📄Работа №165185

Тема: Оценка влияния субстратов на стабильность ферментов светящихся бактерий при их совместной иммобилизации

📝
Тип работы Бакалаврская работа
📚
Предмет физика
📄
Объем: 30 листов
📅
Год: 2020
👁️
Просмотров: 67
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
ℹ️ Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.

📋 Содержание

Реферат
ВВЕДЕНИЕ 4
1. Обзор литературы 6
1.1 Биологические методы тестирования окружающей среды 5
1.2 Достоинства и недостатки биотестирования 8
1.3 Перспективы использования биолюминесцентных методов в
биотестировании 10
1.4 Ферментативные реагенты для биолюминесцентного анализа 12
1.4.1 Способы стабилизации ферментов 12
1.4.1. Выбор условий иммобилизации биферментной системы ЫАВ(Р)Н:ЕМЫ-оксидоредуктаза и люцифераза 14
2. Материалы и методы 17
2.1 Материалы 17
2.2 Методы 17
3. Результаты и обсуждение 19
3.1 Определение параметров свечения и чувствительности иммобилизованной биферментной системы (R+L) при использовании в качестве субстрата алифатического альдегида с разной длиной углеродной цепи. 19
3.1. Оценка влияния субстратов тетрадеканаль и NADH на активность и стабильность биферментной системы (R+L) 22
ВЫВОДЫ 27
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ИСТОЧНИКОВ 28

📖 Введение

Для решения научных и прикладных задач экологического мониторинга широко используются различные биотесты, основанные на ингибировании ферментов токсическими веществами. Перспективным является конструирование и применение интегральных биолюминесцентных методов анализа токсичности на основе биферментной системы светящихся бактерий: ЫАП(Р)Н:РМЫ-оксидоредуктаза (R) - люцифераза (L). Иммобилизация биферментной системы в полимерные гели позволяет стабилизировать активность ферментов (R+L) при хранении и использовании.
Ранее разработанные принципы и подходы конструирования высокоактивного и чувствительного интегрального ферментативного реагента, который был основал на иммобилизации в крахмальный гель ферментов и субстратов биферментной системы (L+R) светящихся бактерий, привел к оптимизации состава реагента и модификации процедуры иммобилизации в полимерные гели, однако не позволили увеличить точность результатов анализа при многократных измерениях. Возможным фактором, определяющим вариабельность реагентов, может быть влияние субстратов на стабильность ферментов при их совместной иммобилизации.
Цель исследования: оценка влияния субстратов на активность и стабильность ферментов светящихся бактерий при их совместной иммобилизации.
Задачи исследования:
1. Определение параметров свечения и чувствительности иммобилизованной биферментной системы (R+L) при использовании в качестве субстрата алифатического альдегида с разной длиной углеводородной цепи.
2. Сравнение характеристик биферментной системы (R+L) иммобилизованной в крахмальный гель без субстратов и совместно с субстратами тетрадеканалем, NADH

Возникли сложности?

Нужна качественная помощь преподавателя?

👨‍🎓 Помощь в написании

✅ Заключение

1. Выход активности биферментной системы (R+L) иммобилизованной совместно с NADH и тетрадеканалем выше выхода активности биферментной системы (R+L) иммобилизованной совместно с NADH и деканалем в 1,5 раза при концентрациях альдегидов 10,9 и 59,1 мкмоль/л соответственно. Чувствительность реагентов к действию сульфата меди при использовании в качестве субстрата тетрадеканаля выше на порядок, чем при использовании деканаля.
2. Субстраты NADH и тетрадеканаль влияют на активность и
стабильность ферментов биферментной системы
NAD(P)H:FMN-oкcидopeдyктaзa-люцифepaзa при их совместной иммобилизации. Остаточная интенсивность свечения реагента на 7 день хранения составляет 60 %.

Нужна своя уникальная работа?
Срочная разработка под ваши требования
Рассчитать стоимость
ИЛИ

📕 Список литературы

1. Roda, A., Pasini, P., Mirasoli, M., Michelini, E., Guardigli, M. Biotechnological applications of bioluminescence and chemiluminescence. TrendsBiotechnol. 2004;22(6), 295-303.
2. Есимбекова E.H., Лоншакова-Мукина В.И., Безруких A.E., Кратасюк В. А. Принципы конструирования многокомпонентных реагентов для энзимологического анализа. - ДАН. - 2015. - Т. 461. - №4. - С. 472-475.
3. EsimbekovaE.N., KondikA.M., KratasyukV.A.
Bioluminescentenzymaticrapidassayofwaterintegraltoxicity. -
EnvironMonitAssess. - 2013. - V. 185. - I 7. - P. 5909-5916.
4. И.И.Гительзон, В.А.Кратасюк, В.H.Лопатин, Д.А.Апонасенко,
В.С.Филимонов, З.Г.Холостова, Н.А.Гаевский, Ю.С.Григорьев,
А.А.Тихомиров. Экологическаябиофизика. Т.1. Фотобиофизикаэкосистем. Логос, Москва, 2002
5. Жмур, 1997; Loon, Hermens, 1995.
6. Sirisha, V. L. Chapter Nine - Enzyme Immobilization: An Overview
on Methods, Support Material, and Applications of Immobilized Enzymes // V.L. Sirisha, A. Jain, A. Jain. - Advances in Food and Nutrition Research. -V: 79. - 2016, P: 179-211. - URL:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1043452616300377
7. Flores-Maltos, A., Rodri'guez-Dura'n, L. V., Renovato, J., Contreras, J. C., Rodri'guez, R., & Aguilar, C. N. (2011). Catalytical properties of free and immobilized Aspergillus niger tannase. Enzyme Research, 2011, 768183. http://dx.doi.org/10.4061/2011/768183.
8. Matto, M., & Husain, Q. (2009). Calcium alginate-starch hybrid support for both surface immobilization and entrapment of bitter gourd (Momordica charantia) peroxidase. Journal of Molecular Catalysis B Enzymatic, 57, 164-170.
9. Malhotra, D. B., & Chaubey, A. (2003). Biosensors for clinical diagnostics industry. Sensors and Actuators. B: Chemical, 91, 117-127.
10. Hasan, F., Shah, A. A., Javed, S., & Hameed, A. (2010). Enzymes used in detergents: Lipases. African Journal of Biotechnology, 9, 4836-4844.
11. R. Boluda, J.F. Quintanilla, J.A. Bonilla, E. Sa'ez, M. Gamo'n, Chemosphere 46 (2002) 355.
12. T. Reemtsma, A. Putschew, M. Jekel, Waste Manage. 19 (1999) 181.
13. T. Reemtsma, O. Fiehn, M. Jekel, Fresenius J. Anal. Chem. 363 (1999) 771.
14. L. Guzella, Chemosphere 37 (1998) 2895.
15. B. Brohon, R. Gourdon, Soil Biol. Biochem. 32 (2000) 853.
... всего 21 источников

🖼 Скриншоты

🛒 Оформить заказ

Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.

©2026 Cервис помощи студентам в выполнении работ