Введение
Глава 1. Литературный обзор
1. Хронический генерализованный пародонтит 8
2. Этиология и патогенез воспалительных заболеваний пародонта 8
3. Микробиота полости рта и воспалительные заболевания
пародонта 17
3.1. Нормальная микробиота полости рта 17
3.2. Микробиота пародонтального кармана при хроническом
генерализованном пародонтите 18
3.3. Факторы вирулентности пародонтопатогенов 19
Глава 2. Материалы и методы исследования
4. Клиническая характеристика пациентов 30
5. Клинико-рентгенологическое обследование пациентов 31
6. Микробиологические методы исследования
6.1. Забор материала 37
6.2. Конструирование олигонуклеотидных праймеров 37
6.3. Выделение тотальной ДНК из исходного биологического
материала 39
6.4. Полимеразная цепная реакция 39
6.5. Электрофорез фрагментов ДНК 40
6.6. Компьютерный анализ 40
Глава 3.Результаты исследований
7. Результаты клинических исследований 41
8. Результаты рентгенологического исследования 48
9. Результаты микробиологического исследования 49
Заключение и выводы
Заключение 55
Выводы 58
Практические рекомендации 59
Список литературы 60
Приложения 64
В настоящее время среди стоматологических заболеваний одно из ведущих мест занимают воспалительные заболевания пародонта (ВЗП).
Обращаемость населения с заболеваниями пародонта существенно возросла за последнее десятилетие и достигла 64% от общего амбулаторного приема [Курякина Н. В., 2007; Янушевич О. О., 2009; Леонова Л. Е., 2008]. По данным ВОЗ, заболевания пародонта тяжелой степени выявляются у 5-25% взрослого населения, средней степени — у 30-45% и только 2-8% людей имеют здоровые ткани пародонта в возрасте 35-45 лет. Показатели заболеваемости пародонтитом, одной из широко распространенных стоматологических патологий, на сегодняшний день имеют тенденцию к увеличению. [Меньшикова Ю. В., 2011; Грудянов А. И., 2006; Воронина А. И., 2010]
В последние годы сложилось представление о том, что бактериальный состав микробиоты является одним из ведущих пусковых факторов развития и прогрессирования ВЗП. Многими авторами показана полиэтиологическая природа заболеваний пародонта, причем большая роль в их развитии принадлежит воспалительным реакциям, спровоцированным микробиотой полости рта [Грудянов А. И., Овчинникова В. В., 2007; Пузин М. Н. и др., 2008; Прикулс В. Ф. и др., 2008; Цепов Л. М., и др., 2010; Леонтьев А. А., 2010]. В связи с этим исследование микробиологических факторов патогенеза ВЗП следует признать одной из актуальных проблем современной стоматологии.
Согласно данным ВОЗ (1998), среди анаэробных микроорганизмов ротовой полости выделяют некоторые, которые в отношении пародонта обладают высокими адгезивными, инвазивными и токсиче скими свойствами, их относят к группе пародонтопатогенных микроорганизмов. К ним относят: Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Treponema denticola, Tannerella forsythia, Actinobacillus actinomycetemcomitans и др. [Царев В.Н., 2004; Грудянов А. И. и др., 2004]
Таким образом, выявление пародонтопатогенов является необходимым диагностическим мероприятием для осуществления планирования комплексного лечения ВЗП, проведения антибактериальной терапии, прогнозирования течения заболевания.
Широкая распространенность ВЗП, неуклонно прогрессирующее течение воспалительного процесса в тканях пародонта, приводящее к утрате зубов, недостаточная эффективность лечения и профилактики обуславливают важность и значимость изучения качественного состава микробиоты пародонтальных карманов. [Грудянов А. И., Овчинникова В. В., 2007; Пузин М. Н. и др., 2008; Прикулс В. Ф. и др., 2008; Цепов Л. М., и др., 2010; Леонтьев А. А., 2010]
Цель исследования:
Оценка качественного состава микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) легкой, средней и тяжелой степени тяжести.
Задачи исследования:
1. Изучить особенности стоматологической заболеваемости пациентов с ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести.
2. Изучить качественный состав микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести.
3. На основе оценки клинического и микробиологического статуса выявить возможную взаимосвязь воспалительных изменений в тканях пародонта и изменения микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с ХГП различной степени тяжести.
Научная новизна работы:
Проведена оценка микробиоты пародонтальных карманов пациентов с ХГП различной степени тяжести и пациентов без патологии пародонта. Проведен ПЦР - скрининг на пародонтопатогены и определены Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola и Prevotella intermedia.
Практическая значимость исследования:
Проведенное исследование позволило оценить р азличия в микробиологическом статусе пациентов с ХГП различной степени тяжести и пациентов без патологии пародонта, рекомендовать идентификацию пародонтопатогенных микроорганизмов для планирования лечения ХГП различной степени тяжести. Оценка микробиоты пародонтальных карманов позволит увеличить эффективность патогенетической терапии ХГП.
1. Особенности клинической и рентгенологической картины пациентов с ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести соответствовали общепринятым критериям: были выявлены пародонтальные карманы, наблюдалась клиническая потеря прикрепления, деструкция костной ткани соответственно степени тяжести ХГП; все пациенты с ХГП жаловались на кровоточивость, отек и воспаление десен. Значения всех индексов гигиены у пациентов с ХГП свидетельствуют о связи ХГП легкой, средней и тяжелой степени тяжести с неудовлетворительным уровнем гигиены полости рта.
2. ПЦР-исследование продемонстрировало обнаружение P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola и P. intermedia в пародонтальных карманах у 96% пациентов с ХГП легкой, средней и тяжелой степенью тяжести при полном отсутствии перечисленных пародонтопатогенов у пациентов без воспалительных заболеваний пародонта. P. gingivalis оказался на первом месте по частоте встречаемости среди исследованных пародонтопатогенов у пациентов с ХГП средней и тяжелой степенью тяжести.
3. Воспалительные изменения в тканях пародонта в процессе развития ХГП из легкой в тяжелую степень сопровождаются снижением о бнаружения одиночных пародонтопатогенов одновременно с возрастающей тенденцией образования их в различные комплексы. Исключительно у пациентов с тяжелой степенью ХГП выявляли комплекс из всех четырех вышеупомянутых пародонтопатогенов.
Практические рекомендации:
При планировании лечения ХГП различной степени тяжести следует учитывать особенности стоматологического статуса пациента и особенности микробиоты пародонтальных карманов у пациента.
Помощь студентам и аспирантам в выполнении работ от наших партнеров
