ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАДПОЧЕЧНИКОВ И ЯИЧНИКОВ КРЫС В ПОЗДНЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ЭТИЛМЕТИЛГИДРОКСИПИРИДИНА СУКЦИНАТА
|
ВВЕДЕНИЕ 6
1. Литературный обзор 9
1.1. Периодизация онтогенеза серой крысы (Rattus norvegicus) 9
1.2. Возрастные изменения крыс линии «Wistar» 10
1.3. Свойства этилметилгидроксипиридина сукцината (препарат «Мексидол»)
1.4. Строение, функции и возрастные изменения надпочечников крыс 15
1.5. Строение, функции и возрастные изменения яичников крыс 19
2. Материалы и методы исследования 29
2.1. Характеристика тест-объекта 29
2.2. Схема эксперимента 29
2.3. Гистологический анализ органов исследования 30
2.4. Определение содержания кортикостерона в сыворотке крови 33
2.5. Статистическая обработка данных 34
2.6. Авторский вклад 35
3. Результаты и их обсуждение 36
3.1. Гистологическая характеристика надпочечников крыс в позднем онтогенезе под воздействием этилметилгидроксипиридина сукцината 36
3.2. Гистологическая характеристика яичников крыс в позднем онтогенезе под воздействием этилметилгидроксипиридина сукцината 43
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 48
ВЫВОДЫ 49
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 50
ПРИЛОЖЕНИЕ А 55
ПРИЛОЖЕНИЕ Б 56
ПРИЛОЖЕНИЕ В 57
ПРИЛОЖЕНИЕ Г 58
ПРИЛОЖЕНИЕ Д 59
ПРИЛОЖЕНИЕ Е
1. Литературный обзор 9
1.1. Периодизация онтогенеза серой крысы (Rattus norvegicus) 9
1.2. Возрастные изменения крыс линии «Wistar» 10
1.3. Свойства этилметилгидроксипиридина сукцината (препарат «Мексидол»)
1.4. Строение, функции и возрастные изменения надпочечников крыс 15
1.5. Строение, функции и возрастные изменения яичников крыс 19
2. Материалы и методы исследования 29
2.1. Характеристика тест-объекта 29
2.2. Схема эксперимента 29
2.3. Гистологический анализ органов исследования 30
2.4. Определение содержания кортикостерона в сыворотке крови 33
2.5. Статистическая обработка данных 34
2.6. Авторский вклад 35
3. Результаты и их обсуждение 36
3.1. Гистологическая характеристика надпочечников крыс в позднем онтогенезе под воздействием этилметилгидроксипиридина сукцината 36
3.2. Гистологическая характеристика яичников крыс в позднем онтогенезе под воздействием этилметилгидроксипиридина сукцината 43
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 48
ВЫВОДЫ 49
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 50
ПРИЛОЖЕНИЕ А 55
ПРИЛОЖЕНИЕ Б 56
ПРИЛОЖЕНИЕ В 57
ПРИЛОЖЕНИЕ Г 58
ПРИЛОЖЕНИЕ Д 59
ПРИЛОЖЕНИЕ Е
Продолжительность жизни, активное долголетие являются важнейшими показателями состояния здоровья и, сопровождающих онтогенез, возрастных изменений всех живых организмов. Причины, определяющие продолжительность жизни, весьма разнообразны, и могут быть вызваны внешними и внутренними факторами. К первой группе относится ряд воздействия на организм из внешней среды, которые приводят к возрастным изменениям. Например, продукты питания, образ жизни, социальное окружение и т.д. Вторую группу составляют причины, связанные с наследственностью индивида, его генов, контролирующих программу индивидуального развития. К ним можно отнести затухание синтеза, ослабление регуляции генов, отравление продуктами метаболизма, мутации и другие (Мартынов, 2003). Согласно современным представлениям под возрастными изменениями или старением понимают происходящее с возрастом замедление, угнетение и утрату физиологических функций организма, которое сопровождается повышенной частотой онкологических и дегенеративных заболеваний (Анисимов, 2008).
Внутренние органы и мягкие ткани как возможные объекты для определения возрастной изменчивости длительное время критически оценивались многими исследователями. Однако широкое внедрение микрометрических (количественных) методик в исследования морфологии позволило определить значимые признаки структурных компонентов внутренних органов, выраженные в цифровом эквиваленте, которые объективно отображают изменения, происходящие с увеличением количества прожитых лет (Алексеев, 2016).
Особый интерес представляет исследование надпочечников и анализ их адаптивных изменений при старении организма, поскольку их адекватное функционирование обеспечивает целостное взаимодействие ряда систем и определяет приспособительные возможности организма в условиях возрастной изменчивости и повреждения структурных компонентов ткани (Колдышева, 2008). Не менее важна и половая система организма, а конкретнее ее центральное звено - гонады. Проблема преждевременного истощения овариального резерва, а также возможность возобновления запаса герминогенных клеток в постнатальном периоде является актуальной в настоящее время в связи с тем, что многие женщины откладывают рождение ребенка на поздний репродуктивный период и сталкиваются с ситуацией невозможности зачатия (Зенкина, 2014). Есть основания думать, что работа вышеперечисленных желез обусловлена межэндокринными отношениями гипоталамо-гипофизарно-гонадной (ГГГС) и гипоталамо-гипофизарно- надпочечниковой систем (ГГНС) (Басенко, 1999).
