🔍 Поиск готовых работ

🔍 Поиск работ

Флуориметрическое определение серотонина в растительном сырье

Работа №201200

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

химия

Объем работы80
Год сдачи2023
Стоимость4225 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
27
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 24
1 Литературный обзор 14
1.1 Облепиха крушиновидная 14
1.2 Характеристика серотонина 15
1.3 Методы определения серотонина 17
2.1 Объект исследования, реактивы, приборы и материалы 22
2.2 Методика приготовления экстрактов из растительного сырья облепихи 23
2.2.1 Методика приготовления экстрактов методом однократной
экстракции 23
2.2.2 Методика приготовления экстрактов методом двукратной
экстракции 23
2.2.3 Методика приготовления экстрактов методом трехкратной
экстракции 24
2.2.4 Методика приготовления экстрактов методом четырехкратной
экстракции 24
2.3 Метод флуориметрии 24
2.4 Методика определения содержания серотонина в экстрактах методом
флуориметрии 27
2.4.1 Методика построения градуировочного графика 27
3 Обсуждение результатов 29
3.1 Определение содержания серотонина в модельных растворах 29
3.2 Количественное определение серотонина в исследуемых экстрактах 32
3.3 Метод «введено-найдено» 36
4. Финансовый менеджмент, ресурсоэффективность и ресурсосбережение 38
4.1 Оценка коммерческого потенциала и перспективности проведения
научных исследований с позиции ресурсоэффективности и ресурсосбережения 38
4.1.1 Потенциальные потребители результатов исследования 38
4.1.2 Анализ конкурентных технических решений 38
4.1.3 SWOT-анализ 40
4.2 Планирование научно-исследовательских работ 43
4.2.1 Структура работ в рамках научного исследования 43
4.2.2 Определение трудоемкости выполнения работ 44
4.2.3 Разработка графика проведения научного исследования 46
4.3 Бюджет научно-технического исследования (НТИ) 48
4.3.1 Расчет материальных затрат НТИ 48
4.3.2 Расчет затрат на оборудование 49
4.3.3 Расчет основной заработной платы 50
4.3.4 Расчет дополнительной заработной платы 51
4.3.5 Отчисления во внебюджетные фонды (страховые отчисления) 52
4.3.6 Накладные расходы 52
4.3.7 Прочие прямые затраты 53
4.3.8 Формирование бюджета затрат НТИ 53
4.3 Определение ресурсной (ресурсосберегающей), финансовой, бюджетной, социальной и экономической эффективности исследования 54
5 Социальная ответственность 56
5.1 Правовые и организационные вопросы обеспечения безопасности 56
5.1.1 Правовые нормы трудового законодательства, характерные для
рабочей зоны исследователя 56
5.1.2 Организационные мероприятия при компоновке рабочей зоны
исследователя 59
5.2 Производственная безопасность 59
5.2.1 Анализ опасных и вредных производственных факторов 59
5.2.2 Производственные факторы, связанные с аномальными
микроклиматическими параметрами воздушной среды на местонахождении работающего 61
5.2.3 Повышенный уровень и другие неблагоприятные характеристики
шума 62
5.2.4 Отсутствие или недостаток необходимого искусственного
освещения 63
5.2.5 Производственные факторы, связанные с электрическим током 65
5.2.6 Производственные факторы, обладающие свойствами химического
воздействия на организм человека 66
5.3 Экологическая безопасность 68
5.3.1 Безопасность в чрезвычайных ситуациях 68
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 71
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


Крушиновидная облепиха - урожайное растение, кладезь целебных свойств и интересный для коммерческой деятельности объект. Ягоды, листья, ветки, косточки и кора этого растения - ценные источники полезных веществ. В частности, в коре, ветках и листьях облепихи содержится медиатор центральной нервной системы и тканевый гормон серотонин, поэтому разработка методики его выделения из неплодовой части облепихи может дать дополнительный источник этого жизненно важного вещества [1].
