ВВЕДЕНИЕ 4
1 Теоретическая часть
1.1. Атеросклеротическая бляшка: понятие, состав, структура 7
1.2. Гидроксиапатит как основная минеральная часть
атеросклеротической бляшки 10
1.3 Основы электронного парамагнитного резонанса 14
1.4 Импульсный режим спектрометра ЭПР 17
2. Экспериментальная часть
2.1 Образцы 21
2.2 Исследование атеросклеротической бляшки методом 22
электронной микроскопии
2.3 Биохимический анализ воспалительно-деструктивных маркеров 26
в крови пациентов с нестабильными и стабильными атеросклеротическими бляшками
2.4 Исследование липидного ядра АСБ методами импульсного 29
высокочастотного (95 ГГц) ЭПР
Заключение 33
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
В настоящее время атеросклероз является, по сути, одной из эпидемий XXI века. По статистике Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ежегодно от данной болезни умирают более 17 млн. человек. Около 70 % инфарктов происходит из-за разрыва атеросклеротической бляшки (АСБ) [1]. К 2020 г. Прогнозируется рост летальности населения от заболеваний сердечно-сосудистой системы, связанных с атеросклерозом, до 60%.
Основными типами болезней кровообращения являются ишемическая болезнь сердца (ИБС), гипертоническая болезнь. Мишенью атеросклеротического процесса является сосудистая стенка, в которой под действием патологических факторов происходит нарушение метаболических процессов. Так одним из факторов формирования сосудистой патологий является возникновение дисбаланса химических элементов. Большинство исследований в данной области касается содержания кальция в стенках аорты. Процессы атеросклероза, тромбоза и артериальной гипертензии составляют патоморфологическую основу заболеваний сердечно-сосудистой системы, а нарушение мозгового кровообращения и ИБС - наиболее частые причины летальных исходов.
Основным элементом атеросклеротического поражения является атеросклеротическая бляшка, которая выступая в просвет сосуда, затрудняет нормальный кровоток. Сама бляшка состоит из фибрина, липидов (внутриклеточных и внеклеточных), соединительных тканей, промежуточного вещества. Со временем бляшка начинает уплотняться и начинается отложение на ней кальциевых солей. Кальцинированная атеросклеротическая бляшка уже отличается своей стабильностью и медленным ростом, что постепенно приводит к ухудшению кровотока и снабжения на данном участке. Увеличиваясь в размерах, бляшка может задерживать на своем участке сгустки крови и кровяные элементы, а при разрыве может стать причиной тромбоза артерий мозга, сердца и других органов. Многочисленные исследования подтверждают, что преимущественным кристаллическим компонентом бляшек является модифицированный гидроксиапатит, ГАп) [2].
Развитие атеросклеротических поражений протекает сначала бессимптомно, пока не появляются в дальнейшем клинические признаки, обусловленные значительным сужением просвета кровеносного сосуда Основными причинами смертности при патологии сердечно-сосудистой системы, наряду с вышеупомянутой ИБС, остаются мозговые инсульты.. Поэтому представляется актуальным выявление факторов нестабильности атеросклеротической бляшки сонных артерий. Проверка критериев нестабильности бляшки у больных с атеросклеротическими поражениями сонных артерий позволят выработать четкие показания для проведения оперативного лечения и, потенциально, снизить смертность от ишемического инсульта.
Цель данной работы - поиск критериев стабильности и нестабильности атеросклеротической бляшки в сонных артериях.
Руководителем работы были поставлены следующие задачи:
1. По известным результатам иммуноферментного анализа крови пациентов со стабильными и нестабильными атеросклеротическими бляшками провести корреляционный анализ .
2. Исследовать различные типы бляшек, полученных в ходе операционного вмешательства, методом импульсного электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) и сравнить с ранее полученными на других образцах и в другой локализации.
Для решения поставленных задач было необходимо:
1. Изучить известную литературу по исследованию АСБ и факторов ее стабильности различными аналитическими методами, включая методы ЭПР.
2. Изучить особенности статистического анализа в
биомедицинских исследованиях.
3. Изучить основы ЭПР исследований в импульсном режиме.
Научиться получать спектры ЭПР в импульсном режиме
1) Маркерами нестабильности бляшек могут являться следующие молекулы: IL-6, sVCAM-1, TIMP-1, MMP-9. Маркерами стабильности бляшек могут являться молекулы: sVCAM-1, MMP-9.
2) Подтверждено наличие кальцификации в АСБ, обусловленной, по- видимому, образованием гидроксиапатита, однако выявить корреляции между стабильностью АСБ, содержанием фосфатов кальция (и других продетектированных элементов таблицы Менделеева) не удалось.
3) Спектры ЭПР ядра и покрышки, полученные в импульсном режиме, одинаковы, что свидетельствует о том, что кальцификация АСБ затрагивает и покрышку, и ядро АСБ. Корреляции между стабильностью и спектрами ЭПР найдено не было.
