Заказать работу


Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


АССОЦИАЦИЯ SNP ГЕНОВ ФАКТОРОВ ИММУННОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМ C НАРУШЕНИЯМИ СПЕРМАТОГЕНЕЗА

Работа №74779
Тип работыДипломные работы, ВКР
Предметбиология
Объем работы61
Год сдачи2019
Стоимость4210 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено 2
Не подходит работа?

Узнай цену на написание

РЕФФЕРАТ 2
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 4
ОГЛАВЛЕНИЕ 5
ВВЕДЕНИЕ 6
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1 Общая характеристика цитокинов 8
1.2 Взаимосвязь цитокинов с процессом сперматогенеза 11
1.3 Активные формы кислорода и сперматогенез 14
1.4 Антиоксидантная система сперматозоидов 17
1.5 Связь цитокинов с окислительным стрессом 21
2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 26
2.1 Материал исследования 26
2.2 Методы исследования 26
2.2.1 Выделение ДНК сорбентным методом 26
2.2.2 Анализ полиморфизма в генах методом аллель-специфичной ПЦР 28
2.2.3 Анализ продуктов амплификации методом горизонтального
электрофореза 29
2.3.3 Методы статистического анализа 31
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 33
3.1 Анализ частот генотипов и аллелей по полиморфизму О1п192Агдгена PON1 33
3.2 Анализ частот генотипов и аллелей по полиморфизму -174О>Сгена IL6 37
3.3 Анализ частот генотипов и аллелей по полиморфизму -308G>Aгена
TNF-a 41
3.4 Анализ межгенного взаимодействия генов иммунной регуляции и
антиоксидантов при нарушениях сперматогенеза 45
ВЫВОДЫ 54
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


В России сохраняется один из самых высоких показателей семейного бесплодия, достигающий примерно 19-20 % от общего количества супружеских пар. В Европе данный показатель составляет около 15 %. Данная ситуация может привести к сокращению численности населения страны в ближайшие десятилетия, именно поэтому проблемы репродуктивного здоровья населения имеют актуальность на данный момент (Калинченко, Тюзиков, 2017). На протяжении многих лет считалось, что бесплодие в большей степени связано с проблемами в репродуктивной системе женщины, однако современные исследования показали, что мужской фактор имеет не менее значимую роль (Долгушина, Глинкина, 2015). В настоящий момент вклад мужского фактора в структуру семейного бесплодия достигает около 50 %.
В числе причин мужского бесплодия рассматриваются (Тавокина, 2014):
1. эндокринные расстройства;
2. иммунологический фактор;
3. нарушения сперматогенеза;
4. факторы внешней среды и т.д.
В настоящее время актуально проводить изучение генетических факторов мужского бесплодия, так как по данным исследований известно, что генетические факторы обусловливают около 30-50 % всех случаев тяжелых форм бесплодия у мужчин (Тавокина, 2014). Сперматогенез является очень сложным биологическим процессом, который регулируется каскадом активации и деактивации определенных генов. В результате работы этих генов происходит процесс созревания сперматозоидов из клеток- предшественников. У человека в процесс регуляции сперматогенеза вовлечено более 2000 генов. По причине генетических нарушений могут возникнуть разные по своей этиологии и степени тяжести формы бесплодия: от незначительных нарушений сперматогенеза до полной дисфункции гонад (Тавокина, 2014). Среди генетических факторов мужского бесплодия выделяются три основные:
1. хромосомные аберрации;
2. генные мутации;
3. дисперсия хроматина и фрагментация ДНК.
Широко распространенные в геноме человека точечные замены одного нуклеотида в цепи ДНК (SNP), как правило, не являются непосредственной и обязательной причиной развития патологического процесса, однако они могут обуславливать больший или меньший риск его развития при действии различных факторов. Именно поэтому при мужском бесплодии актуально применять молекулярно-генетические методы, благодаря которому возможно произвести оценку состояния генетического аппарата у мужчин (Тавокина, 2014).
Таким образом, целью данной работы было изучить ассоциацию полиморфизма генов антиоксидантов, а также генов цитокинов с нарушениями сперматогенеза.
Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
1. исследовать ассоциацию полиморфизма -308G>Aгена TNF-aс нарушениями сперматогенеза;
2. исследовать ассоциацию полиморфизма Gln192Argгена PON1с нарушениями сперматогенеза;
3. исследовать ассоциацию полиморфизма -174G>Cгена IL6с нарушениями сперматогенеза;
4. провести анализ межгенных взаимодействий аллельных вариантов генов PON1, IL6, TNF-aпри нарушениях сперматогенеза.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании студенческих
и аспирантских работ!


