ВВЕДЕНИЕ 6
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1. Свободнорадикальные процессы: общие представления, роль в организме в
норме и при патологических состояниях 8
1.1.1. Понятие о свободных радикалах и их источниках в организме 8
1.1.2. Общая характеристика активных форм кислорода 9
1.1.3. Антиоксидантная система организма 11
1.2. Аконитатгидратаза: характеристика, роль в организме, превращения
цитрата 14
1.3. Изменения метаболизма в клетках сердца при ишемии 15
1.3.1. Понятие об ишемической болезни сердца 15
1.3.2. Патобиохимия ишемической болезни сердца 17
1.3.3. Молекулярно-биологические аспекты развития 19
1.4. Сукцинат: общая характеристика и применение в медицине 21
1.5. Хитозан 23
Глава 2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 27
2.1. ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ 27
2.2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 28
2.2.1. Объект исследования 28
2.2.2. Создание модели повреждения сердца и способы введения протектора 28
2.2.3. Методы исследования 29
2.2.3.1. Получение сыворотки крови и гомогената сердца крыс 29
2.2.3.2. Оценка активности аспартатаминотрансферазы 29
2.2.3.3. Оценка активности креатинкиназы-МВ в сыворотке крови 31
2.2.3.4. Определение параметров биохемилюминесценции 32
2.2.3.5. Определение активности аконитазы 32
2.2.3.6. Определение содержание общего белка 33
2.2.3.7. Определение содержания цитрата по методу Нательсона 34
2.2.3.8. Статистическая обработка данных 35
2.3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 37
2.3.1. Влияние сукцината хитозана на маркерные показатели повреждения
кардиомиоцитов 37
2.3.2. Параметры биохемилюминесценции в тканях крыс при воздействии
сукцината хитозана на фоне повреждения миокарда, вызванного изопротеренолом 40
2.3.3. Исследование активности аконитазы и содержания цитрата в сыворотке
крови и миокарде крыс при введении сукцината хитозана на фоне повреждения миокарда 49
ВЫВОДЫ 57
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
Высокий уровень заболеваемости и смертности от болезней системы кровообращения в значительной мере обусловлен широкой распространенностью ишемической болезни сердца (ИБС) [20]. Согласно статистическим данным, распространенность ИБС в Российской Федерации составляет 13,5%, в США этот показатель почти в 2 раза ниже. По прогнозам, распространенность ИБС к 2030 г. увеличится на 9,3%, затраты на лечение и реабилитацию больных возрастут на 198% по сравнению с таковыми в 2010 г., что свидетельствует о росте значимости данной причины смертности и потери трудоспособности населения [16].
Согласно определению Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), под ИБС понимают заболевание сердечной мышцы, которое обусловлено нарушением равновесия между коронарным кровотоком и метаболическими потребностями сердечной мышцы, точнее, кардиомиоцитов [9]. Установлено, что одним из ведущих механизмов ишемического повреждения миокарда является окислительный стресс (ОС) на фоне снижения активности ферментативного и неферментативного звена антиоксидантной системы (АОС), высокого содержания атерогенных липидов и токсических продуктов их окисления, накопления в митохондриях промежуточных продуктов цикла трикарбоновых кислот. Последующая реперфузия сопровождается усилением процессов
свободнорадикального окисления и угнетением деятельности миокарда за счёт пероксидного окисления накопившихся промежуточных продуктов энергетической цепи [30].
В этой связи в терапии ИБС и острого инфаркта миокарда особый интерес представляет использование веществ с антиоксидантной активностью. Перспективными терапевтическими агентами здесь представляются производные сукцината и хитозана. Сукцинат (янтарная кислота) - универсальный клеточный метаболит. Хорошо известны антигипоксические свойства данного соединения, сопряженные с его способностью усиливать в тканях утилизацию кислорода, восстанавливать НАД-зависимое дыхание, интенсифицировать ресинтез АТФ.
Также известно о положительном воздействии препаратов янтарной кислоты на свободнорадикальный гомеостаз при различных патологиях . Хитозан (поли-(1,4)- 2-амино-2-дезокси-0-0-глюкоза) - производное хитина, также обладает широким спектром активности, в том числе и антиоксидантной [14].
В связи с вышесказанным, целью данной работы явилась оценка воздействия сукцината хитозана на свободнорадикальные процессы в тканях крыс с экспериментальным ишемическим повреждением миокарда.
1. При введении сукцината хитозана на фоне изопротеренол- индуцированного повреждения миокарда наблюдалось снижение активности аспартатаминотрансферазы и креатинкиназы-МВ в сыворотке крови крыс по сравнению с патологией, что указывает на снижение степени цитолиза кардиомиоцитов и свидетельствует о наличии кардиопротекторных свойств у компанентов данного соединения.
2. В тканях крыс с повреждением миокарда, которым вводили исследуемое соединение, отмечалось изменение параметров БХЛ, характеризующих интенсивность свободнорадикальных процессов (S и Imax) и общую антиоксидантную активность (tga2), в сторону контрольных значений, что свидетельствует о возможности проявления сукцинатом хитозана антиоксидантных свойств, направленных на подавление чрезмерной продукции АФК при патологии миокарда.
3. Воздействие сукцината хитозана сопровождалось изменением в сторону контрольных значений активности аконитатгидратазы и содержания цитрата в тканях экспериментальных животных с изопротереноловым инфарктом миокарда.
4. Полученные результаты указывают на способность сукцината хитозана оказывать протекторное действие и позитивное регулирующее воздействие на свободнорадикальный гомеостаз, снижая степень проявления оксидативного стресса при повреждении миокарда, индуцированном введением изопротеренола.
