Тема: Вольтамперометрическое определение основного вещества противовирусного препарата Триазид® с использованием стеклоуглеродного электрода

Анализ соединений с широким спектром полезной биологической активности в качестве основы для создания новых лекарственных препаратов является одной из важнейших задач аналитической химии. На сегодняшний день одним из наиболее крупных классов структур с такими свойствами являются гетероциклические соединения, в частности, производные пиримидина, а именно, препарат относящийся к азолоазиниевым солям соединений фторхинолонового ряда и обладающий антибактериальными и противовирусными свойствами - ТРИАЗИД®. При определении основного вещества в объектах фармации вольтамперометрия (ВА) часто не уступает по чувствительности и селективности методу ВЭЖХ. При этом ВА анализ отличается быстротой, простым, недорогим и портативным инструментарием, который не требует применения токсичных органических растворителей и привлечения дорогостоящего персонала для своего обслуживания.
Цель настоящего исследования: разработка и валидация методики вольтамперометрического определения триазида в фармацевтической субстанции ТРИАЗИД на стеклоуглеродном электроде.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
• показать возможность использования метода вольтамперометрии для определения триазида по току восстановления нитрогруппы в водных растворах на стеклоуглеродном электроде;
• подобрать условия для физического (продувка инертным газом) и химического (добавление насыщенного раствора сульфита натрия) способов удаления кислорода из растворов электролита и предложить оптимальный вариант деоксигенации;
• изучить влияние режима вольтамперометрических измерений на ток восстановления триазида;
• выбрать оптимальные условия формирования аналитического сигнала триазида;
• сравнить характеристики градуировочных графиков триазида, полученных в условиях физического и химического способов удаления кислорода из растворов электролита различной кислотности;
• разработать методику вольтамперометрического определения триазида в фармацевтической субстанции ТРИАЗИД;
• провести валидационную оценку разработанной методики по актуальным требованиям Государственной Фармакопеи РФ XIII издания.
Купить

Анализ литературных данных показал, что при определении основного вещества в объектах фармации ВА часто не уступает по чувствительности и селективности методу ВЭЖХ, но ВА анализ отличается быстротой, простым, недорогим и портативным инструментарием, который не требует применения токсичных органических растворителей и привлечения дорогостоящего персонала для своего обслуживания. При этом в случае биологически активных нитросоединений наиболее полезным для количественного определения является сигнал электровосстановления нитрогруппы. К преимуществам сигнала можно отнести как большое количество тока, вырабатываемое на моль электроактивного соединения, так и относительно низкую потребность в энергии для восстановления нитрогруппы. Это позволяет получать высокое отношение ток / концентрация при низких потенциалах восстановления.
Объектом исследования служила фармацевтическая субстанция ТРИАЗИД новейшего российского противовирусного препарата азоло- азинового ряда, содержащего нитрогруппу.
Впервые показана возможность использования метода прямой вольтамперометрии для определения ТД по току восстановления нитрогруппы в водных растворах ББР при рН 2 - 12 на СУЭ.
Показано мешающее влияние растворенного кислорода на ток восстановления ТД.
Подобраны условия для физического (продувка инертным газом аргоном) и химического (добавление насыщенного раствора сульфита натрия) способов удаления кислорода из растворов электролита. Использование сульфита натрия позволило сократить время анализа примерно в Зраза (с 45 до 15 минут) и существенно упростить и удешевить процедуру анализа.
Выбран оптимальный режим регистрации вольтамперограмм ТД - квадратно-волновой со скоростью развертки 0,15 В/с, частотой импульса 30 Гц, амплитудой импульса 0,05 В мВ, шагом развертки 0,005 В в интервале потенциалов 0,0 - (-1,25) В и (-0,4) - (-1,4) В при рН фонового электролита (ББР) 4 и 7 соответственно.
Наилучшая чувствительность по отношению к ТД (наклон ГГ) достигается в растворе ББР при рН 4,0 после продувки инертным газом. При рН 7,0 наклоны ГГ, полученные в растворе ББР + 0,04 М Na2SO3 и растворе ББР после продувки инертным газом, практически совпадают и уменьшаются примерно на 30% по сравнению с ГГ, полученным при рН 4,0. При определении основного вещества фармпрепарата указанное снижение чувствительности по отношению к ТД при рН 7,0 не является критичным и позволяет использовать сульфит натрия при проведении
вольтамперометрического анализа.
Область линейности градуировочного графика по площади пика с использованием разработанного метода в растворе ББР + 0,04 М Na2SO3 при рН 7 составляет 20 - 500 мг/л. ПрО ТД = 2,1 мг/л. Уравнение регрессии имеет вид: Q (мкКл) = (0,0133-± 0,00008) C + (0,0537 ± 0,0084) с коэффициентом корреляции 0,9997 близким к значению 1,0 .
В результате валидационной оценки разработанной методик согласно ОФС.1.1.0012.15 и ОФС ОФС.1.1.0013.15 Государственной Фармакопеи РФ XIII издания, был сделан вывод о соответствии аналитической методики количественного определения ТД в фармацевтической субстанции ТРИАЗИД» заявленным критериям приемлемости. Кроме того, выполнение контроля по разработанным методикам не требует дорогостоящего оборудования и расходных средств, применения инертного газа и токсичных органических растворителей, а также привлечения
высококвалифицированного персонала.
На основании полученных результатов был сделан вывод о том, что разработанная методика может быть рекомендованы для включения в нормативно-техническую документацию на фармацевтическую субстанцию. При включении в фармстатью предприятия разработанный метод может применяться испытательными лабораториями предприятия в процессе производства препарата.
Купить