📄Работа №76487
Тема: Комплексная характеристика противовирусной активности производных камфары на модели гриппозной инфекции у животных
Характеристики работы
Тип работы
Магистерская диссертация
Предмет
Биология
Объем:
64 листов
Год:
2016
Просмотров:
105
4870
руб.
🛒 Купить работу
Не подходит эта работа?
Закажите новую по вашим требованиям
Узнать цену на написание
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
📋 Содержание
Список сокращений 2
ВВЕДЕНИЕ 5
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Вирус гриппа 7
1.1.1. Род Influenzavirus A (вирус гриппа типа А) 7
1.1.2. Род Influenzavirus В (вирус гриппа типа В) 8
1.1.3. Род Influenzavirus С (вирус гриппа типа С) 8
1.1.4. Род Influenzavirus D (вирус гриппа типа D) 9
1.1.5. Строение вириона 10
1.1.6. Жизненный цикл вируса гриппа 11
1.1.7. Гемагглютинин 12
I.2. Препараты применяемые при лечении гриппа. Вирусные мишени для лекарственного вмешательства 16
1.2.1. Производные адамантана (амантадин, ремантадин) 17
1.2.2. Дейтифорин 20
1.2.3. Рибавирин 21
1.2.4. Ингибиторы нейраминидазы 22
1.2.5. Осельтамивир карбоксилат (Тамифлю) 22
1.2.6. Занамивир (Relenza) 23
1.2.7. Ингавирин 23
1.2.8. Арбидол (Умифеновир) 24
1.2.9. Интерфероны 24
1.2.10. Индукторы интерферонов 25
Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 28
11.1. Химические соединения 28
11.2. Животные 28
11.2.1. Адаптация и отбор животных для исследования 28
11.2.2. Содержание животных 29
11.2.3. Способ введения препаратов и выбор доз 30
11.3. Вирусы и клетки 30
11.3.1. Культивирование и хранение вирусных штаммов 30
11.3.2. Культивирование вирусов и тестирование препаратов на культуре клеток MDCK 31
11.3.3. Реакция гемагглютинации (РГ А) 31
11.3.4. Исследование токсичности препаратов на клеточной культуре MDCK... 32
11.4. Оценка протективной активности производных камфоры на модели летальной гриппозной инфекции 32
11.5. Изучение морфогенеза гриппозной инфекции в условиях применения камфецина 33
11.6. Получение гистологических срезов и проведение гистологической окраски 34
11.7. Электронное микроскопирование 34
11.8. Статистический анализ и расчётные формулы 35
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ 36
III.1. Изучение вирусингибирующих свойств производных камфоры в культуре клеток 36
III.1.2. Сравнительный анализ эффективности исследованных препаратов 39
III.2. Оценка протективной активности производных камфоры на модели летальной гриппозной инфекции 44
III.3. Изучение морфогенеза гриппозной инфекции в условиях применения камфецина 44
III.3. Изучение влияния камфецина на ультраструктурные особенности морфогенеза гриппозной инфекции in vitro 51
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 56
ВЫВОДЫ 57
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 58
ВВЕДЕНИЕ 5
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Вирус гриппа 7
1.1.1. Род Influenzavirus A (вирус гриппа типа А) 7
1.1.2. Род Influenzavirus В (вирус гриппа типа В) 8
1.1.3. Род Influenzavirus С (вирус гриппа типа С) 8
1.1.4. Род Influenzavirus D (вирус гриппа типа D) 9
1.1.5. Строение вириона 10
1.1.6. Жизненный цикл вируса гриппа 11
1.1.7. Гемагглютинин 12
I.2. Препараты применяемые при лечении гриппа. Вирусные мишени для лекарственного вмешательства 16
1.2.1. Производные адамантана (амантадин, ремантадин) 17
1.2.2. Дейтифорин 20
1.2.3. Рибавирин 21
1.2.4. Ингибиторы нейраминидазы 22
1.2.5. Осельтамивир карбоксилат (Тамифлю) 22
1.2.6. Занамивир (Relenza) 23
1.2.7. Ингавирин 23
1.2.8. Арбидол (Умифеновир) 24
1.2.9. Интерфероны 24
1.2.10. Индукторы интерферонов 25
Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 28
11.1. Химические соединения 28
11.2. Животные 28
11.2.1. Адаптация и отбор животных для исследования 28
11.2.2. Содержание животных 29
11.2.3. Способ введения препаратов и выбор доз 30
11.3. Вирусы и клетки 30
11.3.1. Культивирование и хранение вирусных штаммов 30
11.3.2. Культивирование вирусов и тестирование препаратов на культуре клеток MDCK 31
11.3.3. Реакция гемагглютинации (РГ А) 31
11.3.4. Исследование токсичности препаратов на клеточной культуре MDCK... 32
11.4. Оценка протективной активности производных камфоры на модели летальной гриппозной инфекции 32
11.5. Изучение морфогенеза гриппозной инфекции в условиях применения камфецина 33
11.6. Получение гистологических срезов и проведение гистологической окраски 34
11.7. Электронное микроскопирование 34
11.8. Статистический анализ и расчётные формулы 35
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ 36
III.1. Изучение вирусингибирующих свойств производных камфоры в культуре клеток 36
III.1.2. Сравнительный анализ эффективности исследованных препаратов 39
III.2. Оценка протективной активности производных камфоры на модели летальной гриппозной инфекции 44
III.3. Изучение морфогенеза гриппозной инфекции в условиях применения камфецина 44
III.3. Изучение влияния камфецина на ультраструктурные особенности морфогенеза гриппозной инфекции in vitro 51
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 56
ВЫВОДЫ 57
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 58
📖 Введение
Грипп — острое инфекционное вирусное заболевание, сопровождающееся поражением верхних дыхательных путей. Среди возникающих осложнений — различные заболевания верхних и нижних отделов дыхательных путей, центральной нервной системы, сердца, почек и других органов. Способность гриппа вызывать ежегодные эпидемии и пандемии в масштабах всего земного шара, позволяет считать его проблемой мирового значения.