Цель работы:
Подбор рабочих условий для определения серотонина в коре, ветках и листьях облепихи крушиновидной методом флуориметрии
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Подобрать оптимальные условия выделения серотонина из растительного сырья методом экстракции;
2. Исследовать оптические свойства серотонина в модельных растворах методом флуориметрии;
3. Провести количественное определение серотонина в экстрактах методом флуориметрии;
4. Провести сравнение полученных данных методом флуориметрии и ВЭЖХ.
Практическая значимость
Подобранные условия определения серотонина в растительном сырье методом флуориметрии могут быть применимы для контроля серотонина в пищевой, косметической и медицинской промышленностях.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!


В ходе проведенного исследования во всех образцах неплодовой части облепихи крушиновидной был обнаружен серотонин. В результате выполнения работы были получены следующие результаты:
1. Были подобраны оптимальные условия регистрации аналитического сигнала: длина волны возбуждения - 280 нм, длина волны испускания - 335 нм.
2. Исследованы флуоресцентные свойства стандартного образца серотонина в модельных растворах.
3. На основе измерений аналитического сигнала в модельных растворах были построены градуировочные кривые.
4. Количественно определено содержание серотонина в смеси веток и коры.
5. Проведена корреляция содержания серотонина в растительном сырье арбитражным методом - ВЭЖХ, было установлено, что наблюдается динамика для 2-кратных и 4-кратных экстрактов смеси веток и коры.



1. Крушиновидная облепиха: описание и особенности выращивания [Электронный ресурс] - режим доступа:https://geostart.ru/post/30825,свободный (дата обращения: 26.01.2023).
2. Облепиха крушиновидная - Hippophae rhamnoides [Электронный ресурс] - режим доступа: http://ecosystema.ru/08nature/fruits/085.htm, свободный. - Заглавие с экрана. — (Дата обращения: 26.01.2023).
3. Где в России растет облепиха? [Электронный ресурс] - режим доступа: https://sovhozik.ru/shrubs/oblepiha/gde-v-rossii-rastet-oblepiha, свободный (Дата обращения: 26.01.2023).
4. Скалий Л.П. Облепиха: Пособие для садоводов-любителей / Л.П.Скалий. - М. : Изд-во «Ниола-Пресс»; Изд. дом «ЮНИОН-паблик», 2007. -240 с.
5. Christaki E. Hippophae Rhamnoides L. (Sea Buckthorn): a Potential Source of Nutraceuticals / E. Christaki // Food and Public Health. - 2012. - Vol.2. - P. 69-72.
6. Serotonin (Compound) [Электронный ресурс] - режим доступа: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5202, свободный. - Заглавие с экрана. — (Дата обращения: 26.01.2023).
7. Serotonin [Электронный ресурс] - режим доступа:
https://www.chemspider.com/Chemical-Structure.5013.html, свободный - Заглавие с экрана. — (Дата обращения: 26.01.2023).
8. Биомедиаторы в растениях : учеб. пособие / В. М. Юрин. - Минск : БГУ, 2013. - 199 с
9. Crosti P.F., Lucchelli P.E. An easy method to determine the serotonin content of human platelets // J. Clin. Pathol. - 1962. - V. 15. - P. 191- 193.
10. Tachiki K.H., Aprison M.H. Fluorometric assay for 5- hydroxytryptophan with sensitivity in the picomole range // Anal Chem. - 1975. - V. 47, № 1. - P. 7-11.
11. Peng Q., Jiang C. A new spectrofluorimetric method for determination of trace amounts 5-hydroxytryptamine in human urine and serum // J. Fluoresc. - 2007. - V. 17, № 3. - P. 339-343.
12. Eaton J.L., Mullins D.E. Quantitative high-performance thin-layer
chromatography of dansyl derivatives of biogenic amine // Anal. Biochem. - 1988. - Vol. 172, № 2. - P. 484-487.
13. Alemany G., Nicolau M.C, Gamundi A, Rial R. Thin-layer chromatographic determination of brain catecholamines and 5- hydroxytryptamine // Biomed Chromatogr. - 1993. - V. 7, № 6. - P. 315- 316.
