Введение 3
1 Обзор современных достижений науки в данной области 6
2 Объекты и методы исследования 11
3 Результаты и обсуждения 14
3.1 Прямое наблюдение взаимодействия ХПС с мицеллами ГВ 14
3.2 Влияние pH среды на защитные свойства ГВ по отношению к ХПС
3.3 Влияние концентрации нативных ГВ на их защитные свойства по отношению к ХПС 16
3.4 Влияние ионной модификации ГВ на их защитные свойства по отношению к ХПС 17
Выводы 20
Литература 21
Приложение А 24
Благодарности 25
Почва - самостоятельным естественно-историческое тело, которое является продуктом совокупной деятельности материнской горной породы, климата, растительных и животных организмов, возраста почвы и рельефа местности [16]. Согласно концепции «почва-память» почва способна сохранять в своих устойчивых твердофазных свойствах информацию об условиях своего формирования [19]. «Расшифровка» этой информации является одной из основных задач современного генетического почвоведения. Однако, вследствие влияния множества факторов, трактовка генезиса почвы представляет из себя комплексную задачу.
В связи с этим, важной задачей становится поиск соединений-индикаторов, которые, наглядно и однозначно отражают направленность протекания элементарных почвообразовательных процессов, длительное время сохраняются в почве, а также легко поддаются лабораторному изучению. Такими веществами являются хлорофиллоподобные соединения (ХПС) и другие родственные им пигменты порфириновой природы. Анализ содержания ХПС используется в палеопочвоведении для оценки сохранности органического вещества и биологической активности [15], а также в современных почвах, как индикатор переувлажнения [20]. Эти вещества легко определяются в почвах даже при незначительном их содержании спектрофотометрическим методом, учитывая, что большинство тетрапиррольных соединений в ацетоновых и спиртовых растворах имеет отчётливый максимум поглощения при 1 = 660 - 670 нм.
Известно, что ХПС в погребённых почвах способны сохраняться до нескольких тысяч лет [11; 14]. В то же время рядом авторов было установлено, что хлорофилл, искусственно внесённый в почву, при нормальных условиях разлагается в течение 30 - 50 дней [2; 5]. Таким образом, механизм сохранения ХПС в почвах является дискуссионным.
Возможно, протекция ХПС обеспечивается солюбилизирующими свойствами ГВ. Солюбилизация - самопроизвольный и обратимый процесс внедрения лиофобных соединений в мицеллы поверхностно-активных веществ (ПАВ). Анализ литературных данных показал, что ГВ, как мицеллярные структуры, обладают солюбилизирующей способностью по отношению к некоторым органическим веществам (например, кубовым красителям, биоцидам, минеральному маслу) [27], [30], [35].
В рамках данной работы была выдвинута гипотеза, что хлорофилл способен сохраняться в почвах не только вследствие низкой биологической активности, но и благодаря специфическим протекторным свойствам мицелл гуминовых веществ (ГВ).
Таким образом, целью исследования было выявление вероятностного механизма сохранения хлорофиллоподобных соединений (ХПС) в мицеллах гуминовых веществ (ГВ).
Для достижения этой цели, были поставлены следующие задачи:
1. Подтвердить возможность солюбилизации ХПС мицеллами ГВ;
2. Доказать протекторную функцию мицелл ГВ по отношению к ХПС;
3. Рассмотреть изменение протекторных свойств ГВ в зависимости от: концентрации ГВ, изменения pH среды, модификации мицелл ГВ различными катионами (Ca2+, Al3+и Fe3+).
По результатам работы были опубликованы статьи:
1) Попов А. И., Панина Е. П., Верлова Т А., Солдатова Л. А., Храпова Е. П. Свойства гуминовых веществ, как коллоидных дисперсий (обзор литературы) // Вестник Российской академии естественных наук. 2014. № 5. С. 39 - 45.
2) Храпова Е., Солдатова Л., Калашников М., Попов А.И. Солюбилизация порфириновых соединений структурированными мицеллами гуминовых веществ // Сб. тезисов / Третья междунар. конф. СНГ МГО по гуминовым инновационным технологиям / Десятая Междунар. конф. daRostim «Гуминовые вещества и другие биологически активные соединения в сельском хозяйстве» / HIT - daRostim - 2014 / 19 - 23 ноября, 2014, МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва, Россия / Под ред. И. В. Перминовой, Н. А. Куликовой и О. С. Якименко. - М., 2014. с. 182.
