Введение 4
II. Обзор литературы 6
II.1. Влияние антропогенной эвтрофикации на морские экосистемы 6
11.2. Краткая характеристика типа Dinoflagellata 7
11.3. Влияние условий внешней среды на физиологию и морфологию
фитопланктонных организмов 9
11.3.1. Размер и форма клеток 10
11.3.2. Количество пиментов в клетке 11
11.3.3. Скорость поглощения неорганического углерода 12
11.3.4. Скорость поглощения азота 12
11.3.5. Интенсивность синтеза РНК 13
11.4. Prorocentrum minimum:причины успешного распространения 13
III. Методы 17
III.1. Объекты исследования 17
III.2 Периодическое культивирование клонов P. minimum 17
III.3. Проточное культивирование P. minimum 18
III.4. Световая микроскопия и определение плотности культуры 20
III.6. Измерение синтеза РНК по включению 3Н-уридина 20
III.7. Измерение поглощения азота и углерода 20
III.7. Расчет интенсивности поглощения 21
III. 8. Измерение интенсивности флуоресценции 22
III. 9. Измерение длины клеток 22
III. 10. Измерение концентрации азота и углерода 22
III. 14. Молекулярные методы 23
III. 14. 1. Выделение ДНК из клеток P. minimum 23
III. 14. 2. Конструирование праймеров 23
III. 14. 3. Условия полимеразной цепной реакции (ПЦР) 24
III. 14. 4. Электрофоретическое разделение ампликонов 24
III. 14. 5. Выделение амплифицированных фрагментов ДНК из агарозного геля ... 25
III. 14. 6. Секвенирование ДНК 25
III.15. Статистический анализ данных 25
IV. Результаты и обсуждение 26
IV.1. Влияние различных сочетаний источников азота на уровень синтеза РНК и флуоресценцию пигментов в опытах с периодической культурой 26
IV.2. Влияние различных сочетаний источников азота на морфологические и физиологические параметры клеток в опытах с проточной культурой 29
IV.2.1. Динамика роста клеток в проточных культурах 29
IV.2.2. Измерение физиологических параметров клеток в проточных культурах ... 32
IV.2.3. Анализ морфологических характеристик клеток 36
IV.2.4. Измерение скорости поглощения азота и углерода 39
IV.3. Результаты анализа и амплификации генов транспортера мочевины и транспортера нитрата 40
Выводы 46
Список литературы 48
Приложение 58
Усиление глобального антропогенного влияния приводит к изменениям состава морской воды, особенно в эстуарных зонах, куда осуществляется массовый экспорт биогенных веществ. Сельскохозяйственная и животноводческая активность, смыв удобрений, промышленные сбросы способствуют эвтрофикации морских экосистем, что, в свою очередь, приводит к интенсивному развитию фитопланктона и учащению формирования обильных цветений микроводорослей.
Фитопланктонные микроорганизмы являются важнейшими первичными продуцентами в мировом океане и играет важную роль в морских экосистемах и глобальных биогеохимических циклах (Falkowski, 2012). В условиях глобальной эвтрофикации возникает необходимость в изучении влияния изменения состава воды на физиологические параметры водорослей. В связи с изменяющимися условиями некоторые группы микроорганизмов привлекают к себе все больший научный интерес, к одной из них относятся протисты типа Dinoflagellata.
Несмотря на то что в последние несколько десятилетий тип Dinoflagellata активно исследуется в полевых условиях и в лабораториях разных стран мира, информация о некоторых аспектах их жизнедеятельности представлена не в полном объеме. До сих пор не было произведено полное секвенирование генома этих организмов, и многие белки не были выделены и охарактеризованы. Тем не менее, в условиях эвтрофикации изучение азотного метаболизма динофлагеллят представляет интерес, поскольку именно повышенная концентрация азота в морской воде в первую очередь предоставляет им конкурентное преимущество и позволяет образовывать интенсивные цветения, также известные как «красные приливы». Изучение механизмов регуляции азотного метаболизма динофлагеллят позволит расширить понимание экологических процессов и влияния содержания азота в морской воде на динамику популяций фитопланктона.
