📄Работа №130588
Тема: Молекулярно-клеточные, метаболические и структурные причины кальцификации аортального клапана
Тип работы
Дипломные работы, ВКР
Предмет
медицина
Объем:
75 листов
Год:
2016
Просмотров:
208
4600
руб.
🛒 Купить работу
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
📋 Содержание
Список сокращений 4
Введение 7
Глава 1. Обзор литературы 10
1. Макро и микроструктура аортального клапана 10
1.1. Трехстворчатый аортальный клапан (TAV - Tricuspid aortic valve) 10
1.2. Двустворчатый аортальный клапан (BAV - Bicuspid aortic valve) 12
2. Аортальный стеноз 13
2.1. Молекулярные и клеточные механизмы развития аортального стеноза 14
2.1.1. Аортальный стеноз и атеросклероз 14
2.1.2. Эктопическая кальцификация 15
2.1.3. Роль эндотелия 16
2.1.4. Воспаление 17
2.1.5. Отложение липопротеинов 18
2.1.6. Матриксные металлопротеиназы и ремоделирование внеклеточного матрикса 19
2.1.7. Неоангиогенез 21
2.1.8. Роль ренин - ангиотензин - альдостероновой системы (РААС) 22
2.1.9. Сигнальный путь Notch и его мишени 23
2.1.10. Терапевтические мишени 28
2.1.11. Роль симпатической нервной системы в процессе стенозирования 31
2.1.12. Кальцификация как воспалительный процесс 31
3. Патофизиология аортального стеноза 33
4. Клиническая картина 34
4.1. Жалобы 34
4.2. Объективные данные 35
4.3. Неинвазивные методы исследования 35
4.4. Инвазивные методы исследования 38
5. Лечение 38
5.1. Медикаментозное лечение 38
5.2. Хирургическое лечение 39
Глава 2. Материалы и методы 40
2.1. Материалы 40
2.1.1. Клеточные культуры 40
2.1.2. Праймеры 40
2.2. Методы 42
2.2.1. Получение и культивирование эндотелиальных и интерстициальных клеток аортального клапана 42
2.2.2. Магнитный сортинг СВ31-позитивных клеток 43
2.2.3. Выделение РНК из клеточных культур 44
2.2.4. Полуколичественная полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией 45
2.2.5. Полимеразная цепная реакция в реальном времени 45
Глава 3. Результаты 47
3.1. Клинико-лабораторная и инструментальная характеристика пациентов, подвергшихся протезированию аортального клапана 47
3.2. Анализ молекулярно-клеточных данных 52
3.2.1. Получение интерстициальных и эндотелиальных клеток клапана и создание биобанка в лаборатории 52
3.2.2. Анализ экспрессии генов-компонентов сигнального пути Notch в интерстициальных клетках аортального клапана 54
3.2.3. Анализ экспрессии генов-компонентов сигнального пути Notch в эндотелиальных клетках аортального клапана 57
3.2.4. Анализ экспрессии генов остеогенной дифференцировки в интерстициальных клетках аортального клапана 58
3.3. Обсуждение результатов 59
Заключение 64
Выводы 65
Благодарности 66
Список литературы 67
Введение 7
Глава 1. Обзор литературы 10
1. Макро и микроструктура аортального клапана 10
1.1. Трехстворчатый аортальный клапан (TAV - Tricuspid aortic valve) 10
1.2. Двустворчатый аортальный клапан (BAV - Bicuspid aortic valve) 12
2. Аортальный стеноз 13
2.1. Молекулярные и клеточные механизмы развития аортального стеноза 14
2.1.1. Аортальный стеноз и атеросклероз 14
2.1.2. Эктопическая кальцификация 15
2.1.3. Роль эндотелия 16
2.1.4. Воспаление 17
2.1.5. Отложение липопротеинов 18
2.1.6. Матриксные металлопротеиназы и ремоделирование внеклеточного матрикса 19
2.1.7. Неоангиогенез 21
2.1.8. Роль ренин - ангиотензин - альдостероновой системы (РААС) 22
2.1.9. Сигнальный путь Notch и его мишени 23
2.1.10. Терапевтические мишени 28
2.1.11. Роль симпатической нервной системы в процессе стенозирования 31
2.1.12. Кальцификация как воспалительный процесс 31
3. Патофизиология аортального стеноза 33
4. Клиническая картина 34
4.1. Жалобы 34
4.2. Объективные данные 35
4.3. Неинвазивные методы исследования 35
4.4. Инвазивные методы исследования 38
5. Лечение 38
5.1. Медикаментозное лечение 38
5.2. Хирургическое лечение 39
Глава 2. Материалы и методы 40
2.1. Материалы 40
2.1.1. Клеточные культуры 40
2.1.2. Праймеры 40
2.2. Методы 42
2.2.1. Получение и культивирование эндотелиальных и интерстициальных клеток аортального клапана 42
2.2.2. Магнитный сортинг СВ31-позитивных клеток 43
2.2.3. Выделение РНК из клеточных культур 44
2.2.4. Полуколичественная полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией 45
2.2.5. Полимеразная цепная реакция в реальном времени 45
Глава 3. Результаты 47
3.1. Клинико-лабораторная и инструментальная характеристика пациентов, подвергшихся протезированию аортального клапана 47
3.2. Анализ молекулярно-клеточных данных 52
3.2.1. Получение интерстициальных и эндотелиальных клеток клапана и создание биобанка в лаборатории 52
3.2.2. Анализ экспрессии генов-компонентов сигнального пути Notch в интерстициальных клетках аортального клапана 54
3.2.3. Анализ экспрессии генов-компонентов сигнального пути Notch в эндотелиальных клетках аортального клапана 57
3.2.4. Анализ экспрессии генов остеогенной дифференцировки в интерстициальных клетках аортального клапана 58
3.3. Обсуждение результатов 59
Заключение 64
Выводы 65
Благодарности 66
Список литературы 67
📖 Введение
