Помощь студентам в учебе
ВЗАИМОСВЯЗЬ ИНВАЗИВНЫХ СВОЙСТВ И ИММУНОФЕНОТИПА НЕЙРОЭНДОКРИННЫХ ОПУХОЛЕЙ ЛЁГКИХ
|
Перечень условных обозначений и символов 4
Введение 6
Глава 1. Обзор литературы 8
1.1. Характеристика нейроэндокринных опухолей лёгкого 8
1.1.1. Общая патология нейроэндокринных опухолей лёгкого
1.1.2. Эпидемиология нейроэндокринных опухолей лёгкого 12
1.1.3. Клиническая картина нейроэндокринных опухолей лёгкого 13
1.1.4. Диагностика нейроэндокринных опухолей лёгкого 13
1.1.5. Лечение и прогноз нейроэндокринных опухолей лёгкого 21
1.2. Характеристика ненейроэндокринных иммуногистохимических маркёров, использованных в работе 24
1.2.1. Особенности экспрессии цитокератинов опухолями
лёгкого 24
1.2.2. Маркёры для дифференциальной диагностики
плоскоклеточного рака лёгкого 27
Глава 2. Материалы и методы исследования 28
Глава 3. Результаты собственных исследований 42
3.1. Результаты оценки морфологических особенностей
исследованного материала 42
3.2. Результаты сравнительной оценки иммунофенотипа в
исследуемых группах 49
3.3. Результаты корреляционного анализа иммунофенотипа и
инвазивных свойств опухоли в исследуемых группах 55
Заключение 82
Выводы 85
Список использованной литературы 86
Приложение
Введение 6
Глава 1. Обзор литературы 8
1.1. Характеристика нейроэндокринных опухолей лёгкого 8
1.1.1. Общая патология нейроэндокринных опухолей лёгкого
1.1.2. Эпидемиология нейроэндокринных опухолей лёгкого 12
1.1.3. Клиническая картина нейроэндокринных опухолей лёгкого 13
1.1.4. Диагностика нейроэндокринных опухолей лёгкого 13
1.1.5. Лечение и прогноз нейроэндокринных опухолей лёгкого 21
1.2. Характеристика ненейроэндокринных иммуногистохимических маркёров, использованных в работе 24
1.2.1. Особенности экспрессии цитокератинов опухолями
лёгкого 24
1.2.2. Маркёры для дифференциальной диагностики
плоскоклеточного рака лёгкого 27
Глава 2. Материалы и методы исследования 28
Глава 3. Результаты собственных исследований 42
3.1. Результаты оценки морфологических особенностей
исследованного материала 42
3.2. Результаты сравнительной оценки иммунофенотипа в
исследуемых группах 49
3.3. Результаты корреляционного анализа иммунофенотипа и
инвазивных свойств опухоли в исследуемых группах 55
Заключение 82
Выводы 85
Список использованной литературы 86
Приложение
Интенсивные показатели частоты возникновения нейроэндокринных опухолей лёгкого имеют тенденцию к увеличению [6, 52, 53]. Этот факт делает проблематику исследований данной группы опухолей всё более актуальной. Учитывая агрессивный характер этих опухолей с одной стороны, и разницу в прогнозе отдельных типов опухолей этой группы, с другой [6, 52], встаёт проблема необходимости чётко индивидуально определять прогноз для пациентов с такими диагнозами, и следовательно наиболее точно понимать, какими конкретно характеристиками опухоли определяется прогноз. Прогноз, определяемый в процессе диагностики опухоли влияет на тактику лечения пациента, выбор конкретных методов лечения (хирургическое лечение, лекарственная терапия как в варианте химиотерапии, так и в варианте таргетной терапии, лучевая терапия), выбор комбинации возможных методов лечения [1, 7, 8].
Отмечено, что у разных типов нейроэндокринных опухолей признаки, характеризующие инвазивность, также имеют разную степень проявления [7]. Исходя из разного прогноза этих типов опухолей и разницы в степени проявления инвазивных свойств, можно предполагать наличие влияния на прогноз степени выраженности инвазивных свойств конкретной опухоли.
