ВВЕДЕНИЕ 2
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1. Общая характеристика термического ожога 5
1.2. Общая характеристика лейкоцитоза 8
1.3. Способы лечения термических ожогов 9
1.4. Общая характеристика стволовых клеток и их применение 14
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.1. Моделирование термических ожогов 22
2.2. Получение клеток костного мозга 22
2.3. Измерение динамики заживления термических повреждений 24
2.4. Анализ гематологический показателей 24
2.5. Статистическая обработка данных 25
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 26
3.1. Оценка регенеративного процесса кожных покровов крыс до и после
коррекции клетками костного мозга 26
3.2. Оценка содержания форменных элементов периферической крови 30
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 39
ВЫВОДЫ 40
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 41
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 42
В Российской Федерации термические ожоги занимают третье место среди прочих травм. Ежегодно в России регистрируется более 800 000 случаев ожогов различной тяжести, частота которых составляет 300-350 случаев на 10 тыс. населения, из них 190-200 тыс. госпитализируются, около 15 тыс. пострадавших погибают. Из-за развивающихся рубцовых контрактур и осложнений со стороны внутренних органов 1-2,3% больных становятся инвалидами, а около 40% больных с глубокими ожогами нуждаются в дальнейших реконструктивно-восстановительных операциях.
Ожоговое повреждение - это открытое повреждение или деструкция кожи, ее придатков, слизистых оболочек термическими, химическими, электрическими факторами, лучевой энергией или их комбинациями. В России в 94,4% случаев ожогов встречается именно термическая травма. Для данного типа ожогов используется комплекс консервативных и хирургических методов (некрэктомия, пересадка кожи и др.).
В последние годы интерес к выделению и культивированию клеток костного мозга (ККМ) достиг высокого уровня. Клетки костного мозга отличаются своей способность к самоподдержанию и дифференцировке, т.е. в необходимый момент они могут при делении изменить свою программу и создать другие, новые, специализированные типы клеток.
К настоящему времени экспериментально доказаны
иммуномодулирующие свойства мезенхимальных стволовых клеток (МСК), что делает его целесообразным при лечении аутоимунных заболеваний. Области применения клеточной терапии являются клеточная и тканевая инженерия, заместительная терапия, косметологические процедуры (Калинина Н.И., 2011; Махмат К. и соавт., 2017).
В последние десятилетия появились доказательства того, что регенерация тканей, а также их физиологическое обновление в течение всей жизни животного и человека происходят благодаря стволовым клеткам. Важнейшей популяцией стволовых клеток взрослого организма являются мезенхимальные стволовые клетки (МСК) (Зафранская М.М., 2017). Впервые эти клетки были обнаружены и выделены из стромы костного мозга, и считалось, что МСК костного мозга служат источником для обновления и восстановления таких соединительных тканей, как костная, хрящевая и жировая.
Сегодня известно большое количество работ (Расулова М. Ф. (2009), Баранова Е. В. (2013), Закирьянова А. Р. (2014), Зайцева К. В. (2017), Гостюхиной А. А. (2017)), где описано положительное влияние клеток костного мозга при таких заболеваниях, как сахарный диабет, трофические язвы, термические, а также лучевые ожоги и др. Кроме того, в настоящее время все активно продолжается изучение как самих клеток, так и клеточной терапии в целом. Однако, остаются еще много неизученных вопросов использования клеток костного мозга в терапии, в том числе и при ожоговых повреждениях.
Исходя из вышесказанного, целью данной работы являлосьоценить динамику заживления термических повреждений кожных покровов крыс после коррекции клетками костного мозга.
Для достижения поставленной цели были выдвинуты следующие задачи:
1. Проанализировать развитие повреждений кожных покровов крыс с термическим ожогом и с коррекцией клетками костного мозга.
2. Сравнить количество форменных элементов крови крыс при
термическом ожоге и с коррекцией клетками костного мозга.
3. Оценить эффективность коррекции клетками костного мозга при термической травме.
Работа была выполнена на базе экспериментальной лаборатории биомедицинских технологий Филиала Томского научно-исследовательского института курортологии и физиотерапии Федерального государственного бюджетного учреждения «Сибирский федеральный научно-клинический центр федерального медико-биологического агентства» (руководитель лаборатории кандидат биологических наук К.В. Зайцев) под руководством научного сотрудника ЭЛБМТ ФГБУ СибФНКЦ ФМБА России, кандидата биологических наук А.А. Гостюхиной и кандидата биологических наук НИ ТГУ, доцента кафедры физиологии человека и животных Е. Ю. Федоруцевой.
При термическом повреждении кожных покровов крыс был отмечен ожог III степени, который характеризовался поражением всей толщи кожи. Кожный покров на месте ожоговой раны был плотным и неподвижным.У животных в течение первых суток после ожога наблюдались: вялость, нарушение координации движения, отказ от еды и питья.
Характер течения повреждений кожных покровов крыс с термическим ожогом и с коррекцией клетками костного мозга протекает в 4 стадии. Ожоговая рана у животных опытной группы, которым проводили коррекцию клетками костного мозга на второй неделе имела более выраженную в сравнении с контрольной группой животных тенденцию к уменьшению площади раневой поверхности и к отсутствию коллоидного рубца.
При гематологическом анализе крови было установлено, что у крыс опытной группы кроветворная система имела более выраженную реакцию на воспалительный процесс: на 7 день количество лейкоцитов возрастало на 25% по отношению к контрольной группе.
Таким образом, коррекция клетками костного мозга при термической травме у лабораторных крыс является эффективной, что потенциально может быть использовано в регенеративной медицине, комбустиологии
