Введение 16
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 19
1.1. Сведения о Живокости высокой (Delphinium L.) 19
1.1.1. Живокость высокая: морфология, распространение, ресурсы 19
1.1.2. Химический состав живокости высокой (Delphinium L.) 22
1.1.3. Фармакологические свойства живокости высокой и её препаратов 23
1.1.4. Характеристика биологически активных веществ, содержащихся
в Живокостях (Delphinium L.) 26
1.2. Растительные алкалоиды 27
1.2.1. Дитерпеновые алкалоиды Живокости высокой 30
1.3. Биотехнологические методы исследования 33
1.3.1. Методы культивирования семян, изолированных клеток и тканей
растений 34
1.3.2. Культивирование каллусных тканей на твердых питательных средах 38
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 40
2.1. Объект исследования 40
2.2. Приготовление питательной среды и вспомогательных растворов 41
2.2.1. Питательная среда Мурасиге -Скуга 41
2.2.1.1. Приготовление маточного раствора макросолей 42
2.2.1.2. Приготовление маточного раствора микросолей 43
2.2.1.3. Приготовление Fe-хелат 43
2.2.1.4. Приготовление агазированной среды 43
2.2.1.5. Приготовление гормонов 43
2.2.1.6. Приготовление питательной среде МС для получения каллусной
культуры 44
2.2.2. Стерилизующий раствор 44
2.2.3 Стерилизация семян 44
2.3. Методика получения каллусной культуры Живокость высокая 44
2.3.1. Выделение дитерпеновых алкалоидов из каллусной культуры 45
2.4. Методы стратификации семян Живокости высокой 45
2.5. Приготовление питательной среде МС для получения суспензионной
культуры 45
2.5.1. Методика получения суспензионной культуры Живокость высокая 46
2.5.2. Выделение дитерпеновых алкалоидов из суспензионной культуры 46
ГЛАВА 4 ФИНАНСОВЫЙ МЕНЕДЖМЕНТ, РЕСУРСОЭФФЕКТИВНОСТЬ И РЕСУРСОСБЕРЕЖЕНИЕ 53
4.1 Общая характеристика НИР 53
4.2 Потенциальные потребители результатов исследования 54
4.2.1 Анализ конкурентных технических решений с позиции
ресурсоэффективности и ресурсосбережения 54
4.3 SWOT анализ 54
4.4 Оценка готовности проекта к коммерциализации 57
4.5 Методы коммерциализации результатов научно-технического
исследования 59
4.6 Инициация проекта 59
4.7 Планирование управления научно-техническим проектом 61
4.7.1 План проекта 63
4.8 Бюджет научного исследования 71
4.8.1 Материальные затраты 71
4.9 Реестр рисков проекта 78
ГЛАВА 4. СОЦИАЛЬНАЯ ОТВЕТСТВЕННОСТЬ 83
5.1 Анализ вредных и опасных факторов 84
5.2 Анализ опасных и вредных факторов 84
5.3 Микроклимат 89
5.4 Освещенность 91
5.4.1 Выбор осветительных приборов 91
5.5 Виброаккустические 92
5.6 Электробезопасность 92
5.7 Расчет электрического освещения 94
5.8 Техника безопасности при проведении эксперимента 94
5.9 Охрана окружающей среды 98
5.10 Требования безопасности в аварийных ситуациях 99
5.11 Пожарная безопасность 100
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 104
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ 105
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 106
Актуальность работы
В настоящее время одним из самых тяжелых заболеваний в мире является онкологические заболевания. Для лечения этих заболеваний требуются лекарственные препараты, с содержанием таких веществ, как алкалоиды.
На сегодняшний день, несмотря на широкий спектр имеющихся лекарственных препаратов из растений, многие представители отечественной флоры не нашли должного применения в медицинской практике и являются лишь достоянием народной медицины. В этом отношении особый интерес представляет изучение растений, содержащих алкалоиды, которые обладают разносторонней биологической активностью. Одним из таких растений является живокость высокая.
Объектом исследования было выбрано растение живокость высокая. Живокость высокая - представитель флоры Сибири и тропической Африки, применяется в тибетской медицине как противоопухолевое средство. Народы Сибири применяли его для лечения рака желудка.
Используя сведения народной и научной медицины, экспериментальные данные мы предположили, что одним из основных действующих начал, обусловливающих фармакотерапевтическую активность живокости высокой, являются дитерпеновые алкалоиды, которые могут обладать противоопухолевым действием.
Цель исследования
Целью данной работы является получить каллусную и суспензионную культуру Delphinium elatum.
Задачи исследования
1) Провести литературный обзор по объекту исследования Delphinium elatum
2) Выбрать оптимальные условия для получения каллусной культуры Delphinium elatum
3) Выбрать оптимальные условия для получения суспензионной культуры Delphinium elatum
4) Выделить дитерпеновые алкалоиды из каллусной и суспензионной культуры Delphinium elatum методом экстракции
Научная новизна:
Впервые получена каллусная культура Delphinium elatum. Подобраны оптимальные условия для получения каллусной культуры Delphinium elatum.
Практическая значимость
Из дитерпеновых алкалоидов живокости высокой перспективными являются представители аконитиновой группы: кондельфин,
метилликаконитин, элатин и дельсемин, обладающие высокой фармакологической активностью и низкой токсичностью.
Результаты полученных экспериментальных исследований могут лечь в основу разработки нового лекарственного препарата, на основе алкалоидов живокости высокой, для терапии заболеваний опухолевого характера.
Апробация работы
Основные результаты работы докладывались и обсуждались на Всероссийской научно-практической конференции студентов и молодых ученых «Химия и химическая технология в XXI веке» имени профессора
Кулёва Л.П. посвященная 120-летию Томского Политехнического Университета 17 - 20 мая 2016 (г. Томск).
Публикации
Результаты проведенных исследований отражены в 1 печатной работе.
1. В ходе работы получена каллусная и суспензионная культура Delphinium elatum.
2. Наиболее оптимальными условиями для получения каллусной культуры
Delphinium elatum является температура окружающей среды 28-30 С, дневной свет, механическая обработка семян, стратификация семян в течение 46 часов, питательная среда МС с добавлением гормонов 2,4 - дихлорфеноксиуксусная кислота(2,4-Д) 0,00015 г, 6-бензиламинопурин (БАП) 0,000015 г , 1-нафтилуксусная кислота (НУК) 0,0003г.
3. Наиболее оптимальными условиями для получения суспензионной культуры Delphinium elatum является температура окружающей среды 28-30 С, дневной свет, механическая обработка семян, стратификация семян в течение 48 часов, питательная среда МС с добавлением гормонов 2,4 - дихлорфеноксиуксусная кислота(2,4-Д) 0,00015 г, 6-бензиламинопурин (БАП) 0,000015 г , 1 - нафтилуксусная кислота (НУК) 0,0003г,скорость перемешивания 120 об/мин.
4. Определены ресурсная (ресурсосберегающая), финансовая, социальная и экономическая эффективности исследования. Рассчитаны затраты на материалы и бюджет научно-исследовательского проекта.
5. Рассмотрены вредные факторы, возникающие в процессе работы и возможность защиты от них.
Помощь студентам и аспирантам в выполнении работ от наших партнеров
