ВВЕДЕНИЕ 3
1 ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 5
1.1 Свободные радикалы: характеристика, источники образования,
биологические эффекты 5
1.4 Антиоксидантная система 7
1.5 Щитовидная железа. Строение и функции 17
1.6 Диффузный токсический зоб 19
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 23
2.1 Объект исследования 23
2.2 Определение гемоглобина 23
2.3 Определение содержания восстановленного глутатиона 24
2.4 Определение содержания окисленного глутатиона 26
2.5 Раздельное определение восстановленной и окисленных форм
аскорбиновой кислоты в эритроцитах 27
2.6 Статистическая обработка результатов 29
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 31
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 32
Одними из самых распространенных эндокринных патологий в настоящее время по праву считаются заболевания щитовидной железы. Диффузный токсический зоб — аутоиммунное заболевание, связанное с избыточной секрецией тиреоидных гормонов щитовидной железой. Широкая распространенность ДТЗ, поражающего до 2—5% популяции, а также сопряженные с ним многочисленные поражения практически всех органов и систем обусловливают медико-социальную значимость этого заболевания [1].
Основные биологические функции щитовидной железы - это участие в углеводном и основном обменах. Поэтому нарушения в нормальном функционировании железы сказывается на работе как отдельного органа и системы, так и на жизнедеятельности всего организма [2].
Гормоны щитовидной железы поддерживают нормальное развитие организма, регулируют основные процессы жизнедеятельности, связанные с обменом веществ. Точной приложения гормонов ЩЖ являются митохондрии, при сбое в работе которых происходит интенсификация процесса образования АФК [2]. В связи с этим, оптимизация работы щитовидной железы является непременным условием успеха комплексной терапии различных патологических состояний [3].
В ряде исследований продемонстрировано влияние изменений функциональной активности ЩЖ на изменение анти/прооксидантного статуса. Вместе с тем данные литературы о влиянии тиреоидных гормонов на интенсивность окислительных процессов достаточно противоречивы [4]. В ряде работ указывается на интенсификацию процессов ПОЛ в условиях гипертиреоза [1]. Другие исследователи утверждают, что часто тиреотоксикоз не сопровождается накопление метаболитов ПОЛ [4]
Актуальность настоящей работы состоит в том, что до сих пор нет четкого представления о состоянии антиоксидантной системы при заболеваниях щитовидной железы, в частности диффузном токсическом зобе. Данные, свидетельствующие о нарушении функционирования работы антиоксидантной системы при патологиях щитовидной железы противоречивы и неоднозначны.
Целью данной работы явилось исследование уровня низкомолекулярных компонентов системы антиоксидантной защиты - восстановленной и окисленной форм глутатиона и аскорбиновой кислоты при диффузном токсическом зобе.
В задачи входило:
1. Исследование содержания восстановленных и окисленных форм глутатиона и аскорбиновой кислоты в эритроцитах условно здоровых женщин.
2. Анализ содержания восстановленных и окисленных форм глутатиона и аскорбиновой кислоты в эритроцитах женщин с диффузным токсическим зобом.
Данная работа была выполнена на базе кафедры медицинской биологии ИФБиБТ СФУ, гормональной лаборатории Красноярской краевой больницы № 1, Красноярской краевой станции переливания крови и является частью исследований механизмов развития процессов свободнорадикального окисления при патологиях щитовидной железы.
1. Якубовский, С.В. Использование сукцинатсодержащих препаратов в комплексном лечении пациентов с диффузным токсическим зобом / С.В. Якубовский, Г.Г. Кондратенко, И.И. Попова // УО Белорус. гос. мед. ун-та. Клиническая медицина. - 2014. - № 8. - С. 50-53.
2. Тепперман, Дж. Физиология обмена веществ и эндокринной системы : учеб. пособие для вузов / Дж. Тепперман, Х. Тепперман ; под ред. Я. И. Ажипы ; Вводный курс : пер. с англ. - Москва : Мир, 1989. - 656 с.
3. Манюк, Е.С. Коррекция морфофункциональных изменений щитовид¬ной железы при гипо- и гипертиреозе аконитом байкальским (экспери-ментальное исследование) : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.16 / Манюк Елена Степановна. - Иркутск, 2008. - 130 с.
4. Venditti, P. Thyroid hormone-induced oxidative stress / P. Venditti, Di Meo // Cellular and Mollecular Life Science. - 2006. - P. 414-434.
5. Halliwell, B. Free Radicals in Biology and Medicine / B. Halliwell, M.C.Gutridge ; - 4th. ed. - Oxford : Oxford University Press, 2007. - 851 p.
6. Попов, С.С. Влияние мелатонина на свободнорадикальный гомеостаз в тканях крыс при тиреотоксикозе / С.С Попов, А.Н. Пашков, Т.Н. Попов, В.И. Золоедов, А.В. Семенихина, Т.И. Рахманова // Воронеж. гос. ун-т. Биомедицинская химия. - 2008. - Т. 54. - № 1. - С. 114-121.
