РЕФЕРАТ 2
ВВЕДЕНИЕ 4
1 Обзор литературы 6
1.1 Характеристика наночастиц 6
1.2 Возможность применения наночастиц в медицинских
исследования 8
1.3 Характеристика нейтрофильных гранулоцитов 10
1.4 Характеристика лимфоцитов 11
1.5 Хемилюминесценция 13
1.6 Биолюминесценция 17
2 Материалы и методы исследования 20
2.1 Материалы исследования 20
2.2 Методы исследования 20
2.2.1 Выделение нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов 20
2.2.2. Хемилюминесцентный метод 22
2.3 Биолюминесцентное определение активности дегидрогеназ 24
2.4 Статистические методы исследования 27
3 Результаты и их обсуждение 28
Заключение 37
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
Использование различных наночастиц находит все большее применение и в лечении больных с онкологическими заболеваниями. Наряду с этим, высокая проникающая способность наночастиц вызывает ряд опасений в связи с их возможным влиянием на различные клетки и системы здорового организма в том числе системы.
В настоящее время интенсивные исследования проводится, чтобы применить нанотехнологии в различных областях медицины, что способствует активному расширению кругу наночастиц и подходов к их использованию в диагностике и терапии, в том числе, для развития систем доставки лекарственных средств к органам и тканям. Использование различных наночастиц все больше и больше используется в лечении больных с онкологическими заболеваниями. Здесь мы сталкиваемся с проблемой повышения эффективности лечения лекарственными препаратами и снижение их токсического действия на организм. Решением этой проблемы может послужить адресная доставка лекарств. К ее основным преимуществам относят возможность значительного уменьшения токсического действия лекарств на другие органы и системы организма, возможность направлять и удерживать в определенном месте наночастицы с лекарством при помощи магнитного поля. Поэтому возникает интерес к магнитным наночастицам. В качестве магнитных наночастиц был выбран ферригидрит, который относится к антиферромагнетикам. Размер частиц равен (2-7 нм).
Целью данной работы явилось определение биологического влияния ферромагнитных наночастиц на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов периферической крови in vitro. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
1) Определения раннего хемилюминесцентного ответа нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов крови при воздействии наночастиц ферригидрита в концентрации 5 и 20 мг/мл.
2) Определения позднего хемилюминесцентного ответа нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов крови при воздействии наночастиц ферригидрита в концентрации 5 и 20 мг/мл.
3) Определения активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови при воздействии наночастиц ферригидрита в концентрации 5 и 20 мг/мл.
Для определения функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови использовали хемилюминесцентный метод.
Для определения активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови использовали биолюминесцентный метод.
При определении раннего хемилюминесцентного ответа нейтрофильных гранулоцитов крови при воздействии НЧ от минимальной концентрации 5 мг/мл к максимальной 20 мг/мл было выявлено достоверное снижение максимальной интенсивности зимозан-индуцированного хемилюминесцентного процесса и площади под кривой, а также времени выхода на пик.
При определении позднего хемилюминесцентного ответа нейтрофильных гранулоцитов крови при воздействии НЧ от минимальной концентрации 5 мг/мл к максимальной 20 мг/мл, было выявлено достоверное снижение интенсивности зимозан-индуцированного хемилюминесцентного процесса, площади под кривой, и времени выхода на пик, что отражает снижение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов под длительным воздействием магнитных наночастиц.
При исследовании раннего и позднего ответов лимфоцитов на воздействие ферромагнитных наночастиц in vitroв минимальной и максимальной концентрациях не было выявлено достоверных различий с контрольной группой. При этом имеет место активизация метаболических процессов (НАДФИЦДГ и Г3ФДГ) при воздействии НЧ от минимально концентрации 5 мг/мл к максимальной 20 мг/мл. Таким образом, можно отметить, что НЧ в минимальной и максимальной концентрации имеют нейтральное действие на лимфоциты человека, не подвергая изменениям их биологические свойства.