1. Однонуклеотидный полиморфизм Gln192Argгена PON1 не
ассоциирован с нарушениями сперматогенеза.
2. Однонуклеотидный полиморфизм -174G>Cгена IL6 не
ассоциирован с нарушениями сперматогенеза.
3. Выявлены статистически значимые различия в частотах аллелей по полиморфизму -308G>Aгена TNF-aсреди мужчин с олигозооспермией и контрольной группой. Для аллели -308Gвыявлена ассоциация с повышенным относительным риском развития олигозооспермии (p=0,04; OR=2,41; CI 1.10 - 5.27).
4. Выявлена тенденция к статистически значимым различиям в распределении частот аллелей по полиморфизму -308G>Aгена TNF-aдля мужчин с астенотератозооспермией по сравнению с контрольной группой (p=0,07).
5. При анализе межгенного взаимодействия исследуемых локусов выявлен генотип высокого риска развития астенотератозооспермии (OR=5,0 (1,13 -22,19; p=0,059, /2=3,57)): -308GG TNF-a/ -174GG IL6/ Gln192Gln PON1.
6. Повышенный риск развития олигозооспермии возможен для генотипа -308GG TNF-a/ -174GC IL6/ Gln192Gln PON1 (p=0,077, /2=3,12; OR=4,14 CI 1,01- 6,18).