Лечение и профилактика гриппа является одной из самых актуальных медицинских и социально-экономических проблем. По данным ВОЗ, ежегодно во время эпидемий гриппа и подобных ему заболеваний в мире болеют до 5 млн, из них до 500 тыс. человек умирают. В России на грипп и ОРВИ ежегодно приходится до 90% от всей регистрируемой инфекционной заболеваемости. Считается, что ежегодно болеют 5-10% взрослых и 20-30% детей. При этом осложнения развиваются у 10-15% заболевших гриппом. Среди госпитализированных больных, чаще в группах риска, этот показатель достигает 30%. Ежегодная смертность вследствие осложнений гриппа составляет 7,5 -23 на 100 000 населения, причем большая часть летальных исходов приходится на лиц старше 65 лет. По данным Минздравсоцразвития РФ, в 2004 г. экономические потери от гриппа и ОРВИ составили 86% от всего ущерба, наносимого инфекционными болезнями
Непрерывная циркуляция вирусов гриппа и появление реассортантных штаммов животного происхождения представляют постоянную опасность. Одновременно с этим в последние годы отмечается распространение устойчивости штаммов вирусов гриппа к применяемым противовирусным препаратам, что делает поиск новых лекарственных препаратов актуальной проблемой современной медицины. Данная работа является продолжением многолетних исследований иминопроизводных камфары в лаборатории химиотерапии вирусных инфекций ФГБУ НИИ Гриппа Министерства Здравоохранения РФ.
Цель данного исследования: изучение противовирусной активности производных камфары в отношении вирусов гриппа.
Задачи:
1. Воспроизвести гриппозную инфекцию в культуре клеток MDCK.
2. Оценить цитотоксическую активность производных камфары для клеток MDCK.
3. Изучить уровень репродукции вируса гриппа в присутствии производных камфары в различных концентрациях.
4. Рассчитать 50%-ную цитотоксическую концентрацию и 50%-ную эффективную концентрацию для каждого из исследуемых соединений.
5. Воспроизвести летальную гриппозную инфекцию у животных.
6. Оценить влияние производных камфары на показатели гибели животных и морфологическую структуру тканей легких в ходе гриппозной пневмонии.
7. Изучить закономерности морфогенеза гриппозной инфекции в клетках MDCK при помощи электронной микроскопии.
Лечение и профилактика гриппа является одной из самых актуальных медицинских и социально-экономических проблем. По данным ВОЗ, ежегодно во время эпидемий гриппа и подобных ему заболеваний в мире болеют до 5 млн, из них до 500 тыс. человек умирают. В России на грипп и ОРВИ ежегодно приходится до 90% от всей регистрируемой инфекционной заболеваемости. Считается, что ежегодно болеют 5-10% взрослых и 20-30% детей. При этом осложнения развиваются у 10-15% заболевших гриппом. Среди госпитализированных больных, чаще в группах риска, этот показатель достигает 30%. Ежегодная смертность вследствие осложнений гриппа составляет 7,5 -23 на 100 000 населения, причем большая часть летальных исходов приходится на лиц старше 65 лет. По данным Минздравсоцразвития РФ, в 2004 г. экономические потери от гриппа и ОРВИ составили 86% от всего ущерба, наносимого инфекционными болезнями
Непрерывная циркуляция вирусов гриппа и появление реассортантных штаммов животного происхождения представляют постоянную опасность. Одновременно с этим в последние годы отмечается распространение устойчивости штаммов вирусов гриппа к применяемым противовирусным препаратам, что делает поиск новых лекарственных препаратов актуальной проблемой современной медицины. Данная работа является продолжением многолетних исследований иминопроизводных камфары в лаборатории химиотерапии вирусных инфекций ФГБУ НИИ Гриппа Министерства Здравоохранения РФ.
