Перечень условных обозначений 4
Введение 5
Глава 1. Обзор литературы 6
1.1 Применение гомогенной жидкостной микроэкстракции для анализа биологических жидкостей 6
1.1.1 Гомогенная жидкостная микроэкстракция с высаливанием экстрагента 9
1.1.2 Гомогенная жидкостная микроэкстракция с высахариванием экстрагента 14
1.1.3 Гомогенная жидкостная микроэкстракция с применением растворителей с переключаемой гидрофильностью 16
1.2 Карбапенемы и их применение в медицинской практике 17
1.3 Методы определения меропенема 21
Заключение 30
Глава 2. Методика экспериментальных исследований 31
2.1 Оборудование 31
2.2 Реактивы и материалы 32
2.3 Приготовление растворов 32
2.4 Отбор и подготовка проб 33
Глава 3. ВЭЖХ-УФ определение меропенема с предварительным микроэкстракционным концентрированием 34
3.1 Теоретические аспекты и предполагаемый механизм гомогенной жидкостной микроэкстракции меропенема с разделением фаз полярным растворителем 34
3.2 Иллюстрация аналитических возможностей предложенного метода 35
3.3 Оптимизация параметров, влияющих на эффективность микроэкстракции 36
3.3.1 Выбор метода анализа 36
3.3.2 Выбор оптимальной подвижной фазы 40
3.3.3 Выбор оптимального экстрагента 40
3.3.4 Выбор оптимального объема экстрагента 41
3.3.5 Выбор оптимального полярного растворителя 42
3.3.6 Выбор оптимального объема полярного растворителя 42
3.3.7 Выбор оптимального времени образования изотропного раствора 43
3.4 Определение физико-химических характеристик системы: Н2О-1-октиламин-ацетонитрил 44
3.4.1 Определение содержания ацетонитрила в фазе 1-октиламина 44
3.4.2 Исследование фаз методом динамического рассеяния света 45
3.5 Изучение мешающего влияния компонентов биологических жидкостей 48
3.6 Аналитические характеристики методики 49
3.7 Проверка правильности методики референтным методом 50
Выводы 54
Благодарности 55
Список литературы 56
В настоящее время в биохимической и клинической медицине существует большой интерес, связанный с разработкой надежных методов исследования качественных и количественных характеристик биологических жидкостей с целью получения достоверной информации о здоровье пациента.
Среди большого спектра лекарственных препаратов, применяемых в медицинской практике, важное место занимают антибактериальные средства, действие которых направлено на борьбу с инфекционными заболеваниями. При этом особое внимание в последнее время уделяется антибиотикам группы карбапенемов, которые обладают высокой противомикробной активностью и широко используются в медицине при лечении тяжелых форм заболеваний. Антимикробная терапия требует постоянного контроля режимов дозирования лекарственных препаратов, что приводит к необходимости определения содержания антибиотиков в биологических жидкостях пациентов (моча, плазма крови). Учитывая то, что матрица пробы может оказывать негативное влияние на определение аналитов, эффективные методы предварительного разделения компонентов матрицы пробы являются неотъемлемой частью химического анализа.
Среди разработанных методов разделения и концентрирования перспективным для анализа биологических жидкостей является гомогенная жидкостная микроэкстракция.
Целью данной работы явилась разработка методики определения меропенема в биологических жидкостях с предварительным микроэкстракционным выделением аналита на принципах гомогенной жидкостной микроэкстракции и последующим ВЭЖХ определением с фотометрическим детектированием в ультрафиолетовой области.
Выводы
1. Обоснована общая схема нового микроэкстракционного метода - гомогенной жидкостной микроэкстракции с разделением фаз полярным растворителем;
2. Оптимизированы условия микроэкстракционного выделения меропенема для последующего ВЭЖХ-УФ определения: тип и объем экстрагента, тип и объем полярного растворителя, время образования изотропного раствора;
3. Изучены физико-химические параметры состава системы 1-октиламин- водная фаза-ацетонитрил;
4. Разработанная методика была апробирована на реальных объектах и ее правильность была подтверждена референтным методом. Предел обнаружения для меропенема составил 0,05 мг/л. Время одного анализа - 20 минут.