1. Айзикович Б. И. и др. Взаимосвязь морфологических нарушений сперматозоидов с уровнем цитокинов семенной плазмы у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке // Медицинская иммунология. - 2008.
- Т. 10, №. 2-3. - С. 203-208.
2. Айзикович Б. И., Антонов А. Р., Устинов Д. В. Взаимосвязь цитокинового и микроэлементного профиля с качеством семенной плазмы // Новосибирский государственный университет. - Новосибирский государственный университет. - 2010 - Т. 8, №4 - С. 76-82.
3. Божедомов В. А. и др. Активные формы кислорода и репродуктивная функция мужчин: фундаментальные и клинические аспекты (обзор литературы) // Андрология и генитальная хирургия. - 2011. - Т. 3. - С. 10-6.
4. Гагулин И. В. и др. Полиморфизм G308A гена фактора некроза опухоли А и депрессия в открытой популяции мужчин 25-64 г. Новосибирска (Эпидемиологическое исследование по программе ВОЗ Monica-psychosocial) // Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. - 2018. - Т. 10, №. 1 - С. 43- 46.
5. Галимов Ш. Н., Галимова Э. Ф., Павлов В. Н. Цитокиновый спектр сыворотки крови и спермоплазмы при идиопатическом бесплодии // Пермский медицинский журнал. - 2012. - Т. 29, №. 6 - С. 58- 63.
6. Дашиев Б.Г. Некоторые закономерности и механизмы нарушений репродуктивной функции у мужчин различных этнических групп в Республике Бурятия: автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Иркутск, 2011. - 26 с.
7. Демяшкин Г. А. и др. Влияние интерлейкинов IL-1A, IL-1 В И IL- 1RA на развитие мужских гамет в норме и при гипосперматозе // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2018. - Т. 13, №. 2 - С. 379 - 382.
8. Долгушина Н. В., Глинкина Ж. И. Оптимизация исходов программ вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с повышенным уровнем анеуплоидии в сперматозоидах: дисс... канд мед наук. - Москва, 2015. - 146 с.
9. Кадагидзе З. Г. онкологический научный центр им. НН Блохина РАМН, Москва // Практическая онкология. - 2003. - Т. 4, №. 3-2003. - С. 131.
10. Калинченко С. Ю., Тюзиков И. А. Окислительный стресс и мужское бесплодие взаимосвязанные пандемии XXI в. Современные фармакотерапевтические возможности патогенетической коррекции нарушений сперматогенеза препаратами L-карнитина/ацетил-Е-карнитина // Эффективная фармакотерапия. - 2017. - №. 22. - С. 6-19.
11. Кидун К. А., Угольник Т. С. Митохондриальная дисфункция сперматозоидов в патогенезе патоспермий при окислительном стрессе (обзор литературы) // Проблемы здоровья и экологии/ - 2013 - Выпуск № 2 (36) — C. 20 - 24.
12. Колесникова Л.И., Баранова Т.А., Первушина О.А. Гены ферментов антиоксидантной системы // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2013. - №12. - С. 83-88.
13. Колпаков И.Е., Афанасьев Д.Е. Системный воспалительный ответ (обзор) // Новые медицинские технологии. — 2003. — № 5-6. — С. 70-75.
14. Коненков В. И. и др. Комбинации полиморфизмов в регуляторных участках генов цитокинов ассоциированы с диабетической ретинопатией у больных сахарным диабетом 2 типа // Бюллетень сибирской медицины. - 2017. - Т. 16, №. 4 - С. 173 - 183.
15. Ломтева С.В. Окислительный стресс и мужская репродуктивная система / Ломтева С.В., Савикина К.Г., Шестель А.Н., Сагамонова К.Ю., Шкурат Т.П. // Валеология. — 2015. — № 1. — С. 59-65.
16. Магеррамов А.М., Алиев И.А., Аскерова У.Ф, Сулейманова Л.М. Магеррамов М.Н. Активные формы кислорода в живых системах. - 2009 - №4 - С. 48.
17. Максимюк А.В., Воробец З.Д. Связь параметров концентрации интерлейкинов с показателями спермограммы // Universum: Химия и биология : электрон. научн. журн. - 2015. - № 5(13).
18. Межирова Н. М., Данилова В. В., Овчаренко С. С. Патофизиологические и диагностические аспекты синдрома системного воспалительного ответа // Медицина неотложных состояний. - 2011. - №. 1. - С32-33.
19. Мещеряков Ю. В., Николаева А. С. Патофизиологические пути развития варикоцелеассоциированного бесплодия // Новое слово в науке и практике: гипотезы и апробация результатов исследований. - 2016. - №. 22. - С. 37-46.