14. Kato N, Kojima T, Yoshiyagawa S, Ohta H, Toriba A, Nishimura H, Hayakawa K. Rapid and sensitive determination of tryptophan, serotonin and psychoactive tryptamines by thin-layer chromatography/fluorescence detection // J. Chromatogr. A. - 2007. - V. 1145, № 1-2. - P. 229-233.
15. Engbaek F., Voldby B. Radioimmunoassay of serotonin (5- hydroxytryptamine) in cerebrospinal fluid, plasma, and serum // Clin Chem. - 1982. - Vol. 28, № 4, Pt 1. - P. 624-628.
16. Haritou S.J., Zylstra R., Ralli C., Turner S., Tortonese D.J. Seasonal changes in circadian peripheral plasma concentrations of melatonin, 113 serotonin, dopamineand cortisol in aged horses with Cushing's disease under natural photoperiod // J Neuroendocrinol. - 2008. - Vol. 20, № 8. - P. 988-996.
17. Torfs S.C., Maes A.A., Delesalle C.J., Deprez P., Croubels S.M. Comparative analysis of serotonin in equine plasma with liquid chromatography-tandem mass spectrometry and enzyme-linked immunosorbent assay // J Vet Diagn Invest. - 2012. - V.24, № 6. - P. 1035-1042.
18. Nichkova M.I., Huisman H., Wynveen P.M., Marc D.T., Olson K.L., Kellermann G.H. Evaluation of a novel ELISA for serotonin: urinary serotonin as a potential biomarker for depression // Anal Bioanal Chem. - 2012. - V. 402, № 4. - P. 1593-1600
19. Chauveau J., Fert V., Morel A.M., Delaage M.A. Rapid and specific enzyme immunoassay of serotonin // Clin Chem. - 1991. - Vol. 37, № 7. - P. 1178-1184.
20. Kuo T.R., Chen J.S., Chiu Y.C., Tsai C.Y., Hu C.C., Chen C.C. Quantitative analysis of multiple urinary biomarkers of carcinoid tumors through gold- nanoparticle-assisted laser desorption-ionization time-offlight mass spectrometry // Anal. Chim. Acta. - 2011. - V. 699, № 1. - P.81-86.
21. Nguyen D.T., Cho I.S., Kim J.W., Kim K.R., Lee G., Paik M.J. Acidic metabolite profiling analysis of catecholamine and serotonin as Oethoxycarbonyl/tert-butyldimethylsilyl derivatives by gas chromatography¬mass spectrometry // Biomed. Chromatogr. - 2013. - V. 27, № 2. - P. 216-221.
22. Sano M., Ferchaud-Roucher V., Nael C., Aguesse A., Poupeau G., Castellano
B., Darmaun D. Simultaneous detection of stable isotopelabeled and unlabeled l-tryptophan and of its main metabolites, lkynurenine, serotonin and quinolinic acid, by gas chromatography/negative ion chemical ionization mass
spectrometry. // J Mass Spectrom. - 2014. - V. 49, № 2. - P. 128-135.
23. Maurer-Spurej E., Dyker K, Gahl W.A., Devine D.V. A novel
immunocytochemical assay for the detection of serotonin in platelets. // Br. J. Haematol. - 2002. - V. 116, № 3. - P. 604-611.
24. Sa M., Ying L., Tang A.G., Xiao L.D., Ren Y.P. Simultaneous determination of tyrosine, tryptophan and 5-hydroxytryptamine in serum of MDD patients by high performance liquid chromatography with fluorescence detection. // Clin. Chim. Acta. - 2012. - V. 413, № 11-12. - P. 973-977.
25. Atkinson W., Lockhart S.J., Houghton L.A., Keevil B.G. Validation of the measurement of low concentrations of 5-hydroxytryptamine in plasma using high performance liquid chromatography. // J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. - 2006. - V. 832, № 1. - P. 173-176.
