Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
ℹ️Настоящий учебно-методический информационный материал размещён в ознакомительных и исследовательских целях и представляет собой пример учебного исследования. Не является готовым научным трудом и требует самостоятельной переработки.
Введение 3
1. Обзор литературы «Микобактерии в замкнутых системах очистки и распределения воды»
1.1. Таксономическое положение, классификация и идентификация микобактерий
1.2. Биологические свойства микобактерий 6
1.2.1 Структурные особенности клеточной стенки
микобактерий
1.2.2. Физиологические особенности и места обитания
микобактерий, оценка их численности
1.2.3. Бактериальные биоплёнки с участием микобактерий 13
1.2.4. Микобактерии в симбиозе с Protozoa 16
1.3 Условно-патогенные микобактерии и их участие в патогенезе у людей и гидробионтов
1.3.1. Условно-патогенные микобактерии, вызывающие
заболевания у гидробионтов
1.3.2. Условно-патогенные микобактерии, вызывающие
заболевания у людей
1.4. Современные представления об эффективности санации водных систем в отношении условно-патогенных микобактерий
2. Материалы и методы 29
2.1. Объект исследования 29
2.2. Окраска бактериальных мазков на кислото-спиртоустойчивость 31
2.3. Методики проведения идентификационных тестов 31
3. Результаты и их обсуждение
3.1. Оценка численности микобактерий в исследованных образцах 38
3.2. Определение оптимального времени оценки
кислото-спиртоустойчивости для бактериальных штаммов
3.3. Идентификация штаммов микобактерий 40
3.4. Заключение 44
4. Выводы 45
5. Список литературы 46
📖 Введение
В настоящее время всё большое внимание уделяется микробиологическим рискам, связанным с аквакультурой, то есть с искусственным разведением гидробионтов (рыб, ракообразных, моллюсков и др.). Современные объекты аквакультуры все чаще конструируются с замкнутым оборотом воды, её фильтрацией и санацией. На таких объектах создаются условия для формирования специфических биоценозов, в первую очередь, микробиоценоза биофильтров и различных типов обрастаний, включающих как автотрофных, так и гетеротрофных микроорганизмов. Появляется все больше литературных данных о присутствии в подобных биоценозах патогенных и условно-патогенных бактерий, в частности микобактерий, способных повлиять на здоровье объектов аквакультуры и обслуживающего персонала. Ежегодно регистрируется рост количества случаев заболеваний кожи, лимфатических сосудов, легочных и генерализованных инфекций, вызванных у людей нетуберкулезными микобактериями.
Широкому распространению и накоплению микобактерий в замкнутых водных системах с дезинфекцией воды способствует специфическое строение оболочки микобактерий. В ней содержатся гидрофобные миколовые кислоты, снижающие чувствительность микобактерий к дезинфекции, облегчающие их прикрепление к твёрдым поверхностям и последующее образование биоплёнок. Таким образом, на объектах аквакультуры и крупнотоннажной аквариумистике актуально изучать присутствие микобактерий не только в воде, но и в грунте, на водных растения, конструкционных элементах, обрастаниях на стенках и в биофильтрах.
В научной литературе имеются ограниченные данные о содержании микобактерий в водных образцах. Недостатком этих исследований является отсутствие эффективного метода выявления микобактерий и отработанного общепризнанного алгоритма проведения этапов их выявления (Falkinham, 2009).
На кафедре микробиологии СПбГУ на протяжении нескольких последних лет исследуется персистенция санитарно-показательных и условно-патогенных бактерий в водных системах с рециркуляцией санируемой воды на примере крупнотоннажных аквариумов Санкт-Петербургского океанариума. Ранее нами была проведена предварительная оценка содержания микобактерий в воде одного из пресных аквариумов, она составила не менее 10 КОЕ/мл воды (Шакирова, 2016). Был предложен алгоритм выявления этих бактерий из водных образцов. На этом этапе было выделено 3 первых штамма водных условно-патогенных микобактерий.
В соответствии с вышеизложенной целью данной работы было выявление и оценка численности микобактерий в воде и обрастаниях пресноводного крупнотоннажного аквариума Санкт-Петербургского Океанариум, выделение и идентификация новых штаммов микобактерий. Для достижения постановленной цели были сформулированы следующие задачи:
1. Оценить численность микобактерий в воде и обрастаниях пресноводного аквариума № 4. Сформировать коллекцию штаммов микобактерий.
2. Определить оптимальное время оценки кислото-спиртоустойчивости для выделенных штаммов при оценке их численности.
3. Провести идентификацию штаммов микобактерий в коллекции по фенотипическим признакам.
✅ Заключение
Таким образом, предлагаемый нами алгоритм оценки численности микобактерий из воды и обрастаний с помощью прямого высева на неселективную среду Lowenstein-Jensen с желточной эмульсией и скрининг клонов на кислото-спиртоустойчивость в сочетании с тестом на арилсульфатазу оказался успешным.
Установленное нами содержание микобактерий в воде и обрастаниях - 1,1 х 103 КОЕ/ мл воды и 2,3 х 107 КОЕ/г сырого веса обрастаний выше имеющихся на сегодняшний день данных о количественном содержании микобактерий в пресной воде из разных типов водных объектов (Fischeder et al., 1991; Le Dantec et al., 2002; Шакирова, 2016).
Все очищенные и идентифицированные штаммы микобактерий представлены следующими видами: M. porcinum, M. abscessus, M. smegmatis, M. senegalense, M. salmonifilum.
Все выделенные штаммы микобактерий относятся к условно-патогенным видам, опасным для персонала и гидробионтов. Основным источником этих микобактерий являются обрастания, в которых микобактерии находятся в прикреплённом состоянии в составе биоплёнок, что делает их устойчивыми в отношении дезинфицирующих воздействий.
Важно отметить, что виды M. porcinum, M. abscessusи M. salmonifilumранее нами были выделены из воды другого аквариума (№ 19). Это может указывать на значительное распространение данных видов микобактерий в пресноводных аквариумах Океанариума.