Иммуногистохимия, широко применяемая в последнее время в процессе диагностики разного рода новообразований, применяется и в диагностике нейроэндокринных опухолей лёгкого. Установлена корреляция результатов данного исследования с конкретным типом опухолей лёгкого [1, 47, 50, 52]. Принимая во внимание факт разного прогноза разных типов опухолей данной группы, можно предположить и наличие взаимосвязи между характером иммуногистохимического окрашивания и признаками инвазивности, определяющими прогноз.
Потенциальная информация о взаимосвязи степени экспрессии иммуногистохимических маркёров, традиционно применяемых в диагностике нейроэндокринных опухолей лёгкого, и инвазивности этих опухолей способна дополнительно помочь в определении прогноза и тактики лечения пациентов с данными диагнозами.
Для рассмотрения выбраны иммуногистохимические маркёры, как подтверждающие лёгочное происхождение данных опухолей, так и их нейроэндокринную дифференцировку, основываясь на данных литературы, свидетельствующих о разной степени экспрессии этих маркёров в разных типах нейроэндокринных опухолей лёгкого [1, 47, 50, 52].
Цель исследования: определить наличие взаимосвязи между выраженностью экспрессии диагностически значимых маркёров (Ki-67, Synaptophysin, CD-56, NSE, Chromogranin A, TTF-1, CK-8, CK-18, CK-7), определяемых иммуногистохимическим методом, и инвазивными свойствами нейроэндокринных опухолей лёгкого.
Задачи:
1. Провести морфологическую оценку препаратов нейроэндокринных опухолей лёгкого, окрашенных гематоксилин-эозином, и определить такие характеристики, как: морфологический тип опухоли, согласно классификации опухолей лёгкого ВОЗ 2015 г.; определить наличие или отсутствие следующих признаков инвазивности: наличие и степень метастазирования в лимфатические узлы, наличие периневральной и сосудистой инвазии, наличие вторичного прорастания опухоли в плевру или крупный бронх, что определяется как местные признаки инвазивности.
2. Определить степень экспрессии ряда следующих маркёров, определяемых иммуногистохимически в рассматриваемом опухолевом материале: Ki-67, Synaptophysin, CD-56, NSE, Chromogranin A, TTF-1, CK-8, CK-18, CK-7, p-63 или p-40.
3. Статистически оценить наличие корреляции между признаками, имеющими количественный эквивалент (степень метастазирования в лимфатические узлы и экспрессия выбранных маркёров, определяемая иммуногистохимически); статистически оценить достоверность разницы экспрессии выбранных маркёров, при её наличии, между группами случаев с наличием выбранных признаков инвазивности и без них.
Отмечено, что у разных типов нейроэндокринных опухолей признаки, характеризующие инвазивность, также имеют разную степень проявления [7]. Исходя из разного прогноза этих типов опухолей и разницы в степени проявления инвазивных свойств, можно предполагать наличие влияния на прогноз степени выраженности инвазивных свойств конкретной опухоли.
Иммуногистохимия, широко применяемая в последнее время в процессе диагностики разного рода новообразований, применяется и в диагностике нейроэндокринных опухолей лёгкого. Установлена корреляция результатов данного исследования с конкретным типом опухолей лёгкого [1, 47, 50, 52]. Принимая во внимание факт разного прогноза разных типов опухолей данной группы, можно предположить и наличие взаимосвязи между характером иммуногистохимического окрашивания и признаками инвазивности, определяющими прогноз.
Потенциальная информация о взаимосвязи степени экспрессии иммуногистохимических маркёров, традиционно применяемых в диагностике нейроэндокринных опухолей лёгкого, и инвазивности этих опухолей способна дополнительно помочь в определении прогноза и тактики лечения пациентов с данными диагнозами.
Для рассмотрения выбраны иммуногистохимические маркёры, как подтверждающие лёгочное происхождение данных опухолей, так и их нейроэндокринную дифференцировку, основываясь на данных литературы, свидетельствующих о разной степени экспрессии этих маркёров в разных типах нейроэндокринных опухолей лёгкого [1, 47, 50, 52].