26. Wang H., Walaszczyk E.J., Li K., Chung-Davidson Y.W., Li W. High- performance liquid chromatography with fluorescence detection and ultra-performance liquid chromatography with electrospray tandem mass spectrometry method for the determination of indoleamine 115 neurotransmitters and their metabolites in sea lamprey plasma. // Anal. Chim. Acta. - 2012. - V. 721. - P. 147-153.
27. Gloria Ebube Uwaya, Omolola Esther Fayemi, Electrochemical detection of serotonin in banana at green mediated PPy/Fe3O4NPs nanocomposites modified electrodes.// Sensing and Bio-Sensing Research, Volume 28, 2020, 100338.
28. Sathish Panneer Selvam, Kyusik Yun, A self-assembled silver chalcogenide electrochemical sensor based on rGO-Ag2Se for highly selective detection of serotonin. // Sensors and Actuators B: Chemical, Volume 302, 2020, 127161.
29. Sai Prasad Nayak, V. Prathyusha, J.K. Kiran Kumar, Eco-friendly surface modification of oxidized carbon nanotubes with curcumin for simultaneous electrochemical detection of dopamine and serotonin. // Materials Chemistry and Physics,Volume 287,2022,126293.
30. Mengjuan Kong, Peng Jin, Wei Wei, Weifeng Wang, Hongyan Qin, Hongli Chen, Jiang He, Covalent organic frameworks (COF-300-AR) with unique catalytic performance in luminol chemiluminescence for sensitive detection of serotonin. // Microchemical Journal,Volume 160, Part A, 2021, 105650.
31. Ayoub Boulghobra, Myriam Bonose, Isabelle Billault, Antoine Pallandre, A rapid and sensitive method for the quantification of dopamine and serotonin metabolites in cerebrospinal fluid based on UHPLC with fluorescence detection. // Journal of Chromatography B, Volume 1200, 2022,123264.
32. Sachin Ganpat Chavan, Ajay Kumar Yagati, Hyun Tae Kim, Eunjian Jin, Sung Ryul Park, Dilip V. Patil, Min-Ho Lee, Dimeric-serotonin bivalent ligands induced gold nanoparticle aggregation for highly sensitive and selective serotonin biosensor. // Biosensors and Bioelectronics, Volume 191, 2021, 113447.
33. Torfs S.C., Maes A.A., Delesalle C.J., Deprez P., Croubels S.M. Comparative analysis of serotonin in equine plasma with liquid chromatography-tandem mass spectrometry and enzyme-linked immunosorbent assay. // J Vet Diagn Invest. - 2012. - V.24, № 6. - P. 1035-1042.
34. P. Chandrani Gunaratna, Karen K. Cadle, Candice B. Kissinger, An improved liquid chromatographic method with electrochemical detection for direct determination of serotonin in microdialysates from Caudate-putamen and pineal gland regions of rat brain. // Journal of Neuroscience Methods, Volume 155, Issue 1, 2006, P. 143-148.
35. Suchanat Boonkaew, Anna Dettlaff, Michal Sobaszek, Robert Bogdanowicz, Martin Jonsson-Niedziolka, Electrochemical determination of neurotransmitter serotonin using boron/nitrogen co-doped diamond-graphene nanowall- structured particles. // Journal of Electroanalytical Chemistry, Volume 926, 2022, 116938.
36. Tung-Hu Tsai, Wei-Jern Tsai, Chieh-Fu Chen, Aspirin inhibits collagen- induced platelet serotonin release, as measured by microbore high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, Volume 669, Issue 2, 1995, P. 404-407.
37. Min Liu, Jin Xiang, Juan Zhou, Hong Ding, A disposable amperometric sensor for rapid detection of serotonin in the blood and brain of the depressed mice based on Nafion membrane-coated colloidal gold screen-printed electrode. //Journal of Electroanalytical Chemistry,Volume 640, Issues 1-2, 2010, P. 1-7.
