Оценка уровня сосудистого эндотелиального фактора роста у женщин с наружным генитальным эндометриозом
|
Введение 4
Актуальность проблемы 4
ГЛАВА I. Эндометриоз. Современное состояние проблемы (обзор литературы) 7
1.1 Этиология и патогенез 7
1.2. Классификация эндометриоза 15
1.3. Клинические проявления эндометриоза 19
1.4. Диагностика эндометриоза 23
ГЛАВА II Материалы и методы исследования 30
2.1. Общая характеристика обследованных пациентов и методы
исследования 30
2.2. Методы статистической обработки результатов 32
ГЛАВА III Результаты исследования 34
Заключение 44
Выводы 46
Список литературы 47
Приложение 58
Актуальность проблемы 4
ГЛАВА I. Эндометриоз. Современное состояние проблемы (обзор литературы) 7
1.1 Этиология и патогенез 7
1.2. Классификация эндометриоза 15
1.3. Клинические проявления эндометриоза 19
1.4. Диагностика эндометриоза 23
ГЛАВА II Материалы и методы исследования 30
2.1. Общая характеристика обследованных пациентов и методы
исследования 30
2.2. Методы статистической обработки результатов 32
ГЛАВА III Результаты исследования 34
Заключение 44
Выводы 46
Список литературы 47
Приложение 58
Эндометриоз - распространенное многофакторное заболевание, частота которого достигает 10-15% среди женщин репродуктивного возраста, что экстраполируется примерно на 190 миллионов женщин в мире. [1] Изучение особенностей патогенеза, методов неинвазивной диагностики и подходов к лечению данного заболевания занимает одно из важных мест в ряду актуальных проблем гинекологической практики, поскольку частота бесплодия у данных пациенток достигает 55-75%. Частота невынашивания беременностей у женщин с НГЭ достигает 20-30%. [2,3]
В настоящее время «золотым стандартом» в диагностике эндометриоза является проведение лапароскопической операции и гистологическая верификация эндометриальных гетеротопий в брюшной полости. Несмотря на высокую информативность лапароскопического метода диагностики, нельзя не принимать во внимание наличие операционных рисков, рисков анестезиологического пособия и материальные затраты. [4] Возникает вопрос: помогут ли результаты исследования анализов крови (биомаркеров периферической крови) в обнаружении эндометриоза малоинвазивным путем. Анализ крови мог бы диагностировать эндометриоз без необходимости в операции, или он мог бы уменьшить необходимость в оперативном вмешательстве так, что оно требовалось бы только тем женщинам, у которых вероятность эндометриоза наиболее высока: инфильтративные формы, выраженный болевой синдром, эндометриомы. Некоторые авторы предлагают другие неинвазивные способы диагностики эндометриоза: МРТ диагностика, определение потенциальных биомаркеров в моче, эндометриальные и комбинированные тесты.
Наиболее изученным на сегодняшний день общим биомаркером эндометриоза в крови является CA-125. [5]. Однако диагностическая ценность этого показателя в настоящее время невелика. [6,7]
Также большое внимание привлекают в качестве многообещающих биомаркеров: раковый антиген-19.9 (CA-19.9), урокортин (UCN), интерлейкин-6 (IL-6), маркеры ангиогенеза, маркеры апоптоза, молекулы клеточной адгезии, молекулы цитоскелета, маркеры роста нервов, маркеры окислительного стресса и другие пептиды / белки, которые, как было показано, влияют на ключевые события при эндометриозе. [8].
В настоящее время новым аспектом исследования является идентификация циркулирующих клеток эндометрия в периферической крови для клинической диагностики эндометриоза. Однако использование циркулирующих клеток эндометрия в качестве биомаркера эндометриоза является сравнительно новой концепцией, и многие аспекты все еще требуют изучения [9].
При выделении диагностически значимых биомаркеров эндометриоза исследование мочи имеет значительно меньшую направленность по сравнению с кровью - только 11% биомаркеров эндометриоза были зарегистрированы на основе исследования мочи с 2010 года. [10]. Но ни один из зарегистрированных биомаркеров мочи не соответствовал критериям замещающего теста.
В опубликованном в 2016 году Нисенблат и соавт. [11] показали, что при НГЭ комбинации биомаркеров имеют более высокую диагностическую значимость, чем определение каждого отдельного компонента комбинированного теста.
Таким образом, представляется актуальным исследование новых биологических маркеров с высокой диагностической точностью для ранней и достоверной диагностики генитального эндометриоза при различном клиническом течении с целью уменьшения частоты лапароскопических вмешательств.
Цели и задачи исследования
Цель исследования: оценить уровень сосудистого эндотелиального фактора роста в периферической крови у женщин с наружным генитальным эндометриозом.
Задачи исследования:
1. Определить уровень белка СЭФР-А в периферической крови у пациенток с гистологически подтвержденным диагнозом «наружный генитальный эндометриоз».
