / C. Templado [et al.] // Cytogenetics and Cell Genetics. - 1996. - Vol.74. - P. 194¬200.
63. Templado C. Aneuploidy in human spermatozoa / Templado C., Vidal F., Estop A. // Cytogenet Genome Res. - 2011. - Vol. 133, № 2-4. - P. 91-99.
64. Torres E. M. Aneuploidy: Cells Losing Their Balance / E. M. Torres, B. R. Williams, A. Amon // Genetics. - 2008. - Vol. 179. - P. 737-746.
65. Treff N. R. Telomere DNA deficiency is associated with development of human embryonic aneuploidy / N. R. Treff [et al.] // PLoS Genet. - 2011. - №7. - P. e1002161.
66. Tsuiko O. A. speculative outlook on embryonic aneuploidy: Can molecular pathways be involved? / Tsuiko O. [et al.] // Developmental Biology. - 2018. - №1. - P. 3-13.
67. Vanneste E. Chromosome instability is common in human cleavage-stage embryos / Vanneste E. [et al.] // Nat. Med. - 2009. - №15. - P. 577-583.
68. Wei Y. Spindle assembly checkpoint regulates mitotic cell cycle progression during preimplantation embryo development / Y. Wei [et al.] // PLoS One. - 2011. - №6. - P. e21557.
69. Wilton L. Preimplantation genetic diagnosis and chromosome analysis of blastomeres using comparative genomic hybridization // Hum Reprod Update. - 2005. - №11. - P. 33-41
70. Wolstenholme J. Confined placental mosaicism for trisomies 2, 3, 7, 8, 9, 16, and 22: their incidence, likely origins, and mechanisms for cell lineage compartmentalization // Prenat. Diagn. - 1996. - №16. - P.511-524.
71. Yakut S.I. Chromosome abnormalities identified in 457 spontaneous abortions and their histopathological findings / Yakut S.I. [et al.] // Turk Patoloji Derg. - 2015. - 31. - №2. - P. 111-118.
72. Zhou C. R. Cytogenetic Studies of Spontaneous Abortions in Humans // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. - 1990. - №25. - P. 89-91.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.