На данный момент в литературе хорошо освещено влияние концентрации источников азота в среде на физиологические и морфологические параметры динофлагеллят (Ou et al., 2014; Olenina et al., 2016), однако очень малое количество работ посвящено влиянию непосредственно формы азота на клетки. Это немаловажно, поскольку динофлагелляты демонстрируют выраженные предпочтения при поглощении различных источников азота. Предположительно, наличие различных форм азота в среде может по-разному влиять на биосинтетические процессы, проходящие в клетке, и тем самым обусловливать вариабельность морфологических и физиологических параметров.
Целью работы было изучить влияние различных источников азота и их комбинаций на морфологию и физиологию динофлагеллят.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
1. Изучить влияние различных источников азота и их комбинаций на морфологические и физиологические параметры клеток, растущих в периодической культуре;
2. Изучить влияние различных источников азота на морфологические и физиологические параметры клеток, растущих в проточной культуре;
3. Сконструировать праймеры к генам транспортера мочевины и транспортера нитрата и амплифицировать фрагменты этих генов у лабораторных клонов Prorocentrum minimum.
Работа частично поддержана грантами РНФ, проект 16-14-10116, и РФФИ, проект 15-29-02706.
1. Уровень синтеза РНК и скорость ассимиляции азота в периодических и проточных культурах P. minimumзависят от типа и концентрации экзогенного источника азота.
2. Размер клеток P. minimum,автофлуоресценция пигментов и скорость поглощения углерода не зависят от типа источника азота.
3. Амплификация тотальной ДНК P. minimumс использованием специально сконструированных праймеров свидетельствует о наличии генов транспортера нитрата NRT2.1 и транспортера мочевины DUR3.
1. Aksnes D. L., Egge J. K. A theoretical model for nutrient uptake in phytoplankton // Mar Ecol Prog Ser 1991. V. 70. P. 65-72.
2. Antia N. J., Harrison P. J., Oliveira L. The role of dissolved organic nitrogen in phytoplankton nutrition, cell biology and ecology //Phycologia. 1991. V. 30. P. 1¬89.
3. Atkinson D., Ciotti B. J., Montagnes D. J. S. Protists decrease in size linearly with temperature: ca. 2.5% C- 1// Proc R Soc of London B: Biological Sciences. 2003. V. 270. P. 2605-2611.
4. Barton A. D. et al. The biogeography of marine plankton traits //Ecology letters. - 2013. V. 16. P. 522-534.
5. Bouwman L., Goldewijk K. K., Van Der Hoek K. W., Beusen A. H., Van Vuuren D. P., Willems J., Rufino M. C., Stehfest E. Exploring global changes in nitrogen and phosphorus cycles in agriculture induced by livestock production over the 1900-2050 period // PNAS. 2013. V. 110. P. 20882-20887.
6. Burkholder J.M., Dickey D.A., Kinder C., Reed R.E., Mallin M.A., Melia G., McIver M.R., Cahoon L.B., Brownie C., Deamer N., Springer J., Glasgow Jr. H., Toms D., Smith J., 2006. Comprehensive trend analysis of nutrients and related variables in a large eutrophic estuary: a decadal study of anthropogenic and climatic influences // Limnol. Oceanogr. 2006. V. 51. P. 463-487
7. Chisholm S. W. Phytoplankton size //Primary productivity and biogeochemical cycles in the sea. 1992. V. 43. P. 213-237.
8. Coale K. H. et al. A massive phytoplankton bloom induced by an ecosystem-scale iron fertilization experiment in the equatorial Pacific Ocean //Nature. 1996. V. 383.
9. Dagenais-Bellefeuille S., Morse D. Putting the N in dinoflagellates // Frontiers in microbiology. 2013. V. 4. P. 1-14.