1. Прямые наблюдения флуоресцентного излучения подтверждают гипотезу о солюбилизации ХПС мицеллами ГВ;
2. Результаты серии тестов, проведенных в рамках исследования, подтвердили защитные свойства ГВ по отношению к ХПС;
3. Концентрация ГВ прямо пропорционально влияет на их защитные свойства по отношению к ХПС;
4. Отмечено резкое увеличение защиты ХПС при превышении концентрации ГВ порога агрегативной неустойчивости. Дальнейшее увеличение концентрации не приводило к сколько ни будь заметному увеличению защиты ХПС;
5. Предельная защита нативными ГВ по отношению к ХПС составила 70%;
6. Наилучшая защита ХПС наблюдается в кислотных условиях, тогда как при щелочных условиях доля защищённых ХПС был значительно ниже. По-видимому, это обусловлено пониженной устойчивостью мицелл ГВ, что может подтверждаться тем фактом, что ГВ в этих вариантах экстрагировались в ацетон.
7. Среди модифицированных ГВ наибольшими защитными свойствами по отношению к ХПС характеризовались ГВ модифицированные трехвалентным железом (уровень защиты приближался к 100%), что может объясняться повышенной устойчивостью мицелл по сравнению с не модифицированными вариантами. ГВ модифицированные алюминием достоверно не отличаются по защитным свойствам от нативных ГВ. ГВ модифицированные кальцием экстрагируются в ацетон и характеризуются пониженной защитой по отношению к ХПС.
1. Engebretson R.R. The effect of molecular size on humic acid associations / R.R.Engebretson, R. Von Wandruszka // Org. Geochem. 1997. V. 26. Is. 11 - 12.P. 759 - 767.
2. Etude de la decomposition de la matiere organique dans le sol au moyen de carbon radioactiv. IV. Decomposition des pigmetnt foliares / Simonart P etc // Plan and soil. - №11. - 1959.
3. Guetzloff T.F. Does humic acid form a micelle? / T.F. Guetzloff, J.A. Rice // Sci. Total Env. 1994. V. 152. P. 31 - 35.
4. Hoyt P Chlorophill - type compounds in soil. I. Their origin // Plant & Soil.1966. Vol. XXV. № 2.
5. Hoyt P Chlorophill - type compounds in soil. II. Their decomposition // Plant & Soil. 1966. Vol. XXVI. № 3.
6. Hoyt P. Chlorophill - type compounds in soil. III. Their significance in arable soil // Plant & Soil. 1967. Vol. XXVI. № 1.
7. Kawahigashi M. Change in Configurations and Surface Active Properties of Humic Acid with Increasing Concentration of NaCl // The Role of Humic Substances in the Ecosystems and in Environmental Protection: Proc. 8thMeeting IHSS / Eds J. Drozd, S.S. Gonet, N. Senesi, J. Weber / M.Kawahigashi, N. Fujitake, T Tsurudome et al.. Wroclaw, Poland: PTSH Polish Society of HS, Polish Chapter of the IHSS, 1997. P 127 - 132.
8. Schnitzer M. Humus Substances: Chemistry and Reactions // Soil Organic Matter / Eds M. Schnitzer, S.U. Khan / Development of Soil Science. N 8 /M. Schnitzer. Ottawa, 1978. P. 1 - 64.
9. Torstensson G. Fluorescence of gyttja soil/ Torstensson G., Eriksson S., Wiklsnder L. // Lantbr Hogsk. Annlr. - 1939. - №7.
10. Tombacz E. Changes of Colloidal State in Aqueous Systems of Humic Acids //Understanding Humic Substances. Advanced Methods, Properties and Applications / Eds E.A. Ghabbour G. Davies / E. Tombacz, J.A. Rice.Cambridge: Royal Society of Chemistry, 1999. P 69 - 78.
11. Vallentyne J.R. Sedimentary chlorophyll determination as a paleobotanical method / Vallentyne J.R. // Can J Bot. - 1955. - No 33. 304 -313.
12. Абакумов Е.В., Попов А.И. Методические указания по оформлению и выполнению письменных работ и статистической обработке результатов научных исследований / Абакумов Е.В., Попов А.И. - Санкт - Петербург: Лема, 2000. - 42 с.
13. Аринушкина Е. В. Руководство по химическому анализу почв: учеб. пособие для вузов / Е. В Аринушкина. 2 - е изд., знач. доп. М.: МГУ, 1970. - 488 с.
