ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 Атомно-силовой микроскоп (АСМ) и его применение в изучении
топографии солевых растворов 5
1.2 Фосфорорганическое соединение: Димефосфон 10
1.3Светорассеяние 13
1.4 Динамическое рассеяние света 14
1.5 Гомо и гетеродинирование 16
1.6 Метод динамического рассеяния света 17
1.7 Поглощение света веществом 20
ГЛАВА 2. МЕТОДИКА И ТЕХНИКА ЭКСПЕРИМЕНТА 26
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ и ОБСУЖДЕНИЕ 30
3.1 Комплексообразование ДМФ с солями металлов 38
3.2 Применение спектроскопических методов анализа 45
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 50
Оптические методы исследования широко применяются в биологии и медицине за счет их бесконтактной диагностики объекта, информативности, высокой чувствительности. Особую ценность такие исследования приобретают в сочетании с зондовыми методами исследований, которые с нанометровым разрешением позволяют изучать структуру поверхности различных пленок, кристаллических структур. Методами оптической спектроскопии можно индентифицировать полосы высокомолекулярного соединения [1] методами динамического светорассеяния -определить размеры нано- и микрочастиц в суспензии [2], методами атомно-силовой микроскопии оценить наноразмерные структуры на поверхности кристаллических структур [3].
Большое число разнообразных заболеваний, при которых эффективно применяется препарат димефосфон, позволяет предположить участие препарата в ключевых реакциях, общих для основных метаболических процессов [4].
Димефосфон (диметиловый эфир 1,1-диметил-3-оксобутил-фосфоновой кислоты) - оригинальный отечественный препарат, синтезированный в 1952 г. А.Н.Пудовкиным в Институте органической химии им. А.Е. Арбузова КНЦ РАН. В последующем Б.А.Арбузовым, А.А. Муслинкиным, А.О. Визелем в 1974 г. был разработан способ получения, пригодный для промышленного освоения [5] Последнее десятилетие проводятся исследования по выявлению универсальных механизмов действия димефосфона [5,6]. Рассматриваются вопросы взаимодействия димефосфона с ионами кальция [4], с соединениями лития 5, взаимодействие с клеточными мембранами [7,8], установлено, что димефосфон вызывает усиление поглощения иода-131 щитовидной железой [9]. С целью выявления возможности участия димефосфона в молекулярных биологических процессах и влияния его на морфометрические свойства клеток применялись следующие методы исследования:
• ИК и УФ-спектроскопия [5,6]
• методов оптической микроскопии [7,10-16].
• Жидкостная хроматография [5,6]
• ЯМР спектроскопия [5,8]
• Атомно-силовая микроскопия [3]
Несмотря на многолетние исследования и внедрения в практику лекарственного препарата димефосфон [5,6], до сих пор остается не до конца ясным его механизм действия в зависимости от его концентрации и взаимодействия с другими соединениями. Поэтому исследования, связанные с данным препаратом являются весьма перспективными.
Поэтому актуальность данной работы заключается в исследовании взаимодействия димефосфона с некоторыми соединениями солей металлов в водных растворах и на атомарно-ровных поверхностях различными оптическими и зондовыми методами.
Таким образом, целью нашей работы является исследование оптическими и зондовыми методами процессов комплексообразования димефосфона с солями металлов.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
1. .Провести апробацию комбинированной методики с использованием методов АСМ и динамического рассеяния света на примере димефосфона.
2. Исследовать комплексообразования, полученные при взаимодействии димефосфона с солями иодида калия и хлорида кальция, методами оптической микроскопии и атомно-силовой микроскопии.
3. Методам ближней ИК-спектроскопии и УФ спектроскопии проанализировать спектры пропускания и поглощения растворов димефосфона и растворов димефосфона с солями иодида калия и хлорида кальция.
1. .Проведена апробация комбинированной методики с использованием методов АСМ и динамического рассеяния света на примере димефосфона. Оценены размеры ассоциатов в растворе ДМФ различных концентраций.
2. Проведено исследование комплексообразований, полученных при взаимодействии димефосфона с солями иодида калия и хлорида кальция оптическими и зондовыми методами.
3. Совместное использование оптической микроскопии и атомно-силовой
микроскопии позволило зарегистрировать зарождение, процесс и результат кристаллизации раствора димефосфон+йодид калия
концентраций : 0.1%, 0.2%, 0.5%, 1%, 3%, 5%, 7%, 9%, 11%, 13%, 15%. В основном наблюдаются кристаллы квадратных, прямоугольных и треугольных форм. На поверхности квадратных кристаллов наблюдается слоисто-спиральный рост кристаллов. Метод АСМ позволил увидеть зарождение кристаллической структуры комплексообразования ДМФ+KI. Высота кристалла сравнима с размерами ступеньки крупного кристалла, и равна 14 нм.
4. Методами ближней ИК-спектроскопии впервые была зарегистрирована широкая линяя пропускания димефосфона в области длин волн Х=1220 - 1320 нм. Вероятно, поглощение в ближней ИК-области обусловлено валентными и деформационными колебаниями связей С-Н димефосфона. Получена калибровочная кривая водного раствора димефосфона при различных концентрациях 30%; 50%; 70%; 100% на длине волны Х=1280 нм.
1. Петухов, В.Ю. Влияние структуры полимерной матрицы на ионно-лучевой синтез тонких металлополимерных пленок [Текст] / В.Ю.Петухов, М.И.Ибрагимова, Н.Р.Хабибуллина, С.В.Шулындин,
Ю.Н.Осин, Е.П.Жеглов, Т.А.Вахонина, И.Б.Хайбуллин. //
Высокомолекулярные соединения, Серия А. - 2001. - Т. 43. - № 11. - С. 1973-1983.