10. Dale T., Rey F., Heimdal B. R. Seasonal development of phytoplankton at a high latitude oceanic site //Sarsia. 1999. V. 84. P. 419-435.
11. Dale, B., Thorsen, T.A., Fjellsa, A. Dinoflagellate cysts as indicators of cultural eutrophication in the Oslofjord, Norway // Estuar. Coast. Shelf Sci. 1999. V. 48. P. 371-382.
12. Deutsch, B., Mewes, M., Liskow, I., Voss, M. Quantification of diffuse nitrate inputs into a small river system using stable isotopes of oxygen and nitrogen in nitrate // Organic Geochemistry. 2006. V. 37. P. 1333-1342.
13. Doane T. A., Horwath W. R. Spectrophotometric determination of nitrate with a single reagent // Anal.Lett. 2003. V. 36. P. 2713-2722.
14. Dugdale C. R. and Wilkerson F. The use of 15N to measure nitrogen uptake in eutrophic oceans; experimental considerations // Limnol Oceanogr. 1986. V. 1. P. 673-689.
15. Dyhrman S. T., Anderson D. M. Urease activity in cultures and field populations of the toxic dinoflagellate Alexandrium //Limnol Oceanogr. 2003. V. 48. P. 647¬655.
16. Edler, L., .Lrtebjerg, G., Grandli, E., 1982. Exceptional plankton blooms in the entrance to the Baltic Sea-the Kattegat and Belt Sea area // International Council for the Exploration of the sea. ICES C.M. L 20. P. 1-6.
17. Fabregas J., Abalde J., Herrero C. Biochemical composition and growth of the marine microalgae Dunaliella tertiolecta (Butcher) with different ammonium nitrogen concentrations as chloride, sulphate, nitrate and carbonate // Aquaculture. 1989. V. 83. P. 289-304.
18. Fagerberg, T., Jephson, T., Carlsson, P. Molecular size of riverine dissolved organic matter influences coastal phytoplankton communities // Mar. Ecol. Prog. 2010. V. 409. P. 17-25.
19. Falkowski P.G. Evolution of the nitrogen cycle and its influence on the biological sequestration of CO2 in the ocean // Nature. 1997. V. 387. P. 272-275.
20. Falkowski P.G. The power of plankton // Nature. 2012. V. 483. P. 17-20.
21. Fan C., Glibert P. M. Effects of light on nitrogen and carbon uptake during a Prorocentrum minimum bloom // Harmful Algae. 2005. V. 4. P. 629-641.
22. Fan C., Glibert P. M., Alexander J., Lomas M. W. Characterization of urease activity in three marine phytoplankton species, Aureococcus anophagefferens, Prorocentrum minimum, and Thalassiosira weissflogii// Marine Biology. 2003. V. 142. P. 949-958.
23. Fernandez-Reiriz M .J., Perez-Camacho A., Ferreiro M . J., B Lanco J., Planas M., Campos M.J., Labarta U. Biomass production and variation in the biochemical profile (total protein, carbohydrates, RNA, lipid and fatty acids) of seven marine microalgae // Aquaculture. 1989. V. 83. P. 17-37.
24. Fidalgo J.P, Cid A., Abalde J., Herrero C. Culture of the marine diatom Phaeodactylum tricornutum with different nitrogen sources: growth, nutrient conversion and biochemical composition // Cahiers de Biologie Marine. 1995. V. 36. P. 165- 1 73.
25. Finkel Z. V. et al. A universal driver of macroevolutionary change in the size of marine phytoplankton over the Cenozoic // Proc Natl Acad Sci. 2007. V. 104. P. 20416-20420.
26. Finkel Z. V. Light absorption and size-scaling of light-limited metabolism in marine diatoms // Limnol Oceanogr. 2001. V. 46. P. 86-94.
27. Fujiki T., Taguchi S. Variability in chlorophyll a specific absorption coefficient in marine phytoplankton as a function of cell size and irradiance // J Plankton Res. 2002. V. 24. P. 859-874.