38. Tsang C.W., Chan C.L., Li P., Pang S.F. Analysis of 5- methoxytryptamine at the femtomole level in the rat and quail brain by gas chromatography-electron- capture negative-ion chemical ionization mass spectrometry. // J Chromatogr B Biomed Appl. - 1996. - V. 682, № 2. - P. 185-194. .
39. Pussard E., Guiqueno N., Adam O., Giudicelli J.F. Validation of HPLC- amperometric detection to measure serotonin in plasma, platelets, whole blood, and urine. // Clin. Chem. - 1996. - V. 42, № 7. - P. 1086- 1091.
40. Ishida J., Takada M., Hitoshi N., Iizuka R., Yamaguchi M. 4- Dimethylaminobenzylamine as a sensitive chemiluminescence derivatization reagent for 5-hydroxyindoles and its application to their quantification in human platelet-poor plasma. // J. Chromatogr. B. Biomed. Sci. Appl. - 2000. - V. 738, № 2. - P.199-206.
41. Peterson Z.D., Lee M.L., Graves S.W. Determination of serotonin and its precursors in human plasma by capillary electrophoresis-electrospray ionization-time-of-flight mass spectrometry. // J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. - 2004. - V. 819, № 1. - P. 101-110.
42. Omolola E. Fayemi, Abolanle S. Adekunle, Eno E. Ebenso, Electrochemical determination of serotonin in urine samples based on metal oxide nanoparticles/MWCNT on modified glassy carbon electrode. // Sensing and Bio¬Sensing Research, Volume 13, 2017, P. 17-27.
43. Ayoub Boulghobra, Myriam Bonose, Isabelle Billault, Antoine Pallandre, A rapid and sensitive method for the quantification of dopamine and serotonin metabolites in cerebrospinal fluid based on UHPLC with fluorescence detection. // Journal of Chromatography B, Volume 1200, 2022,123264.
44. Noriyuki Kato, Takashi Kojima, Shinji Yoshiyagawa, Hikoto Ohta, Akira Toriba, Hideo Nishimura, Kazuichi Hayakawa, Rapid and sensitive determination of tryptophan, serotonin and psychoactive tryptamines by thin- layer chromatography/fluorescence detection. // Journal of Chromatography A, Volume 1145, Issues 1-2, 2007, P. 229-233.
45. Sumiyo Umeda, Gregory W. Stagliano, Michael R. Borenstein, Robert B. Raffa, A reverse-phase HPLC and fluorescence detection method for measurement of 5-hydroxytryptamine (serotonin) in Planaria. // Journal of Pharmacological and Toxicological Methods, Volume 51, Issue 1, 2005 , P. 73-76.
46. Bikash Chandra Swain, Padmaja Prasad Mishra, Hirdyesh Mishra, Umakanta Tripathy, Monitoring the binding of serotonin to silver nanoparticles: A fluorescence spectroscopic investigation. // Journal of Photochemistry and Photobiology A: Chemistry, Volume 367, 2018, P. 219-225.
47. Thompson JH, Spezia CA, Angulo M. Fluorometric detection of serotonin and serotonin-O.P.T. // Ir J Med Sci. 1970 May, P.197-220.
48. Conlon JM, Bailey CJ, Flatt PR. Effect of a transplantable insulinoma upon
serotonin concentrations in the intestine of the rat. // Gut. 1987, 28
Suppl(Suppl):213-6.
49. Thompson JH, Spezia CA, Angulo M. Fluorometric detection of serotonin using o-phthaldialdehyde: an improvement. // Experientia, 1970, 26(3):327-9.
50. Jahidul Islam, Hitoshi Shirakawa, Thomas Kim Nguyen, Hisashi Aso, Michio Komai, Simultaneous analysis of serotonin, tryptophan and tryptamine levels in common fresh fruits and vegetables in Japan using fluorescence HPLC. // Food Bioscience, Volume 13, 2016, P. 56-59.