К настоящему времени накоплен достаточный материал по изменению морфологических и функциональных характеристик надпочечников при старении организма. Исследователи акцентируют свое внимание на выяснении тонких механизмов, приводящих к развитию возрастных изменений, а также их коррекции, поскольку именно надпочечники участвуют в приспособительных возможностях организма и метаболизм углеводов и белков (Юссеф, 2007). В противоположность надпочечникам возрастная морфологическая инволюция женских половых органов среди прочих других исследована в меньшей степени. В ряде работ рассматриваются процессы старения женских половых органов с позиций функциональных изменений под влиянием гормонов, но анализ количественных морфологических характеристик женской половой системы при возрастных изменениях отсутствует (Алексеев, 2016).
Изучение данных процессов важно для понимания механизмов старения, а также его коррекции, особенно в связи с увеличением частоты встречаемости болезней пожилого возраста у более молодых лиц, а также, мировой демографической ситуацией. Для коррекции возрастных изменений существуют разные методы. Например, такие как фармакологическая, клеточная терапии, генная, озонотерапия, фитотерапия и другие. Медицинское применение препарата «этилметилгидроксипиридина сукцинат» было разрешено с 1996 г. в качестве антиоксидантного средства для лечения острых нарушений мозгового кровообращения, дисциркуляторной энцефалопатии, сосудистой дистонии, атеросклеротических нарушений функций мозга, невротических и неврозоподобных расстройств с проявлением тревоги у пациента, а также острой интоксикации нейролептиками (Воронина, 2016). Такие патологии, зачастую, выявляются в позднем онтогенезе, и их коррекция уже возможна с помощью фармакологических препаратов. В связи с этим этилметилгидроксипиридин сукцинат подходит в качестве Исходя из имеющихся данных, этот препарат ранее не испытывался как геронтологический препарат.
Целью настоящей работы является изучение гистологических особенностей надпочечников и яичников крыс линии «Wistar» поздних этапов онтогенеза при использовании этилметилгидроксипиридина сукцината
Исходя из этого, для достижения указанной цели на разрешение были поставлены следующие задачи:
1. Провести сравнительную оценку морфологических параметров надпочечников крыс поздних этапов онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия;
2. Оценить состояние адренокортикоцитов надпочечников животных на поздних этапах онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия.
3. Сопоставить полученные гистологические данные с уровнем кортикостерона в плазме крови животных на поздних этапах онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия.
4. Оценить состояние яичников крыс поздних этапов онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия путём сравнения соотношения овариальных фолликулов.
Внутренние органы и мягкие ткани как возможные объекты для определения возрастной изменчивости длительное время критически оценивались многими исследователями. Однако широкое внедрение микрометрических (количественных) методик в исследования морфологии позволило определить значимые признаки структурных компонентов внутренних органов, выраженные в цифровом эквиваленте, которые объективно отображают изменения, происходящие с увеличением количества прожитых лет (Алексеев, 2016).
Особый интерес представляет исследование надпочечников и анализ их адаптивных изменений при старении организма, поскольку их адекватное функционирование обеспечивает целостное взаимодействие ряда систем и определяет приспособительные возможности организма в условиях возрастной изменчивости и повреждения структурных компонентов ткани (Колдышева, 2008). Не менее важна и половая система организма, а конкретнее ее центральное звено - гонады. Проблема преждевременного истощения овариального резерва, а также возможность возобновления запаса герминогенных клеток в постнатальном периоде является актуальной в настоящее время в связи с тем, что многие женщины откладывают рождение ребенка на поздний репродуктивный период и сталкиваются с ситуацией невозможности зачатия (Зенкина, 2014). Есть основания думать, что работа вышеперечисленных желез обусловлена межэндокринными отношениями гипоталамо-гипофизарно-гонадной (ГГГС) и гипоталамо-гипофизарно- надпочечниковой систем (ГГНС) (Басенко, 1999).
К настоящему времени накоплен достаточный материал по изменению морфологических и функциональных характеристик надпочечников при старении организма. Исследователи акцентируют свое внимание на выяснении тонких механизмов, приводящих к развитию возрастных изменений, а также их коррекции, поскольку именно надпочечники участвуют в приспособительных возможностях организма и метаболизм углеводов и белков (Юссеф, 2007). В противоположность надпочечникам возрастная морфологическая инволюция женских половых органов среди прочих других исследована в меньшей степени. В ряде работ рассматриваются процессы старения женских половых органов с позиций функциональных изменений под влиянием гормонов, но анализ количественных морфологических характеристик женской половой системы при возрастных изменениях отсутствует (Алексеев, 2016).