28. Galloway J. N., Dentener F. J., Capone D. G., Boyer E. W., Howarth R. W., Seitzinger S. P., Asner G. P., Cleveland C. C., Green P. A., Holland E. A., Karl D. M., Michaels A. F., Porter J. H., Townsend A. R., Voosmarty C. J. Nitrogen Cycles: Past, Present, and Future // Biogeochemistry. 2004. V. 70. P. 153-226.
29. Garcia N., Lopez-Elias J.A., Miranda A., Martinez-Porchas M., Huerta N., Garcia
A. Effect of salinity on growth and chemical composition of the diatom Thalassiosira weissflogii at three culture phases // Lat Am J Aquat Res. 2012. V.
40. P. 435-440.
30. Glibert P. M. et al. Pluses and minuses of ammonium and nitrate uptake and assimilation by phytoplankton and implications for productivity and community composition, with emphasis on nitrogen-enriched conditions // Limnol Oceanogr. 2016. Т. 61. P. 165-197.
31. Glibert P. M., Burkholder J. A. M., Kana T. M. Recent insights about relationships between nutrient availability, forms, and stoichiometry, and the distribution, ecophysiology, and food web effects of pelagic and benthic Prorocentrum species // Harmful Algae. 2012. V. 14. P. 231-259.
32. Glibert P. M., Seitzinger S., Heil C. A., Burkholder J.M., Parrow M.W., Codispoti L.A., Kelly V. The role of eutrophication in the global proliferation of harmful algal blooms // Oceanography. 2005. V. 18. P.198-209.
33. Glibert P. M.,. Heil C. A, Hollander D. J., Revilla M., Hoare A., Alexander J., Murasko S. Evidence for Dissolved Organic Nitrogen and Phosphorus Uptake During a Cyanobacterial Bloom in Florida Bay // Mar Ecol Prog Ser 2004. V. 280. P. 73-83.
34. Glibert P.M., Burkholder J.M. The complex relationships between increases in fertilization of the earth, coastal eutrophication and proliferation of harmful algal blooms // Ecology of Harmful Algae. 2006. V. 189. P. 341-354.
35. Glibert, P.M., Mayorga, E., Seitzinger, S. Prorocentrum minimum tracks anthropogenic nitrogen and phosphorus inputs on a global basis: application of spatially explicit nutrient export models // Harmful Algae. 2008. V. 8. P. 33-38.
36. Goeyens L. et al. A room temperature procedure for the manual determination of urea in seawater //Estuar Coast Shelf S. 1998. V. 47. P. 415-418.
37. Gou R., Ki J. S. Evaluation and validation of internal control genes for studying gene expression in the dinoflagellate Prorocentrum minimum using real-time PCR // Eur J Protistol. 2012. V. 48. P. 199-206.
38. Gruber N. The marine nitrogen cycle: overview and challenges // Nitrogen in the Marine Environment. 2008. V. 2. P. 1-50.
39. Grzebyk, D., Berland, B. Influences of temperature, salinity and irradiance on growth of Prorocentrum minimum (Dinophyceae) from the Mediterranean Sea // J. Plankton Res. 1996. V. 18. P. 1837-1849.
40. Hackett J. D., Anderson M. D., Erdner D. L., Bhattacharya D. Dinoflagellates: a remarkable evolutionary experiment // Am J Bot 2004. V. 91. P. 1523-1534.
41. Hajdu S., Edler L., Olenina I., Witek B. (2000) Spreading and Establishment of the Potentially Toxic Dinoflagellate Prorocentrum minimum in the Baltic Sea // J Int Rev Hydrobiol. 2000. V. 85. P. 557-571.
42. Hajdu S., Pertola S., Kuosa H. Prorocentrum minimum (Dinophyceae) in the Baltic Sea: morphology, occurrence — a review// Harmful Algae. 2005. V. 4. P. 471-480.