Цель данного исследования: изучение противовирусной активности производных камфары в отношении вирусов гриппа.
Задачи:
1. Воспроизвести гриппозную инфекцию в культуре клеток MDCK.
2. Оценить цитотоксическую активность производных камфары для клеток MDCK.
3. Изучить уровень репродукции вируса гриппа в присутствии производных камфары в различных концентрациях.
4. Рассчитать 50%-ную цитотоксическую концентрацию и 50%-ную эффективную концентрацию для каждого из исследуемых соединений.
5. Воспроизвести летальную гриппозную инфекцию у животных.
6. Оценить влияние производных камфары на показатели гибели животных и морфологическую структуру тканей легких в ходе гриппозной пневмонии.
7. Изучить закономерности морфогенеза гриппозной инфекции в клетках MDCK при помощи электронной микроскопии.
✅ Заключение
На модели гриппозной инфекции в культуре клеток MDCK была проанализирована противовирусная активность и цитотоксичность 37 соединений, из них 4 относились к изомерам камфары, 17 к симметричным и 26 - к несимметричным ее иминопроизводным. Среди иминопроизводных камфары обнаружены соединения, обладающие высоким уровнем противовирусной активности в отношении вируса гриппа типа А in vitro.
Среди несимметричных иминопроизводных наиболее высокую эффективность имеют соединения, в составе радикала которых есть гидроксильная группа, напрямую или с помощью короткого алифатического линкера присоединенная к иминогруппе. Эти же соединения характеризуются низкой токсичностью, что дает возможность рассматривать их в качестве перспективных лекарственных препаратов.
Среди симметричных иминов наиболее эффективными являются соединения с коротким алифатическим линкером, соединяющим камфарные группы.
Наибольшей среди исследуемых препаратов токсичностью обладают несимметричные иминопроизводные, имеющие в составе радикала бензольное кольцо и симметричные, в которых иминогруппы заменены на аминогруппы.
Было показано, что иминопроизводное камфары, содержащее в своем составе гидроксильную группу, присоединенную к иминогруппе через короткий алифатический линкер снижает объем поражения легких и смертность с 70 до 10%, при летальной гриппозной пневмонии in vivo.
При более детальном изучении протективной активности исследуемого соединения было обнаружено, что его применение снижает объем вирусного поражения легких: для вируса гриппа типа А с 73% до 34% в острой фазе и с 19% до 6% - в хронической; для вируса типа В - с 67% до 17% и с 14% до 4% соответственно. Кроме того, использование препарата повышает сохранность эпителия бронхов.
В результате проведённых ультраструктурных исследований было показано, что основным механизмом противовирусного действия камфецина является ингибирование процесса слияния мембран, что в дальнейшем приводит к торможению вирусного морфогенеза и как следствие - снижению уровня вирусной репродукции .
Среди несимметричных иминопроизводных наиболее высокую эффективность имеют соединения, в составе радикала которых есть гидроксильная группа, напрямую или с помощью короткого алифатического линкера присоединенная к иминогруппе. Эти же соединения характеризуются низкой токсичностью, что дает возможность рассматривать их в качестве перспективных лекарственных препаратов.
Среди симметричных иминов наиболее эффективными являются соединения с коротким алифатическим линкером, соединяющим камфарные группы.
Наибольшей среди исследуемых препаратов токсичностью обладают несимметричные иминопроизводные, имеющие в составе радикала бензольное кольцо и симметричные, в которых иминогруппы заменены на аминогруппы.
Было показано, что иминопроизводное камфары, содержащее в своем составе гидроксильную группу, присоединенную к иминогруппе через короткий алифатический линкер снижает объем поражения легких и смертность с 70 до 10%, при летальной гриппозной пневмонии in vivo.
При более детальном изучении протективной активности исследуемого соединения было обнаружено, что его применение снижает объем вирусного поражения легких: для вируса гриппа типа А с 73% до 34% в острой фазе и с 19% до 6% - в хронической; для вируса типа В - с 67% до 17% и с 14% до 4% соответственно. Кроме того, использование препарата повышает сохранность эпителия бронхов.
В результате проведённых ультраструктурных исследований было показано, что основным механизмом противовирусного действия камфецина является ингибирование процесса слияния мембран, что в дальнейшем приводит к торможению вирусного морфогенеза и как следствие - снижению уровня вирусной репродукции .
ИЛИ
Поиск аналога
📕 Список литературы
🛒 Оформить заказ
⚡ Работу высылаем в течении 5 минут после оплаты.