Изучение данных процессов важно для понимания механизмов старения, а также его коррекции, особенно в связи с увеличением частоты встречаемости болезней пожилого возраста у более молодых лиц, а также, мировой демографической ситуацией. Для коррекции возрастных изменений существуют разные методы. Например, такие как фармакологическая, клеточная терапии, генная, озонотерапия, фитотерапия и другие. Медицинское применение препарата «этилметилгидроксипиридина сукцинат» было разрешено с 1996 г. в качестве антиоксидантного средства для лечения острых нарушений мозгового кровообращения, дисциркуляторной энцефалопатии, сосудистой дистонии, атеросклеротических нарушений функций мозга, невротических и неврозоподобных расстройств с проявлением тревоги у пациента, а также острой интоксикации нейролептиками (Воронина, 2016). Такие патологии, зачастую, выявляются в позднем онтогенезе, и их коррекция уже возможна с помощью фармакологических препаратов. В связи с этим этилметилгидроксипиридин сукцинат подходит в качестве Исходя из имеющихся данных, этот препарат ранее не испытывался как геронтологический препарат.
Целью настоящей работы является изучение гистологических особенностей надпочечников и яичников крыс линии «Wistar» поздних этапов онтогенеза при использовании этилметилгидроксипиридина сукцината
Исходя из этого, для достижения указанной цели на разрешение были поставлены следующие задачи:
1. Провести сравнительную оценку морфологических параметров надпочечников крыс поздних этапов онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия;
2. Оценить состояние адренокортикоцитов надпочечников животных на поздних этапах онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия.
3. Сопоставить полученные гистологические данные с уровнем кортикостерона в плазме крови животных на поздних этапах онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия.
4. Оценить состояние яичников крыс поздних этапов онтогенеза при использовании фармакологической терапии и без воздействия путём сравнения соотношения овариальных фолликулов.
При гистологическом исследовании надпочечников крыс, получавших этилметилгидроксипиридина сукцинат, по сравнению с интактными, выявлена гипотрофия коркового вещества за счет уменьшения пучковой зоны. Такое изменение ширины пучковой зоны происходит за счет уменьшения площади ядер и самих адренокортикоцитов этой зоны. Сетчатая зона в надпочечниках крыс опытной группы в сравнении с интактными животными, отличается большими размерами. Уровень кортикостерона в сыворотке крови животных, получавшей препарат «Мексидол», меньше, по сравнению с интактной группой.
При гистологическом исследовании яичников крыс было установлено, что у крыс опытной группы количество растущих, а именно первичных однослойных, первичных многослойных и вторичных многослойных фолликул, больше в сравнении с интактной группой животных.
В связи с неспецифичностью и множественностью оказываемых действий этилметилгидроксипиридина сукцината наблюдаемые изменения надпочечников и яичников можно объяснить несколькими вариантами.
Во-первых, на фоне приема препарата, возможно, произошло изменение рецепторных комплексов мембран мозга, что, вероятно, привело к повышению качества передачи нейрогуморальных сигналов. Но поскольку не осуществлялся и не предвидится анализ состояния гипофиза, точно утверждать мы не можем.
Во-вторых, воздействие препарата на стресс-реализующую и репродуктивную системы может быть связано с непосредственным влиянием этилметилгидроксипиридина сукцината на мембранные комплексы клеток надпочечников и яичников.
Третья причина изменений надпочечника и яичника может быть связана с комплексным воздействием «Мексидола» на организменном уровне. Это, в свою очередь, могло бы повлиять на состояние исследуемых желез.
Помимо предполагаемых перечисленных причин наблюдаемых эффектов воздействия препарата существует ряд других.
При гистологическом исследовании яичников крыс было установлено, что у крыс опытной группы количество растущих, а именно первичных однослойных, первичных многослойных и вторичных многослойных фолликул, больше в сравнении с интактной группой животных.
В связи с неспецифичностью и множественностью оказываемых действий этилметилгидроксипиридина сукцината наблюдаемые изменения надпочечников и яичников можно объяснить несколькими вариантами.
Во-первых, на фоне приема препарата, возможно, произошло изменение рецепторных комплексов мембран мозга, что, вероятно, привело к повышению качества передачи нейрогуморальных сигналов. Но поскольку не осуществлялся и не предвидится анализ состояния гипофиза, точно утверждать мы не можем.
Во-вторых, воздействие препарата на стресс-реализующую и репродуктивную системы может быть связано с непосредственным влиянием этилметилгидроксипиридина сукцината на мембранные комплексы клеток надпочечников и яичников.
Третья причина изменений надпочечника и яичника может быть связана с комплексным воздействием «Мексидола» на организменном уровне. Это, в свою очередь, могло бы повлиять на состояние исследуемых желез.
Помимо предполагаемых перечисленных причин наблюдаемых эффектов воздействия препарата существует ряд других.