43. Han M., Lee H., Anderson D. M., Kim B. Paralytic shellfish toxin production by the dinoflagellate Alexandrium pacificum (Chinhae Bay, Korea) in axenic, nutrient-limited chemostat cultures and nutrient-enriched batch cultures // Mar Pollut Bull. 2016. V.104. P. 34-43.
44. Heil C. A., Glibert P. M., Fan C. Prorocentrum minimum (Pavillard) Schiller. A review of a harmful algal bloom species of growing worldwide importance // Harmful Algae. 2005. V. 4. P. 449-470.
45. Howarth R. W., Sharpley A., Walker D. Sources of nutrient pollution to coastal waters in the United States: implications for achieving coastal water quality goals // Estuaries. 2002. V. 25. P. 656-676.
46. Howarth R. W., Swaney D. P., Butler T. J., Marino R. Rapid communication: climatic control on eutrophication of the Hudson river estuary // Ecosystems. 2000. V. 3. P. 210-215.
47. Irigoien X., Flynn K. J., Harris R. P. Phytoplankton blooms: a ‘loophole’in microzooplankton grazing impact? //J Plankton Res. 2005. V. 27. P. 313-321.
48. Iwasaki H. The physiological characteristics of neritic red tide flagellate // Bull Plankton Soc Jpn. 1973. V. 19. P. 104-114.
49. Jauzein C., Loureiro S., Garces E., Collos Y. Interactions between ammonium and urea uptake by five strains of Alexandrium catenella (Dinophyceae) in culture // Aquat Microb Ecol. 2008. V. 53. P. 271-280.
50. Johansson N., Grandli E. Influence of different nutrient conditions on cell density, chemical composition and toxicity of Prymnesium parvum (Haptophyta) in semi- continuous cultures // Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 1999. V. 239. P. 243-258.
51. Kallqvist T., Svenson A. Assessment of ammonia toxicity in tests with the microalga, Nephroselmispyriformis, Chlorophyta //Water research. 2003. V. 37. P. 477-484.
52. Keeling P. J., Burki F., Wilcox H., Allam B., Allen E. E., Amaral-Zettler L. A., Armbrust E. V., Archibald J.M., Bharti A. K., Bell C. J., Beszteri B., Bidle K. D., Cameron C. T., Campbell L., Caron D. A., Cattolico R. A., Collier J. L., Coyne K., Davy S. K., Deschamps P., Dyhrman S. T., Edvardsen B., Gates R. D., Gobler C. J., Greenwood S. J., Guida S. M., Jacobi J. L., Jakobsen K. S., James E.R., Jenkins
B. , John U., Johnson M.D., Juhl A. R., Kamp A., Katz L. A., Kiene R., Kudryavtsev A., Leander B. S., Lin S., Lovejoy C., Lynn D., Marchetti A., McManus G., Nedelcu A. M., Menden-Deuer S., Miceli C., Mock T., Montresor M., AnnMoran M., Murray S., Nadathur G., , Nagai S., Ngam P. B., Palenik B., Pawlowski J., Petroni G., Piganeau G., Posewitz M. C., Rengefors K., Romano G., Rumpho M. E., Rynearson T., , Schilling K. B., Schroeder D. C., Simpson A.G.B., Slamovits C. H.m, Smith D. R., Smith G.J., Smith S. R., Sosik H.M., Stief P., Theriot E., Twary S.N., , Umale P. E., Vaulot D., Wawrik B., Wheeler G.L., Wilson W. H., Xu Y., Zingone A., Worden A. Z. The Marine Microbial Eukaryote Transcriptome Sequencing Project (MMETSP): Illuminating the Functional Diversity of Eukaryotic Life in the Oceans through Transcriptome Sequencing // PLoS Biol V.12. P. e1001889.
53. Kimor B., Moigis A.G., Dohms V., Stienen C. (1985) A case of mass occurrence of Prorocentrum minimum in the Kiel Fjord // Mar Ecol Prog Ser. 1985. V. 27. P. 209-215.