Цель исследования: определить наличие взаимосвязи между выраженностью экспрессии диагностически значимых маркёров (Ki-67, Synaptophysin, CD-56, NSE, Chromogranin A, TTF-1, CK-8, CK-18, CK-7), определяемых иммуногистохимическим методом, и инвазивными свойствами нейроэндокринных опухолей лёгкого.
Задачи:
1. Провести морфологическую оценку препаратов нейроэндокринных опухолей лёгкого, окрашенных гематоксилин-эозином, и определить такие характеристики, как: морфологический тип опухоли, согласно классификации опухолей лёгкого ВОЗ 2015 г.; определить наличие или отсутствие следующих признаков инвазивности: наличие и степень метастазирования в лимфатические узлы, наличие периневральной и сосудистой инвазии, наличие вторичного прорастания опухоли в плевру или крупный бронх, что определяется как местные признаки инвазивности.
2. Определить степень экспрессии ряда следующих маркёров, определяемых иммуногистохимически в рассматриваемом опухолевом материале: Ki-67, Synaptophysin, CD-56, NSE, Chromogranin A, TTF-1, CK-8, CK-18, CK-7, p-63 или p-40.
3. Статистически оценить наличие корреляции между признаками, имеющими количественный эквивалент (степень метастазирования в лимфатические узлы и экспрессия выбранных маркёров, определяемая иммуногистохимически); статистически оценить достоверность разницы экспрессии выбранных маркёров, при её наличии, между группами случаев с наличием выбранных признаков инвазивности и без них.
Сравнение экспрессии выбранных маркёров (Ki-67, Synaptophysin, CD-56, NSE, Chromogranin A, TTF-1, CK-8, CK-18, CK-7) в двух группах, представленных разными вариантами случаев с наличием метастазов в лимфатических узлах и случаями без метастазов в лимфатических узлах не выявило статистически значимой разницы между данными двумя группами случаев. U-критерий во всех вариантах сравнительного анализа был больше табличного значения для уровня значимости p<0,05 (Таблицы 4,5,6). Данный факт не позволяет косвенно судить о возможном поражении лимфатических узлов, при их малом количестве в операционном материале, при наличии соответствующего профиля экспрессии данных маркёров.
Обратная картина наблюдается при сравнении экспрессии названных маркёров в двух группах, представленных случаями с наличием местных признаков инвазии (прорастание в плевру, вторичное прорастание в крупный бронх) и признаков сосудистой инвазии, и случаями, в которых данные признаки отмечены не были. Проведение непараметрического анализа Манна-Уитни выявило статистически значимую разницу между данными двумя группами случаев. U-критерий в ряде сравниваемых пар был меньше табличного значения для уровня значимости p<0,05 (Таблица 7). Данный факт позволяет косвенно судить о наличии взаимосвязи названных признаков инвазивности и особенностями иммунофенотипа (более выраженной экспрессии маркёра Ki-67 и менее выраженной экспрессии CK-7, CK-18).
При исследовании тесноты связи таких явлений, как степень метастазирования в лимфатические узлы и экспрессия выбранных маркёров на материале случаев, содержащих исключительно препараты первичного опухолевого узла, выявлено наличие слабой обратной связи между экспрессией маркёров CD-56, NSE (Рис. 24-27) и уровнем метастазирования, слабой прямой связи между экспрессией маркёров Chromogranin A, TTF-1 и
уровнем метастазирования (Рис. 28-31), отсутствие связи между экспрессией маркёров Synaptophysin, CK-18 и уровнем метастазирования (Рис. 22, 23, 34, 35), и наличие средней прямой и обратной связи между степенью метастазирования и экспрессией маркёров CK-7, CK-8 (Рис. 32, 33, 36, 37) и Ki-67 (Рис. 20, 21) соответственно.
При проведении корреляционного анализа, учитывая также группу случаев, имеющих метастазы в лимфатических узлах группы N3 наблюдается несколько отличная картина взаимосвязи названных признаков. Таким образом, выявлено наличие слабой обратной связи между экспрессией маркёров Ki-67, Synaptophysin, CD-56 (Рис. 38-43) и уровнем метастазирования, слабой прямой связи между экспрессией маркёра TTF-1 и уровнем метастазирования (Рис. 48, 49), отсутствие связи между экспрессией маркёра CK-18 и уровнем метастазирования (Рис. 52, 53), и наличие средней прямой и обратной связи между степенью метастазирования и экспрессией маркёров Chromogranin A, CK-7, CK-8 (Рис. 46, 47, 50, 51, 54, 55) и NSE (Рис. 44, 45), соответственно.