7. Барабой, В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов / В. А. Барабой // Успехи современной биологии. - 1991. -Т. 111. - № 6. - С. 21-28.
8. Ланкин, В. З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патоло-гических состояниях : пособие для врачей / В. З. Ланкин, А. К. Тихазе, Ю. Н. Беленков. - М. : Наука, 2001. - 78 с.
9. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Вла-димиров // Вестн. РАМН.- 1998.- № 7.- С. 43-51.
10. Зайцев, В. Г. Методологические аспекты исследований свободно-радикального окисления и антиоксидантной системы организма / В. Г Зайцев // Вестн. Волгоград. мед. акад. - 1984. - № 4. -С. 49-53.
11. Меньщикова, Е. Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окисли-тельных процессов / Е. Б. Меньщикова, Н. К. Зенков // Ин-т общ. пат. и экол. чел-ка СО РАМН. Успехи современной биологии. - 1993. - Т.113. - № 4. - С. 442-445.
12. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты : учеб. пособие для специалистов в области изучения радикальных окислительных про-цессов в биологических системах / Е. Б. Менщикова, В. З. Ланкин, Н. К, Зенков, И. А. Бондар, Н. Ф. Круговых, В. А. Труфакин. - М.: Слово, 2006. - 556 с.
13. Lemaitre, D. Effects of Fatty Acids on Human Platelet Glutathione Peroxidase: Possible Role of Oxidative Stress / D. Lemaitre, E. Vericel, A. Polette // Biochem. Pharmacology. - 1997. - № 53. - P. 479-486.
14. Sun, W.-M. Regulation of g-glutamyl-cysteine synthetase by protein phosphorylation / W.-M. Sun, Z.-Z. Huang, S.C. Lu // Biochem. J. - 1996. - №320. - P. 321-328.
15. Диагностика и лечение окислительного стресса при остром панкреа¬тите / Д. В. Черданцев, Ю. С. Винник, Э. В. Каспаров, Н. М. Титова. - Красноярск : АРТЭ, 2002. - 148 с.
16. Meister, A. Glutathione, ascorbate, and cellular protection / A. Meister // Canser research (suppl.). - 1994. - № 6. - P.1969-1975.
17. Кения, М. В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окисли-тельном стрессе / М. В. Кения, А. И. Лукаш, Е. П. Гуськов // Успехи современной биологии. - 1993. - № 4. - С.456-470.
18. Sato, Y. Novel assay for glutathione reductase activity by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection / Y. Sato, M. Naoi, T. Ohkuwa // J. Chromatography B : Biomedical science. Appl. - 1998. - №705. - P. 23-28.
19. Huisman, M. Derivated fetal haemoglobin as a marker for red cell age in the human fetus reflecting stimulated or impaired red blood cell production / D. Huisman, D. Busch, D. Burkholder // Prenatal diagnostic. - 2001. - № 7. - P. 523-528.
20. Селочник, Л.И. Определение содержания аскорбиновой кислоты в надпочечнике крысы / Л. И. Селочник, К. Ф. Кацер // Лаб. дело. - 1967. - № 5. - С.179-180.
21. May, J.M. Interaction of ascorbate and a-tocopherol in resealed human erythrocyte ghosts-Transmembrane electron transfer and protection from lipid peroxidation / J. M. May, Z.-C. Qu, J. D. Morrow // Biological chemistry. - 1996. - № 271. - P. 10577-10582.
22. Халмурадов, А.Г. Механизмы транспорта аскорбиновой кислоты через биологические мембраны / А. Г. Халмурадов, В. Н. Тоцкий // Украинский биохимический журнал. - 1982. - № 1. - С. 96-107.
23. Кулинский, В. И. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатиона / В. И. Кулинский, Л. С. Колесниченко // Успехи современ¬ной биологии. - 1993. - Вып.3. - С. 187-195.
24. Van Duijn, M. N. Erythrocytes reduce extracellular ascorbate free radicals using intracellular ascorbate as an electron donor / M. N. Van Duijn // Biological chemistry. - 2000. - № 36. - P. 27720-27725.
25. Николаева, М. Я. О причине накопления дегидроаскорбиновой кислоты в крови больных инсулинзависимым сахарным диабетом / М. Я. Николаева, Б. С. Балмуханов, Р. М. Пархимович // Вопросы медицинской химии. - 1994. - № 4. - С. 14-17.
26. Эскин, И.А. Основы физиологии эндокринных желез : учеб. пособие для биол. специальностей ун-тов / И. А. Эскин. - М.: Высшая школа, 1996. - 356 с.
27. Тепперман, Дж. Физиология обмена веществ и эндокринной системы : учеб. пособие для вузов / Дж. Тепперман, Х. Тепперман ; под ред. Я. И. Ажипы ; Вводный курс : пер. с англ. - М.: Мир, 1989. - 656 с.