54. Kiorboe T. Optimal swimming strategies in mate-searching pelagic copepods // Oecologia. 2008. V. 155. P. 179-192.
55. Kiorboe T. Turbulence, phytoplankton cell size, and the structure of pelagic food webs //Ad Mar Biol. 1993. V. 29. P. 1-72.
56. Kirk J. T. O. Light and Photosynthesis in Aquatic Ecosystems. Cambridge University Press, Cambridge. 1994. 509 p.
57. Laabir M., Jauzein C., Genovesi B., Masseret E., Grzebyk D., Cecchi P., Vaquer A., Perrin Y., Collos Y. Influence of temperature salinity & irradiance on the growth and cell yield of the harmful red tide dinoflagellate Alexandrium catenella colonizing Mediterranean waters // J Plankton Res. 2011. V. 33. P. 1550-1563.
58. Lee Y.S. Factors affecting outbreaks of high-density Cochlodinium polykrikoides red tides in the coastal seawaters around Yeosuand Tongyeong, Korea // Mar Pollut Bull. 2006. V. 52. P. 1249-1259.
59. Legrand C., Grandli E., Carlsson P. Induced phacotrophy in the photosynthetic dinoflagellate Heterocapsa triquetra // Aquat. Microb. Ecol. 1998. V. 15. P. 65-75.
60. Levasseur M., Thompson P. A., Harrison P.J. Physiological acclimation of marine phytoplankton to different nitrogen sources // J Phycol. 1993. V. 29. P. 587-595.
61. Li W. K. W., Goldman J. C. Problems in estimating growth rates of marine phytoplankton from short-term 14C assays // Microb Ecol. 1981V. 7. P. 113-121.
62. Lin S., Zhang H., Hou Y., Miranda L., Bhattacharya D. Development of a Dinoflagellate-Oriented PCR Primer Set Leads to Detection of Picoplanktonic Dinoflagellates from Long Island Sound // Appl Environ Microbiol 2006. P. 5626-5630.
63. Litaker R.W., Tester P.A., Duke C.S., Kenney B.E., Pinkney J.L., Ramus J. Seasonal niche strategy of the bloom-forming dinoflagellate Heterocapsa triquetra //Mar Ecol Prog 2002. V. 232. P. 45-62.
64. Liu Y. et al. Effects of nitrogenous nutrition on growth and nitrogen assimilation enzymes of dinoflagellate Akashiwo sanguinea //Harmful Algae. 2015. V. 50. P. 99-106.
65. Lomas M. W., Glibert P. M. Interactions between NH+4 and NO-3 uptake and assimilation: comparison of diatoms and dinoflagellates at several growth temperatures // Marine Biology. 1999. V. 133. P. 541-551.
66. Lourenco S. O., Barbarino E., Mancini-Filho J., Schinke K.P., Aidar E. Effects of different nitrogen sources on the growth and biochemical profile of 10 marine microalgae in batch culture: an evaluation for aquaculture // Phycologia. 2002. V.
41. P. 158-168.
67. Maranon E. Cell size as a key determinant of phytoplankton metabolism and community structure // Ann Rev Mar Sci. 2015. V. 7. P. 241-264.
68. Maranon E. et al. Unimodal size scaling of phytoplankton growth and the size dependence of nutrient uptake and use //Ecology letters. 2013. V. 16. P. 371-379.
69. Matantseva O., Skarlato S., Vogts A., Pozdnyakov I., Liskow I., Schubert H., Voss M. Superposition of individual activities: urea-mediated suppression of nitrate uptake in the dinoflagellate Prorocentrum minimum revealed at the population and single-cell levels // Front Microbiol. V. 7. P. 1-14.
70. Mendez G. S., Delwiche C. F., Apt K. B., Lippmeier J. C. Dinoflagellate Gene Structure and Intron Splice Sites in a Genomic Tandem Array // J of Euk Microbiology. 2015. V. 62. P. 679-687.
71. Miranda K. M., Espey M. G., Wink D. A. A rapid, simple spectrophotometric method for simultaneous detection of nitrate and nitrite //Nitric oxide. 2001. V. 5. P. 62-71.