За последние несколько лет в структуре клапанных пороков сердца произошли существенные изменения, которые характеризуются уменьшением частоты пороков сердца ревматической этиологии и увеличением распространенности склеро-дегенеративных поражений клапанов. Этому способствовали увеличение продолжительности жизни населения и совершенствование медицинских технологий [1]. Самый распространенный клапанный порок сердца в настоящее время - аортальный стеноз (АС). Частота обнаружения АС среди лиц в возрасте 65 лет составляет около 25%, а после достижения возраста 75 лет увеличивается до 48%, хотя среди лиц в возрасте до 65 лет она составляет лишь 4-5% [1, 2]. Основная причина развития АС - кальцификация исходно нормального аортального клапана (АК) или врожденного двухстворчатого клапана аорты. Если раньше развитие АС считалось пассивным дегенеративным процессом и результатом механического износа створок, происходящего на шестом и седьмом десятках жизни, то сейчас стало ясно, что это активный и сложный патологический процесс. Ранее также считалось, что развитие АС это атеросклерозоподобный процесс, так как подтверждалась связь с традиционными факторами риска, такими как артериальная гипертензия, сахарный диабет, курение, повышение уровня холестерина. Однако на сегодняшний день накоплено немало данных, показывающих, что процесс формирования АС не сводится лишь к атеросклеротическому поражению клапанов. Есть данные об участии в этом процессе некоторых специфических сигнальных путей, один из которых сигнальный путь Notch [2]. Сигнальный путь Notch является ключевым в регуляции развития многих систем, органов и тканей, влияет на главные клеточные процессы - пролиферацию, дифференцировку и апоптоз, а также участвует в поддержании гомеостаза во взрослом организме. Было показано, что мутации в гене NOTCH1 могут быть ассоциированы с кальцинозом аортального клапана, однако роль сигнального пути Notch в патогенезе АС остается неясной [3]. В пользу участия этого сигнального пути в патогенезе АС свидетельствуют и результаты доклинических исследований, которые показывают, что специфическое блокирование сигнального пути Notch значимо подавляет кальцификацию сосудов и аортального клапана [2, 3].
Целью данной работы являлось исследование экспрессии компонентов сигнального пути Notch и генов остеодифференцировки в интерстициальных и эндотелиальных клетках аортального клапана человека и поиск взаимосвязей между уровнем экспрессии компонентов сигнального пути Notch и клинико-лабораторными показателями у пациентов.
Для достижения поставленной цели были определены следующие экспериментальные задачи:
1. Провести клинико-лабораторную и инструментальную характеристику пациентов, подвергшихся протезированию аортального клапана;
2. Получить интерстициальные клетки аортального клапана от пациентов со стенозом и здоровых доноров в качестве контроля;
3. Получить эндотелиальные клетки аортального клапана от пациентов со стенозом и здоровых доноров в качестве контроля;
4. Охарактеризовать интерстициальные клетки аортального клапана по экспрессии генов компонентов сигнального пути Notch;
5. Охарактеризовать эндотелиальные клетки аортального клапана по экспрессии генов компонентов сигнального пути Notch;
6. Охарактеризовать интерстициальные клетки аортального клапана по экспрессии генов, связанных с остеогенной дифференцировкой;
7. Выявить ассоциации клинико-лабораторных, инструментальных и молекулярно-клеточных и генетических компонентов патогенеза кальцификации аортального клапана.
Целью данной работы являлось исследование экспрессии компонентов сигнального пути Notch и генов остеодифференцировки в интерстициальных и эндотелиальных клетках аортального клапана человека и поиск взаимосвязей между уровнем экспрессии компонентов сигнального пути Notch и клинико-лабораторными показателями у пациентов.
Для достижения поставленной цели были определены следующие экспериментальные задачи:
1. Провести клинико-лабораторную и инструментальную характеристику пациентов, подвергшихся протезированию аортального клапана;
2. Получить интерстициальные клетки аортального клапана от пациентов со стенозом и здоровых доноров в качестве контроля;
3. Получить эндотелиальные клетки аортального клапана от пациентов со стенозом и здоровых доноров в качестве контроля;
4. Охарактеризовать интерстициальные клетки аортального клапана по экспрессии генов компонентов сигнального пути Notch;
5. Охарактеризовать эндотелиальные клетки аортального клапана по экспрессии генов компонентов сигнального пути Notch;
6. Охарактеризовать интерстициальные клетки аортального клапана по экспрессии генов, связанных с остеогенной дифференцировкой;
7. Выявить ассоциации клинико-лабораторных, инструментальных и молекулярно-клеточных и генетических компонентов патогенеза кальцификации аортального клапана.
✅ Заключение
На сегодняшний день не существует лекарственной терапии, способной остановить прогрессирование аортального стеноза, поэтому единственным радикальным методом остается протезирование аортального клапана. Однако, с учетом продолжительности жизни населения, сопровождающегося ежегодным ростом числа пациентов с дегенеративным аортальным стенозом, очевидно, что требуется дальнейшее изучение механизмов кальцификации аортального клапана с целью поиска потенциальной мишени для терапии этого опасного заболевания.
ИЛИ
Поиск аналога
📕 Список литературы
🖼 Скриншоты
🛒 Оформить заказ
⚡ Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.