28. Дедов, И. И. Йоддефицитные заболевания в Российской федерации / И. И. Дедов, Н. Ю. Свириденко // Вестник РАМН. - 2001. - № 6. - С.3¬12.
29. Левченко, И. А. Субклинический гипотиреоз / И. А. Левченко, В. В. Фадеев // Проблемы эндокринологии. - 2002. - № 2. - С. 21-23.
30. Благосклонная, Я. В. Заболевания щитовидной железы: современное лечение и профилактика : науч. изд. / Я. В Благосклонная, А. Ю. Бабенко, Е. И. Красильникова. -СПб. : Невский проспект, 2005. - 124 с.
31. Валидипа, Е.А. Заболевания щитовидной железы: науч. изд / Е.А. Благосклонная. - СПб.: Спутник врача, 2006. - 355с.
32. Оценка структурно-функционального состояния клетки: учеб. пособие / Н.М. Титова [ и др.] - Красноярск. ИПК СФУ, 2009. - 61с.
33. Beutler, E. Red cell metabolism. A Manual of Bio- chemical Method / E. Beutler. - Orlando: Grune and Stratton, 1990. - 188 p.
34. Асатиани, В.С. Биохимический анализ: науч. изд / В.С. Асатиани. - Тбилиси: Грузмедгиз, 1953 - 943с.
35. Шпаков, А.Е. К методике раздельного определения общей, редуцированной и дегидроаскорбиновой кислот / А.Е. Шпаков // Лаб. дело. - 1967. - №5. - С. 305 - 306.
36. Resch, U. Antioxidant status in thyroid dusfunction / U. Resch, G. Helses, F. Tatzber, H. Sinzinger // Clim Lab Med. - 2002. - № 40. - P. 1132-113
37. Кольтовер, В.К. Свободнорадикальная теория старения: науч. изд / В.К. Кольтовер // Успехи геронтологии. - 2000. - №4.- С. 273.
38. Розен, В.Б. Основы эндокринологии: учебник / В.Б. Розен. - М.: Высш.шк, 1984 - 336с.
39. Wu, D. Interaction of 1-Hydroxyethyl Radical With Glutathi-one, Ascorbic Acid and a-Tocopherol /D. Wu, D.A. Stoyanovsky, A.I. Cederbaum // Free Radic. Biology &Med, - 1998. - № 1. - P. 132 - 138.
40. Попов, С.С. Влияние мелатонина на свободнорадикальный гомеостаз в таканях крыс при тиреотоксикозе /С.С. Попов, А.Н. Пашков, Т.Н. Попова, В.И. Золоедов, А.В. Семенихина, Т.И. Рахманова // Биомедицинская химия, - 2008.- С. 114-121.
41. Скулачев, В.П. Феноптоз: запраграммированная смерть организма/ В.П. Скулачев //Биохимия, - 1999. - Т. 64, № 12. - С. 1679-1688.
42. Droge, W. Free Radicals in the Physiological Control of Cell Function / W. Droge //Physiol. Rev, - 2002.- № 82. - P. 47-95.
43. Полесская, О.Г. Растительная клетка и активные формы : науч. изд / О.Г. Полесская. - М.: 2007. - 140с.
44. Bouvier, F Induction and Control of Choroplast-Speeific Carotenoid Genes by Oxidative Stress / F. Bouvier, R.A. Backhaus, B. Camara // J. Biol. Chem., - 1998. - V. 273. - P. 30651-30659.
45. Козаченко, А.И. Влияние аскорбата и а-токоферола на устойчивость Р-каротина к окислению / А.И. Козаченко, С.М. Гуревич, Л.Г. Наглер // Бюлл. эксперим биологии и медицины, - 2005. - №7. -С. 59-63.
46. Никинченко, Ю.В. Ферментативная регуляция свободно-радикального окисления липидов при действии факторов, влияющих на скорость старения / Ю.В. Никинченко // Свобод.- радикал. процессы: экол., фармокол. и клин. аспекты, 1999.
47. Коновалова, Г.К. Комплекс витаминов - антиоксидантов эффективно подавляет свободнорадикальное окисление фосфолипидов в ЛПНП плазмы крови и мембранных структур печени и миокарда/ Г.Г.Коновалова, М.О. Лисина, А.К. Тихазе, В.З. Ланкин // Бюллетень эксперим. биол. и мед, - 2003. - № 2. - С.166-169.
48. Wang, P.J. Vitamin E and its function in membranes / P.J. Wang, P.J. Quinn, J.A. // Lee Progr. Lip. Res., - 1999. - № 4. - P. 309 - 336.
49. Polette, A. et al. Effects of Fatty Acids on Human Platelet Glutathione Peroxidase: Possible Role of Oxidative Stress/ D. Lemaitre, E. Vericel, A. Polette // Biochem. Pharmacology, - 1997. - № 53. - P. 479 - 486.