51.Sudip Chaudhuri, Sandipan Chakraborty, Pradeep K. Sengupta, Encapsulation of serotonin in p-cyclodextrin nano-cavities: Fluorescence spectroscopic and molecular modeling studies. // Journal of Molecular Structure, Volume 975, Issues 1-3, 2010, P. 160-165.
52.Risse D, Elfringhoff AS, Lehr M. Determination of the cell lytic properties of amphiphilic inhibitors of the cytosolic phospholipase A2 against human platelets by measuring the liberation of serotonin with high-performance liquid chromatography and fluorescence detection. // J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2002, 769(1):185-90.
53.Sudip Chaudhuri, Sandipan Chakraborty, Pradeep K. Sengupta, Encapsulation of serotonin in p-cyclodextrin nano-cavities: Fluorescence spectroscopic and molecular modeling studies. // Journal of Molecular Structure, Volume 975, Issues 1-3, 2010, P. 160-165.
54.Flatmark T, Jacobsen SW, Haavik J. Fluorometric detection of tryptophan, 5- hydroxytryptophan, and 5-hydroxytryptamine (serotonin) in high-performance liquid chromatography. // Anal Biochem. 1980 107(1):71-4.
55.Schlumpf M, Lichtensteiger W, Langemann H, Waser PG, Hefti F. A fluorometric micromethod for the simultaneous determination of serotonin, noradrenaline and dopamine in milligram amounts of brain tissue. // Biochem Pharmacol. 1974 Sep 1;23(17):2437-46.
56.Barbara M. Goldsmith, Carl Feinstein, Sara Munson, Allan Reiss, Mary Ann Borengasser-Caruso, Determination of a reference range for whole blood serotonin in a pediatric population using high pressure liquid chromatography with electrochemical detection // Clinical Biochemistry, Volume 19, Issue 6, 1986, P. 359-363.
57.Золкина И.В., Мамедов И.С., Глаговский П.Б., Овчинникова К.А. Количественное определение серотонина в крови и моче методом высоко-эффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией. // Лабораторная служба. - 2016. - №3. - С. 45.
58. Федорова О.А., Кулакова И.И., Сотникова Ю.А., Жиленко М.П., Крутяков Ю.А., Оленин А.Ю., Рахманов Э.В., Сафронихин А.В., Хорошутин А.В. МЕТОДЫ ОПТИЧЕСКОЙ СПЕКТРОСКОПИИ. - Москва: 2015. - 117 с.
59. Государственная фармакопея Российской Федерации / МЗ РФ. - XIII изд. - Т.3. - Москва, 2018. - 1294 с.
60. Аналитическая химия. Физико-химические методы анализа: учебно-методическое пособие для высшего профессионального образования / В.И. Комова. - Орел: ФГБОУ ВПО «Госуниверситет - УНПК», 2015. - 107 с.
61. Chem Express магазин для лаборатории [Электронный ресурс] - режим доступа: https://chem-ex.ru/catalog/, свободный - Заглавие с экрана. — (Дата обращения: 24.05.2023).
62. ОАО «Термоприбор» каталог [Электронный ресурс] - режим доступа: https://www.thermopribor.com, свободный - Заглавие с экрана. — (Дата обращения: 24.05.2020).
63. ПНД Ф 12.13.1-03 Методические рекомендации. Техника безопасности при работе в аналитических лабораториях (общие положения) .
64. ГОСТ 12.2.033-78 Система стандартов безопасности труда. Рабочее место при выполнении работ стоя. Общие эргономические требования.
65. ГОСТ 12.0.003- 2015 Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Опасные и вредные производственные факторы.
66. СанПиН 1.2.3685-21 Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания.
67. ГОСТ 12.1.003-2014 Шум. Общие требования безопасности.
68. СП 52.13330.2016 Естественное и искусственное освещение.
69. ГОСТ 12.1.038-82 ССБТ Электробезопасность.
70. ГОСТ 12.1.007-76 ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности.
71. ГОСТ 12.1.004-91 Пожарная безопасность.
72. СП 12.13130.2009 Определение категорий помещений, зданий и наружных установок по взрывопожарной и пожарной опасности.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