72. Mitra A., Zaman S., Ray S.K., Sinha S., Banerjee K. (2012) Inter-relationship between phytoplankton cell volume and aquatic salinity in Indian sundarbans // Nat Acad Sci Lett. 2012. V. 35. P. 485-491.
73. Mobley H. L., Hausinger R. P. Microbial ureases: significance, regulation, and molecular characterization //Microbiol Rev. 1989. V. 53. P. 85-108.
74. Mulvenna P. F., Savidge G. A modified manual method for the determination of urea in seawater using diacetylmonoxime reagent // Estuar Coast Shelf S. 1992. V. 34. P. 429-438.
75. Olenina I., Vaiciukynas E., Sulcius S., Paskauskas R., Verikas A., Gelzinis A., Bacauskiene M., Bertasiute V., Olenin S. The dinoflagellate Prorocentrum cordatum at the edge of the salinity tolerance: the growth is slower but cells are larger // Estuar Coast Shelf S. 2016. V. 168. P. 71-79.
76. Olenina I., Wasmund N., Hajdu S., Jurgensone I., Gromisz S., Kownacka J., Toming K., Vaiciute D., Olenin S. (2010) Assessing impacts of invasive phytoplankton: The Baltic Sea case // Mar Pollut Bull. 2010. V. 60. P. 1691-1700.
77. Ou L., Lundgren V., Lu S., Grandli E. The effect of riverine dissolved organic matter and other nitrogen forms on the growth and physiology of the dinoflagellate Prorocentrum minimum (Pavillard) Schiller // J Sea Res. 2014. V. 85. P. 499-507.
78. Pertola S., Faust M. A., Kuosa H. Survey on germination and species composition of dinoflagellates from ballast tanks and recent sediments in ports on the South Coast of Finland, North-Eastern Baltic Sea // Mar Pollut Bull. 2006. V. 52. P. 900¬911.
79. Pertola S., Faust M.A., Kuosa H., Hallfors G. Morphology of Prorocentrum minimum (Dinophyceae) in the Baltic Sea and in Chesapeake Bay: comparison of cell shapes and thecal ornamentation // Bot Mar. 2003. V. 46. P. 477-486.
80. Pertola S., Kuosa H., Olsonen R. Is the invasion of Prorocentrum minimum (Dinophyceae) related to the nitrogen enrichment of the Baltic Sea? // Harmful Algae. 2005. V. 4. P. 481-492.
81. Pfeiffer S. E., Tolmach L. J. RNA synthesis in synchronously growing populations of HeLa S3 cells. I. Rate of total RNA synthesis and its relationship to DNA synthesis //J Cell Physio. 1968. V. 71. P. 77-93.
82. Pozdnyakov I., Skarlato S. Dinoflagellate amphiesma at different stages of the life cycle // Protistology. 2012. V. 7. P. 108-115.
83. Raven J. A. A cost-benefit analysis of photon absorption by photosynthetic unicells // New Phytol. 1984. V. 98. P. 593-625.
84. Revilla M., Alexander J., Glibert P. M. Urea analysis in coastal waters: comparison of enzymatic and direct methods // Limnol Oceanogr: Methods. 2005. V. 3. P. 290-299.
85. Roder K., Hantzsche F.M., Gebuhr C., Miene C., Helbig T., Krock B., Hoppenrath M., Luckas B., Gerdts G. Effects of salinity, temperature and nutrients on growth, cellular characteristics and yessotoxin production of Protoceratium reticulatum// Harmful Algae. 2012. V. 15. P. 59-70.
86. Saba G.K., Steinberg D.K., Bronk D.A., Place A.R. The effects of harmful algal species and food concentration on zooplankton grazer production of dissolved organic matter and inorganic nutrients // Harmful Algae. V. 10. P. 291-303.
