Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
ℹ️Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
Список сокращений 2
2. Введение 4
3. Обзор научной литературы «Водные микобактерии, потенциально опасные
для здоровья людей и гидробионтов» 6
3.1. Нетуберкулезные микобактерии водопроводной воды, вызывающие
заболевания у людей 6
3.2. Нетуберкулезные микобактерии и проблемы профессиональной
аквариумистики 12
3.2.1. Санация воды, используемой в профессиональной аквариумистике, и ее
особенности, влияющие на микробиологический состав 12
3.2.2. Нетуберкулезные микобактерии, вызывающие заболевания у рыб 13
3.2.3. Профессиональные заболевания работников аквариумистики,
вызванные нетуберкулезными микобактериями 15
3.3. Биологические свойства микобактерий 17
3.3.1. Таксономическое положение и классификация 17
3.3.2. Структура оболочки нетуберкулезных микобактерий 18
3.3.3. Физиологические особенности нетуберкулезных микобактерий 19
4. Материалы и методы исследования 22
4.1. Объект исследования 22
4.2. Питательные среды для выделения и культивирования микобактерий 22
4.3. Окраска бактериальных мазков на кислото-спиртоустойчивость 24
4.4. Методики проведения идентификационных тестов 24
5. Результаты и их обсуждение 26
5.1. Подбор твердой питательной среды для выявления микобактерий из
аквариумной воды методом прямого высева 26
5.2. Выявление кислото-спиртоустойчивых клонов бактерий на неселективных
питательных средах 30
5.3. Идентификация выделенных бактериальных штаммов 31
5.3.1. Внешний вид колоний, особенности роста, отношение к свету 31
5.3.2. Кислото- спиртоустойчивость, морфология клеток 31
5.3.3. Идентификация штаммов 14, 40 и 48 по последовательностям гена 16s
рРНК 31
5.3.4. Фенотипические свойства штаммов 14, 40 и 48, постановка
заключительного идентификационного диагноза 39
5.3.5. Заключение 41
6. Выводы 41
7. Список литературы 42
8. Приложение 46
📖 Введение
Проблема микробиологической безопасности воды является актуальной как для слаборазвитых, так и для индустриальных стран. Особенно остро эта проблема стоит в крупных городах, где распределение воды осуществляется посредством централизованной системы водоснабжения. Вода центральной системы водоснабжения используется в бытовых целях, для приготовления пищи, доставляется в медицинские и общеобразовательные учреждения.
В профессиональной аквариумистике вода центральной системы водоснабжения используется для приготовления аквариумной воды. Патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, содержащиеся в воде, могут стать причиной заболеваний гидробионтов и персонала, обслуживающего работу аквариумов.
Особое внимание при рассмотрении проблем безопасности воды уделяется микобактериям. В настоящее время описан ряд условно-патогенных микобактерий, относящихся к группе нетуберкулезных, способных вызывать заболевания у человека и животных. Статистические данные регистрируют ежегодный рост количества случаев заболеваний кожи, лимфатических сосудов, легочных и генирализованных инфекций, вызванных у людей нетуберкулезными микобактериями. Сельское хозяйство, рыбная промышленность, владельцы животных и держатели аквариумов терпят убытки в связи с высокой заболеваемостью животных нетуберкулезными микобактериями.
В крупнотоннажной аквариумистике используется система замкнутой очистки воды, которая обеспечивает рециркуляцию и может стать источником накопления патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Широкому распространению и накоплению микобактерий в системах очистки воды способствует специфическое строение оболочки микобактерий. В ней содержатся гидрофобные миколовые кислоты, снижающие чувствительность микобактерий к дезинфекции, облегчающие их прикрепление к твердым поверхностям и образование биопленок.
В научной литературе практически отсутствуют данные о выявлении микобактерий в воде крупнотоннажных аквариумов, оснащенных системой замкнутой очистки воды. Данная работа явилась одним из этапов сотрудничества кафедры микробиологии с Санкт-Петербургским океанариумом. Изучение разнообразия микобактерий, содержащихся в воде аквариумов необходимо для оценки рисков заражения нетуберкулезными микобактериями гидробионтов и персонала океанариума, а также постоянного совершенствования методов очистки аквариумной воды, проводимого Санкт- Петербургским океанариумом.
В связи с этим целью данного исследования стало выявление микобактерий в аквариумной воде, находящейся в замкнутой системе очистки, на примере аквариума № 19 Санкт-Петербургского океанариума.
Для выполнения этой цели были поставлены следующие задачи:
1. Подобрать питательную среду для выделения микобактерий из аквариумной воды.
2. Разработать алгоритм выделения микобактерий из аквариумной воды.
3. Выделить и очистить изоляты микобактерий, оценить их численность в исследуемой воде.
4. Провести идентификацию выделенных штаммов микобактерий.
✅ Заключение
Таким образом, алгоритм выявления микобактерий из аквариумной воды с помощью прямого высева на неселективную среду Lowenstein-Jensen с желточной эмульсией и скрининг клонов на кислото-спиртоустойчивость оказался успешным.
В воде аквариума № 19 установлено присутствие микобактерий в количестве не менее 10 КОЕ/мл. Реальное содержание микобактерий с учетом их присутствия в ассоциациях и биопленках (смешанных колониях) может быть на порядок выше. Важно отметить, что это высокая численность микобактерий в аквариумной воде, если учесть, что общее микробное число исследованной воды - 6,3 х 102 КОЕ/мл. По-видимому, причиной этого является жесткая обработка воды в замкнутой системе очистки с целью ее санации.
Выделенные микобактерии (быстрорастущая группа) представлены следующими видами: M. porcinum, M. abscessus и M. chelonae. Представители видаM. chelonae, наряду с M. marinum, M. fortuitum являются этиологическими агентами микобактериозов более 150 видов рыб (Decostere et al., 2004; Passantino et al., 2008; Gauthier and Rhodes, 2009; Shukla et al., 2013) . Бактерии видаM. abscessus описаны как возбудители болезней пресноводных и морских декоративных рыб (Watral and Kent, 2007; Zanoni et al., 2008; Jacobs et al., 2009).
Данные виды микобактерий представляют определенную опасность для персонала океанариума. Микобактерии, обнаруженные нами в аквариумной воде, являются условно-патогенными и способны вызывать поражения у аквариумистов и работников аквакультуры (Decostere et al., 2004).