2. Определить уровень белка СЭФР-А в периферической крови у женщин без наружного генитального эндометриоза и сравнить с уровнем СЭФР- А у пациенток с гистологически подтвержденным диагнозом «наружный генитальный эндометриоз».
3. Определить зависимость уровня белка СЭФР-А в периферической крови от степени тяжести наружного генитального эндометриоза.
Практическая значимость
Уровень СЭФР-А у женщин с НГЭ может отражать активность ангиогенеза в гетеропиях, в том числе при различном клиническом течении заболевания и в перспективе рассматриваться как маркер не только степени тяжести, но и контроля за развитием рецидива заболевания - что требует дальнейших более детальных исследований патогенетических аспектов данного заболевания, поскольку выявление надежных биомаркеров периферической крови для диагностики эндометриоза должно сократить время от начала заболевания до постановки диагноза и начала лечения, что позволит улучшить дальнейший прогноз течения заболевания.
В настоящее время «золотым стандартом» в диагностике эндометриоза является проведение лапароскопической операции и гистологическая верификация эндометриальных гетеротопий в брюшной полости. Несмотря на высокую информативность лапароскопического метода диагностики, нельзя не принимать во внимание наличие операционных рисков, рисков анестезиологического пособия и материальные затраты. [4] Возникает вопрос: помогут ли результаты исследования анализов крови (биомаркеров периферической крови) в обнаружении эндометриоза малоинвазивным путем. Анализ крови мог бы диагностировать эндометриоз без необходимости в операции, или он мог бы уменьшить необходимость в оперативном вмешательстве так, что оно требовалось бы только тем женщинам, у которых вероятность эндометриоза наиболее высока: инфильтративные формы, выраженный болевой синдром, эндометриомы. Некоторые авторы предлагают другие неинвазивные способы диагностики эндометриоза: МРТ диагностика, определение потенциальных биомаркеров в моче, эндометриальные и комбинированные тесты.
Наиболее изученным на сегодняшний день общим биомаркером эндометриоза в крови является CA-125. [5]. Однако диагностическая ценность этого показателя в настоящее время невелика. [6,7]
Также большое внимание привлекают в качестве многообещающих биомаркеров: раковый антиген-19.9 (CA-19.9), урокортин (UCN), интерлейкин-6 (IL-6), маркеры ангиогенеза, маркеры апоптоза, молекулы клеточной адгезии, молекулы цитоскелета, маркеры роста нервов, маркеры окислительного стресса и другие пептиды / белки, которые, как было показано, влияют на ключевые события при эндометриозе. [8].
В настоящее время новым аспектом исследования является идентификация циркулирующих клеток эндометрия в периферической крови для клинической диагностики эндометриоза. Однако использование циркулирующих клеток эндометрия в качестве биомаркера эндометриоза является сравнительно новой концепцией, и многие аспекты все еще требуют изучения [9].
При выделении диагностически значимых биомаркеров эндометриоза исследование мочи имеет значительно меньшую направленность по сравнению с кровью - только 11% биомаркеров эндометриоза были зарегистрированы на основе исследования мочи с 2010 года. [10]. Но ни один из зарегистрированных биомаркеров мочи не соответствовал критериям замещающего теста.
В опубликованном в 2016 году Нисенблат и соавт. [11] показали, что при НГЭ комбинации биомаркеров имеют более высокую диагностическую значимость, чем определение каждого отдельного компонента комбинированного теста.
Таким образом, представляется актуальным исследование новых биологических маркеров с высокой диагностической точностью для ранней и достоверной диагностики генитального эндометриоза при различном клиническом течении с целью уменьшения частоты лапароскопических вмешательств.
Цели и задачи исследования
Цель исследования: оценить уровень сосудистого эндотелиального фактора роста в периферической крови у женщин с наружным генитальным эндометриозом.
Задачи исследования:
1. Определить уровень белка СЭФР-А в периферической крови у пациенток с гистологически подтвержденным диагнозом «наружный генитальный эндометриоз».
2. Определить уровень белка СЭФР-А в периферической крови у женщин без наружного генитального эндометриоза и сравнить с уровнем СЭФР- А у пациенток с гистологически подтвержденным диагнозом «наружный генитальный эндометриоз».
3. Определить зависимость уровня белка СЭФР-А в периферической крови от степени тяжести наружного генитального эндометриоза.
Практическая значимость
Уровень СЭФР-А у женщин с НГЭ может отражать активность ангиогенеза в гетеропиях, в том числе при различном клиническом течении заболевания и в перспективе рассматриваться как маркер не только степени тяжести, но и контроля за развитием рецидива заболевания - что требует дальнейших более детальных исследований патогенетических аспектов данного заболевания, поскольку выявление надежных биомаркеров периферической крови для диагностики эндометриоза должно сократить время от начала заболевания до постановки диагноза и начала лечения, что позволит улучшить дальнейший прогноз течения заболевания.