14. Бирюкова О.Н., Орлов Д.С. О содержании хлорофилла в современных и погребенных почвах в ископаемых почвах и ископаемых осадках // Изв. АН СССР. Биол.науки. 1978, № 6. 119- 123 с
15. Дергачева М.И. Органическое вещество ископаемых почв / М.И. Дергачева, В.С. Зыкина. - Новосибирск: Наука, 1988. - 129 с.
16. Докучаев В. В Русский чернозём. Популярный очерк // Новь:. - СПб., 1885. - Вып. 18. - С. 194 - 215.
17. Дроздова Т.В. Геохимия органического вещества современных и ископаемых осадков - Автореф. Докт. Дис. М., 1974. - 315 с.
18. Зайдельман Ф.Р., Данилова Г.А. Влияние глееобразования на содержение липидов, хлорофилла, зеленого пигмента и углеводов в дерново - подзолистых почвах. // Биол. науки 1989. Т. 305.
19. Козырев Ф.Н. Почвенный хлорофилл как индикатор переувлажнения почвы / Ф.Н. Козырев.// Доклады ВАСХНИЛ. 1991. № 5.
20. Кононова М.М. Органическое вещество почвы, его природа, свойства и методы изучения / М.М. Кононова. М.: Изд - во АН СССР, 1963. - 314 с.
21. Лактионов Н.И. Гумус как природное коллоидное поверхностно-активное вещество / Н.И. Лактионов. Харьков, 1978. - 25 с.
22. Лиштван И.И. Коллоидная химия и физико-химическая механика торфа: история развития и современные направления исследований / И.И. Лиштван // Природопользование. 2012. Вып. 22. С. 47-56.
23. Мальцева Е.В. Физико-химические свойства гуминовых кислот, модифицированных методом механоактивации каустобиолитов, и их взаимодействие с биоцидами: Автореферат канд. хим. Наук. - Томск, 2010. - 23 с.
24. Орлов Д.С., Гришина Л.А., Ерошичева Н.Л. Практикум по биохимии гумуса. М.: Изд - во МГУ 1969. - 157 с.
25. Орлов Д.С. Химия почв. - М.: МГУ 1985. - 376 с.
26. Память почв: Почва как память биосферно-геосферно-антропосферных взаимодействий. / Отв. ред. В.О. Таргульян, С.В. Горячкин. - М.: URSS. 2008. - 680 с.
27. Погорелова А.С. Разработка теоретических основ применения гуминовых кислот в крашении и печатании тканей кубовыми красителями: Диссертация канд. хим. Наук. - Иваново, 2002. - 193 с.
28. Попов А.И. Коллоидно - химические свойства гуминовых веществ / А.И. Попов, А.Ю. Бурак // Гумус и почвообразование / Сб. науч. трудов С. - Петерб. гос. аграрн. ун - та. — СПб., 1998. С. 26 - 30.
29. Попов А.И. Гуминовые вещества: свойства, строение, образование / Под ред. Е.И. Ермакова / А.И. Попов. СПб.: Изд - во С. - Петерб. ун - та, 2004. - 248 с.
30. Попов А.И. Солюбилизация углеводородов гуминовыми веществами почв // Органическое вещество / Материалы междунар. науч. конф., посвящённой 105 - летию со дня рождения Л. Н. Александровой (21 - 22 ноября 2013 г., Санкт - Петербург). - СПб.: С. - Петерб. гос - й аграрн. ун - т, 2013. С. 24 - 29.
31. Растворова О.Г. Физика почв (практическое руководство) Л.: 1983. - 193 с.
32. Спектрофотометрическое определение в почвах хлорофилла и его производных / Фридланд Е.В. и др. // Биол. науки. - 1975. - №9.
33. Федорос Е.И. Содержание хлорофиллоподобных соединений в профиле почв. На примере почв Европейской части России и Южной Украины: Автореферат канд. с. - х. наук. - Санкт - Петербург, 2000. - 188 с.
34. Фридланд Е.В. Липидная (растворимая в спиртобензоле) фракция органического вещества различных почв / Фридланд Е.В. // Почвоведение. - 1976. - № 10.
35. Фролов Ю.Г. Курс коллоидной химии. Поверхностные явления и дисперсные системы. - М.: Химия, 1988. - 464 с.
36. ГОСТ 17.1.4.02 - 90. Вода. Методика спектрофотометрического определения хлорофилла - Введ. 1991 - 01 - 01. - М.: ФГУП. "СТАНДАРТИНФОРМ", 2010. - 15