Объединяя данные двух вариантов корреляционного анализа, можно отметить, что при включении в группу случаев, имеющих метастазы в лимфатических узлах группы N3, связь с уровнем экспрессии маркёра Ki-67 становится менее значимой, а связь с уровнем экспрессии маркёров NSE, Chromogranin A более значимой, сохраняя знак коэффициента корреляции.
Суммируя полученные данные, можно сделать вывод о слабой взаимосвязи между уровнем проявления инвазивных свойств нейроэндокринных опухолей лёгкого и экспрессией выбранных маркёров, которое тем не менее проявляется во взаимосвязи наличия признаков местной инвазии и сосудистой инвазии с уровнем экспрессии Ki-67, CK-7, CK-18.
Обратная картина наблюдается при сравнении экспрессии названных маркёров в двух группах, представленных случаями с наличием местных признаков инвазии (прорастание в плевру, вторичное прорастание в крупный бронх) и признаков сосудистой инвазии, и случаями, в которых данные признаки отмечены не были. Проведение непараметрического анализа Манна-Уитни выявило статистически значимую разницу между данными двумя группами случаев. U-критерий в ряде сравниваемых пар был меньше табличного значения для уровня значимости p<0,05 (Таблица 7). Данный факт позволяет косвенно судить о наличии взаимосвязи названных признаков инвазивности и особенностями иммунофенотипа (более выраженной экспрессии маркёра Ki-67 и менее выраженной экспрессии CK-7, CK-18).
При исследовании тесноты связи таких явлений, как степень метастазирования в лимфатические узлы и экспрессия выбранных маркёров на материале случаев, содержащих исключительно препараты первичного опухолевого узла, выявлено наличие слабой обратной связи между экспрессией маркёров CD-56, NSE (Рис. 24-27) и уровнем метастазирования, слабой прямой связи между экспрессией маркёров Chromogranin A, TTF-1 и
уровнем метастазирования (Рис. 28-31), отсутствие связи между экспрессией маркёров Synaptophysin, CK-18 и уровнем метастазирования (Рис. 22, 23, 34, 35), и наличие средней прямой и обратной связи между степенью метастазирования и экспрессией маркёров CK-7, CK-8 (Рис. 32, 33, 36, 37) и Ki-67 (Рис. 20, 21) соответственно.
При проведении корреляционного анализа, учитывая также группу случаев, имеющих метастазы в лимфатических узлах группы N3 наблюдается несколько отличная картина взаимосвязи названных признаков. Таким образом, выявлено наличие слабой обратной связи между экспрессией маркёров Ki-67, Synaptophysin, CD-56 (Рис. 38-43) и уровнем метастазирования, слабой прямой связи между экспрессией маркёра TTF-1 и уровнем метастазирования (Рис. 48, 49), отсутствие связи между экспрессией маркёра CK-18 и уровнем метастазирования (Рис. 52, 53), и наличие средней прямой и обратной связи между степенью метастазирования и экспрессией маркёров Chromogranin A, CK-7, CK-8 (Рис. 46, 47, 50, 51, 54, 55) и NSE (Рис. 44, 45), соответственно.
Объединяя данные двух вариантов корреляционного анализа, можно отметить, что при включении в группу случаев, имеющих метастазы в лимфатических узлах группы N3, связь с уровнем экспрессии маркёра Ki-67 становится менее значимой, а связь с уровнем экспрессии маркёров NSE, Chromogranin A более значимой, сохраняя знак коэффициента корреляции.
Суммируя полученные данные, можно сделать вывод о слабой взаимосвязи между уровнем проявления инвазивных свойств нейроэндокринных опухолей лёгкого и экспрессией выбранных маркёров, которое тем не менее проявляется во взаимосвязи наличия признаков местной инвазии и сосудистой инвазии с уровнем экспрессии Ki-67, CK-7, CK-18.