20. Николаев С. М. и др. Свободнорадикальное окисление и скрининг антиоксидантов, адаптогенов с использованием биотест-систем // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2010. - №. 2. - С. 196 - 200.
21. Никулина С. Ю. и др. Роль гена интерлейкина-6 в развитии идиопатического синдрома слабости синусового узла // Российский кардиологический журнал. - 2016. - №. 10 (138). - С. 32-36.
22. Орадова А. Ш., Канжигалина З. К., Касенова Р. К. Лабораторная диагностика цитокинов (обзорная статья) // Вестник Казахского Национального медицинского университета. - 2015. - №. 1 - С. 357 - 359.
23. Останин А. А., Айзикович Б. И., Черных Е. Р. Цитокиновый профиль семенной плазмы человека // Проблемы репродукции. - 2006. - Т. 6. - С. 65-74.
24. Тавокина Л. В. Мужское бесплодие. Генетические аспекты // Почки. - 2014. - №. 2 (08) - С. 9 -13.
25. Устинов Д. В. и др. Нарушения содержания цитокинов в спермальной плазме у мужчин с бесплодием // Современные наукоемкие технологии. - 2014. - №. 12-1 - С. 102.
26. Чанчаева Е. А., Айзман Р. И., Герасев А. Д. Современное представление об антиоксидантной системе организма человека // Экология человека. - 2013 - Выпуск № 7 - С. 50 - 58.
27. Azenabor A., Ekun A. O., Akinloye O. Impact of inflammation on male reproductive tract // Journal of reproduction & infertility. - 2015. - V. 16, №. 3. - P. 123.
28. Badouard C. et al. Determination of new types of DNA lesions in human sperm // Zygote. - 2008. - V. 16, №. 1. - P. 9-13.
29. Blackwell J. M., Zaneveld L. J. D. Effect of abstinence on sperm acrosin, hypoosmotic swelling, and other semen variables // Fertility and sterility. - 1992. - V. 58, №. 4. - P. 798-802.
30. Eggert-Kruse W., Boit R., Rohr G. [et al.] Relationshipof seminal plasma interleukin (IL)-8 and IL-6 with semen quality // Hum. Reprod. — 2001. — V. 16, № 3. — P. 517—528.
31. Fisher H. M., Aitken R. J. Comparative analysis of the ability of precursor germ cells and epididymal spermatozoa to generate reactive oxygen metabolites. - 1997. - V. 277, №. 5. - P. 390-400.
32. Gruschwitz M. S., Brezinschek R., Brezinschek H. P. Cytokine levels in the seminal plasma of infertile males // Journal of Andrology. - 1996. - V. 17, №. 2. - P. 158-163.
33. Haque O. et al. The effect of smoking on male infertility //Male Infertility. - 2014. - P. 19-30.
34. Jeng H. A. C. et al. Semen quality and sperm DNA damage associa- revised-final-finalted with oxidative stress in relation to exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons // Journal of Environmental Science and Health, Part A. - 2018. - V. 53, №. 14. - P. 1221-1228.
35. Ji Guixiang, Gu Aihua, Wang Yubang, Huang Cong, Hu Fan, Zhou Yong, Song Ling, Wang Xinru. Genetic variants in antioxidant genes are associated with sperm DNA damage and risk of male infertility in a Chinese population. Free Radical Biology and Medicine Genetic variants in antioxidant genes are associated with sperm DNA damage and risk of male infertility in a Chinese population // Free Radical Biology and Medicine. - 2012. - V. 52, №. 4. - P. 775-780.
36. Jones R., Mann T., Sherins R. Peroxidative breakdown of phospholipids in human spermatozoa, spermicidal properties of fatty acid peroxides, and protective action of seminal plasma // Fertility and sterility. - 1979. - V. 31, №. 5. - P. 531-537.
37. Jow W. W., Schleger P. N., Cichon Z., Phillips D., Goldstein M., Bardin C. W. Identification and Localization of Copper—Zinc Superoxide Dismutase Gene Expression in Rat Testicular Development // Journal of andrology. - 1993. - V. 14, №. 6. - P. 439-447.
38. Kensler T. W., Wakabayashi N., Biswal S. Cell survival responses to environmental stresses via the Keap1-Nrf2-ARE pathway // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 2007. - V. 47. - P. 89-116.
39. Kogak I., Yenisey Q., Dundar M., Okyay P., Serter M. Relationship between seminal plasma interleukin-6 and tumor necrosis factor a levels with semen parameters in fertile and infertile men // Urological research. - 2002. - V. 30, №. 4. - P. 263-267.