Эндометриоз выявляется у 10-15% среди женщин репродуктивного возраста и занимает одно из важных мест в ряду актуальных проблем гинекологической практики, поскольку частота бесплодия у данных пациенток достигает 55-75%.
По данным Международной Ассоциации Эндометриоза от момента появления первых симптомов и до постановки окончательного диагноза, в среднем проходит 7-8 лет, поэтому «эндометриоз» считается «упущенным» заболеванием. На протяжении последних десятилетий «золотым стандартом» диагностики эндометриоза остается лапароскопия, при которой все очаги удаляются с последующим гистологическим исследованием. Несмотря на высокую информативность данного метода, нельзя не принимать во внимание наличие операционных рисков, в связи с чем необходим поиск биомаркеров с целью малоинвазивной диагностики эндометриоза.
В ходе настоящего исследования нам удалось оценить уровень сосудистого эндотелиального фактора роста (СЭФР) при различных степенях распространенности и тяжести эндометриоза у обследованных женщин согласно пересмотренной классификации Американского Общества Фертильности (R-AFS/АSRM).
Повышение уровня СЭФР в крови у женщин с НГЭ I-II степени по сравнению с женщинами из контрольной группы вероятно ассоциировано с преобладанием при начальных формах НГЭ высоко васкуляризированных, так называемых «красных» гетеротопий. Выявлена положительная корреляционная связь между уровнем СЭФР-А в периферической крови и количеством красных гетеротопий у женщин с НГЭ I-II ст., что свидетельствует об их высокой ангиогенной активности. У женщин с НГЭ 1-2 ст. определение уровня СЭФР в периферической крови может рассматриваться как потенциальный диагностический маркер - при повышении относительно референсных значений у здоровых женщин.
У пациенток с III-IV степенью НГЭ уровень СЭФР в сыворотке крови оказался достоверно ниже, чем в контрольной группе (p<0,001) что может быть ассоциировано со снижением метаболической активности и усилением фиброза при преобладании гетеротопий по типу «белых очагов» у женщин с тяжелыми формами НГЭ. Выявлена отрицательная корреляционная связь между уровнем СЭФР-А в периферической крови и количеством белых гетеротопий у женщин с НГЭ III-IV ст., ассоциированная с высокой частотой тяжелых форм спаечной болезни органов малого таза и сниженной метаболической активностью гетеротопий по типу «белых». Определение уровня СЭФР в периферической крови при НГЭ 3-4 ст. требует дальнейшего исследования на большем клиническом материале для определения диагностической ценности выявления снижения этого показателя.
По данным Международной Ассоциации Эндометриоза от момента появления первых симптомов и до постановки окончательного диагноза, в среднем проходит 7-8 лет, поэтому «эндометриоз» считается «упущенным» заболеванием. На протяжении последних десятилетий «золотым стандартом» диагностики эндометриоза остается лапароскопия, при которой все очаги удаляются с последующим гистологическим исследованием. Несмотря на высокую информативность данного метода, нельзя не принимать во внимание наличие операционных рисков, в связи с чем необходим поиск биомаркеров с целью малоинвазивной диагностики эндометриоза.
В ходе настоящего исследования нам удалось оценить уровень сосудистого эндотелиального фактора роста (СЭФР) при различных степенях распространенности и тяжести эндометриоза у обследованных женщин согласно пересмотренной классификации Американского Общества Фертильности (R-AFS/АSRM).
Повышение уровня СЭФР в крови у женщин с НГЭ I-II степени по сравнению с женщинами из контрольной группы вероятно ассоциировано с преобладанием при начальных формах НГЭ высоко васкуляризированных, так называемых «красных» гетеротопий. Выявлена положительная корреляционная связь между уровнем СЭФР-А в периферической крови и количеством красных гетеротопий у женщин с НГЭ I-II ст., что свидетельствует об их высокой ангиогенной активности. У женщин с НГЭ 1-2 ст. определение уровня СЭФР в периферической крови может рассматриваться как потенциальный диагностический маркер - при повышении относительно референсных значений у здоровых женщин.
У пациенток с III-IV степенью НГЭ уровень СЭФР в сыворотке крови оказался достоверно ниже, чем в контрольной группе (p<0,001) что может быть ассоциировано со снижением метаболической активности и усилением фиброза при преобладании гетеротопий по типу «белых очагов» у женщин с тяжелыми формами НГЭ. Выявлена отрицательная корреляционная связь между уровнем СЭФР-А в периферической крови и количеством белых гетеротопий у женщин с НГЭ III-IV ст., ассоциированная с высокой частотой тяжелых форм спаечной болезни органов малого таза и сниженной метаболической активностью гетеротопий по типу «белых». Определение уровня СЭФР в периферической крови при НГЭ 3-4 ст. требует дальнейшего исследования на большем клиническом материале для определения диагностической ценности выявления снижения этого показателя.