Введение 3
Обзор литературы 4
Материалы и методы 11
Результаты 16
Обсуждение результатов 25
Выводы 27
Благодарности 28
Список литературы 29
Приложение 1 32
Приложение 2 33
Инсулиновый рецептор способен запускать множество молекулярных каскадов у различных групп животных. Он участвует в регуляции таких важных процессов как клеточная пролиферация и дифференцировка, рост, регуляция метаболизма и клеточного цикла, апоптоз. Кроме того, сигнальные пути инсулинового рецептора играют важную роль в процессах эмбриогенеза и развития.
Вид Aurelia aurita (Scyphozoa) является представителем одной из ключевых групп Metazoa. Для данной группы характерен метагенетический жизненный цикл, в ходе которого происходит последовательная смена полового и бесполого поколений. При этом сцифоидные медузы отличаются наличием особого типа бесполого размножения - стробиляцей, - в результате которой отпочковывающиеся эфиры развиваются в медуз, размножающихся половым путем. Хотя Cnidaria представляет собой сестринский таксон Bilateria, их молекулярные каскады схожи. Тем не менее, их реализация и выполняемые функции могут различаться. Сигнальный путь инсулинового рецептора, его компоненты и функции, у кишечнополостных изучены относительно плохо. Имеется информация об инсулиноподобном рецепторе у представителя Hydrozoa (Steel et all., 1996) однако подобных исследований для группы Scyphozoa не проводилось.
Таким образом, целью данной работы стало изучение экспрессии генов каскада инсулинового рецептора в лабораторной линии сцифоидной медузы Aurelia aurita (Cnidaria: Scyphozoa).
В рамках этой цели нами были поставелны следующие задачи:
1. Выявить в транскриптомной базе Aurelia aurita гены каскада инсулинового рецептора
2. Провести филогенетический анализ найденных последовательностей для подтверждения их принадлежности к интересующим семействам
3. Проверить наличие экспрессии на стадиях полипа, стробилы и эфиры и выявить зоны экспрессии найденных генов с помощью РНК гибридизации in situ
Выводы
1. В транскриптоме Aurelia aurita обнаружены гены, участвующие в инсулиновом каскаде. К ним относятся субстрат инсулинового рецептора (IRS), фосфатидилинозитол-зависимая протеинкиназа (PDK) и митогенактивируемая протеинкиназа (MAPK).
2. Принадлежность генов HTK7 и PI3K A. aurita к семействам инсулиноподобного рецептора и фосфатидилинозитол-3-киназам не была подтверждена.
3. Показано наличие экспрессии изучаемых генов в процессе стробиляции сцифоидной медузы Aurelia aurita.