87. Sathyendranath, S., Platt, T., Stuart, V., Irwin, B. D., Veldhuis, M. J.W., Kraay, G.W. and Harrison,W. G. Some bio-optical characteristics of phytoplankton in the NW Indian Ocean // Mar Ecol Prog. 1996. V. 132. P. 299-311.
88. Schneider C. A.; Rasband W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis // Nature methods. 2012. V. 9. P. 671-675.
89. Schnepf E., ElbraChter M. Dinophyte chloroplasts and phylogeny - A review // Grana. 1999. V. 38. P. 81-97.
90. Sildever S., Andersen T. J., Ribeiro S., Ellegaard M. Influence of surface salinity gradient on dinoflagellate cyst community structure, abundance and morphology in the Baltic Sea, Kattegat and Skagerrak // Estuar Coast Shelf S. 2015. V. 155. P. 1¬7.
91. Solomon C. M., Glibert P. M. Urease activity in five phytoplankton species //Aquat Microb Ecol. 2008. V. 52. P. 149-157.
92. Stoecker D.K. Mixotrophy among Dinoflagellates // J Eukaryot Microbiol. 1999. V. 46. P. 397-401.
93. Stuart, V., Sathyendranath, S., Platt, T., Maass, H. and Irwin, B. D. Pigments and species composition of natural phytoplankton populations: effect on the absorption spectra // J Plankton Res. 1998. V. 20. P. 187-217.
94. Telesh I. V., Schubert H., Skarlato S. O. Ecological niche partitioning of the invasive dinoflagellate Prorocentrum minimum and its native congeners in the Baltic Sea // Harmful Algae. 2016. V. 59. P. 100-111.
95. Tyler M. A., Seliger H. H. Selection for a red tide organism: physiological responses to the physical environment // Limnol Oceanogr. 1981. V. 26. P. 310¬324.
96. Utting S . D . Influence of nitrogen availability on the biochemical composition of three unicellular marine algae of commercial importance // Aquaculture Engineering. 1985. V. 4. P. 175-190.
97. Voss M., Deutsch, B. Elmgren R., Humborg C., Kuuppo P., Pastuszak M., Rolff
C. , Schulte U., 2006. Source identification of nitrate by means of isotopic tracers in the Baltic Sea catchments // Biogeosciences Discuss. 2006. V. 3. P. 475-511.
98. Voss M., Dippner J.W., Humborg C., Hurdler J., Korth F., Neumann T., Schernewski G., Venohr M. History and scenarios of future development of Baltic Sea eutrophication // Estuar Coast Shelf S. 2011. V. 92. P. 307-322.
99. Waal D. B., Eberlein T., Bublitz Y., John U., Rost B. Shake it easy: a gently mixed continuous culture system for dinoflagellates // J Plankton Res. 2014. V. 36. P. 889-894.
100. Waite A. et al. Sinking rate versus cell volume relationships illuminate sinking rate control mechanisms in marine diatoms // Mar Ecol Prog Ser 1997. V. 157. P. 97¬108.
101. Wasmund N., Gobel J., Bodungen B. V. 100-years-changes in the phytoplankton community of Kiel Bight (Baltic Sea) // J Marine Syst. 2008. V. 73. P. 300-322.
102. Witek B., Plinski M. The first recorded bloom of Prorocentrum minimum (Pavillard) Schiller in the coastal zone of the Gulf of Gdansk // Oceanologia. 2000. V. 42. P. 29-36.
103. Yoon H. S., Hackett J. D., Bhattacharya D. A single origin of the peridinin- and fucoxanthin-containing plastids in dinoflagellates through tertiary endosymbiosis // PNAS. 2002. V. 99. P. 11724-11729.
104. Zehr J. P., Kudela R. M. Nitrogen Cycle of the Open Ocean: From Genes to Ecosystems // Ann Rev Mar Sci. 2011. V. 3. P. 197-225.
105. Матанцева О.В., Скарлато С. О. Миксотрофия у микроорганизмов: экологические и цитофизиологические аспекты // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2013. Т. 49. С. 245-254.