40. Lazaros L. A. et al. Association of paraoxonase gene polymorphisms with sperm parameters // Journal of andrology. - 2011. - V. 32, №. 4. - P. 394¬401.
41. Lewis, S. E., Sterling E. S. L., Young I. S., Thompson, W. Comparison of individual antioxidants of sperm and seminal plasma in fertile and infertile men // Fertility and sterility. - 1997. - V. 67, №. 1. - P. 142-147.
42. Li Qian, Qingxi Shi, Yang Gu [et al.] The relationship between IL-17 and male infertility: semen analysis // African Journal of Microbiology Research. —2012. — V. 6(27). — P. 5672— 5677.
43. Lou-Bonafonte J. M. et al. PON1 and Mediterranean diet //Nutrients.
- 2015. - V. 7, №. 6. - P. 4068-4092.
44. Maegawa M., Kamada M., Irahara M., Yamamoto S., Yoshikawa S., Kasai Y., et al. A repertoire of cytokines in human seminal plasma // J ReprodImmunol. - 2002. - V 54 (1-2) . - P 33- 42.
45. Nakamura B. N. et al. Knockout of the transcription factor NRF2 disrupts spermatogenesis in an age-dependent manner // Free Radical Biology and Medicine. - 2010. - V. 49, №. 9. - P. 1368-1379.
46. Nandipati K.C., Pasqualotto F.F., Thomas A.J., AgarwalJr&A Relationship of interleukin-6 with semen characteristics and oxidative stress in vasectomy reversal patients // Andrologia. — 2005. — V. 37. — P. 131—134.
47. Popko K., Gorska E., Demkow U. Influence of interleukin-6 and G174C polymorphism in IL-6 gene on obesity and energy balance // European journal of medical research. - 2010. - V. 15, №. 2. - P. 123.
48. Sanocka D. et al. Male genital tract inflammation: The role of selected interleukins in regulation of pro-oxidant and antioxidant enzymatic substances in seminal plasma // Journal of andrology. - 2003. - V. 24, №. 3. - P. 448-455.
49. Shimoya K. Matsuzaki N, Tsutsui T, Taniguchi T, Saji F, Tanizawa: Detection of interleukin-8 (IL-8) in seminal plasma and elevated IL-8 in seminal plasma of infertile patients with leukospermia // Fertil Steril. - 1993 - V. 59. - P. 885-888.
50. Shukla K. K. et al. Significant association of TNFa and IL-6 gene with male infertility—An explorative study in Indian populations of Uttar Pradesh // Immunology letters. - 2013. - V. 30-37, №. 1-2. - P. 156.
51. Suleiman S. A. et al. Lipid peroxidation and human sperm motility: protective role of vitamin E // Journal of andrology. - 1996. - V. 17, №. 5. - P. 530-537.
52. Tavilani H. et al. Genotype and phenotype frequencies of paraoxonase 1 in fertile and infertile men // Systems biology in reproductive medicine. - 2014.
- V. 60, №. 6. - P. 361-366.
53. Tronchon V. et al. Tumor necrosis factor-alpha- 308 polymorphism in infertile men with altered sperm production or motility // Human reproduction. -
2008. - V. 23, №. 12. - P. 2858-2866.
54. Yu B., Huang Z. Variations in antioxidant genes and male infertility // BioMed research international. - 2015. - V. 2015 - 10 pages.
55. Zini A., Lamirande E., Gagnon C. Reactive oxygen species in semen of infertile patients: levels of superoxide dismutase-and catalase-like activities in seminal plasma and spermatozoa // International journal of andrology. - 1993. - V. 16, №. 3. - P. 183-188.
56. Zini A., San Gabriel M., Baazeem A. Antioxidants and sperm DNA damage: a clinical perspective // Journal of assisted reproduction and genetics. -
2009. - V. 26, №. 8. - P. 427-432.
57. Zini A., Schlegel P. N. Catalase mRNA expression in the male rat reproductive tract // Journal of andrology. - 1996. - V. 17. - P. 473 - 480.
58. Zini A., Schlegel P. N. Expression of glutathione peroxidases in the adult male rat reproductive tract // Fertility and sterility. - 1997. - V. 68, №. 4. - P. 689-695.
59. Zini A., Schlegel P. N. Identification and characterization of antioxidant enzyme mRNAs in the rat epididymis // International journal of andrology. - 1997. - V. 20, №. 2. - P. 86-91.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.

Пожалуйста, укажите откуда вы узнали о сайте!



© 2008-2021 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.