2. Макаева, А.М. Влияние наночастиц вольфрама на биохимические и морфологические показатели крови [Текст] / А.М. Макаева, О.В.Маршинская, Т.В.Казакова. // Актуальные проблемы науки ХХ1 века. - 2016. - С. 35-39
3. Иткис, Д.М. Атомно-силовая микроскопия [Текст] / Д.М.Иткис, Д.М.Цымбаренко // М Г У им. М. В. Ломоносова, - 2011. - С. 6.
4. Шагидуллин, Р.Р. ИК-спектральное исследование комплексообразования димефосфона с хлоридом кальция [Текст] / Р.Р.Шагидуллин, И.И.Вандюкова, А.О.Визель, Л.И.Щукина, И.А.Студенцова, Р.С.Гараев // Химико-фармацевтический журнал. - 2004. - № 10. - С. 45-47.
5. Визель, А.О. Новый аспект фармакологического подхода к соединениям фосфора. Димефосфон [Текст] / А.О.Визель, Р.С.Гараев. - Казань: Печать-сервис - XXI век, 2011.- 154 с.
6. Мельникова, Н.Б. Разработка ноотропных лекарственных средств на основе комплексов димефосфона с соединениями лития [Текст] / Н.Б.Мельникова, И.В.Гуляев, А.А.Волков, С.А.Гаврилова // Курский научно-практический вестник "Человек и его здоровье". - 2009. - №4- С. 137.
7. Анчикова, Л.И. Экспериментальное обоснование для клинического применения димефосфона как тирео-тимоактивирующего средства [Текст] // Дисс. д.м.н.: Казань, 1987. - 14.00.25 - фармакология.- 345с.
8. Дружинина, О.С. Исследование механизмов действия хлоргексидина и
димефосфона на водный транспорт в эритроцитах [Текст] /
52
О.С.Дружинина, А.И.Скоринкин // Ж. «Структура и динамика молекулярных систем». - 2009.- №7.- С. 53-64.
9. Анчикова Л. И. К механизму действия отечественного препарата димефосфона [Текст] / Л.И.Анчикова, И.Х.Валеева, И.
А.Студенцова // Казанский медицинский журнал, - 2005. - №2. Т. - 6. - С. 92.
10. Куршакова, Л.Н. Влияние димефосфона на некоторые показатели иммунитета больных аутоиммунным тиреоидитом [Текст] // Дисс. д. м. н.: Казань, 1995.-14.00.25 - фармакология. - 179 с.
11. Студенцова, И.А. Экспериментальное обоснование внедрения неантихолинэстеразных фосфорорганических соединений в клиническую практику [Текст] / И.А.Студенцова, С.В.Курашова // Автореф. дисс. д. м. н.: Казань, 1974. - 14.00.25 - фармакология.- 40с.
12. Визель, А.О. Новый аспект фармакологического подхода к соединениям фосфора. Димефосфон [Текст] / А.О.Визель, Р.С.Гараев. - Казань: Печать-сервис - XXI век, 2011.- 189с.
13. Валеева, И.Х. Влияние физиологически активных фосфорорганических соедниений на систему окислительного фосфорилирования митохондрий [Текст] // Автореф. дисс. д.б.н.: Казань, 2004. - 03.00.02 - биофизика. - 17 с.
14. Валеева, И.Х., Фармакологическая коррекция нарушений перекисного
окисления липидов, вызываемых ксенобиотиками [Текст] // Автореф. дисс. д.б.н.: Казань, 2004. - 14.00.25 - фармакология, клиническая
фармакология. - с.
15. Поздняк, А.О. Димефосфон в коррекции нарушений функционального состояния щитовидной железы при аутоиммунном тиреоидите и эндемическом зобе [Текст] // Автореф. дисс. д.м.н.: Казань, 1989. - 14.00.25 - фармакология.- 19 с.
16. Гараев, Р.С. Взаимоотношение малотоксичных фосфорганических соединений с антихолинэстеразными средствами [Текст] // Автореф. дисс. д.м.н.: Казань,1990. - 14.00.25 - фармакология.- 41 с.
17. Binnig, G. Atomic force microscope [Text] / G. Binnig, C.F. Quate, Ch. Gerber // Phys. Rev. Lett. - 1986. - V.56, - P. 930-933.
18. Бараш Ю.С. Силы Ван-дер-Ваальса [Текст] / Ю.С. Бараш // М.: Наука, - 1988.- C. 344.
19. Saint Jean, M. Van der Waals and capacitive forces in atomic force microscopies [Text] / M. Saint Jean, S. Hudlet, C. Guthmann, J. Berger // J. Appl. Phys. - 1999. - V.86, - P. 5245-5248.
20. Батог Г.С. Атомно-силовой микроскоп [Текст] / Г.С.Батог, А.С.Батурин,
B. С.Бормашов, А.А.Чуприк // Москва, - 2008 . -С. 22.
21. Иткис, Д.М. Введение в Сканирующую Зондовую Микроскопию [Текст] / Д.М. Иткис // М Г У им. М. В. Ломоносова, - 2011. - C. 38.
22. Гаришин, О.К. Моделирование взаимодействие зонда атомно-силового микроскопа с полимерной поверхностью с учетом сил Ван-Дер-Ваальса и поверхностного натяжения [Текст] / О.К. Гаришин // Наносистемы, - 2012. - C. 48.
23. Лебедев, Д.В. Измерение модуля Юнга биологических объектов в жидкой среде с помощью специального зонда атомно-силового микроскопа [Текст] / Д.В. Лебедев, А.П. Чукланов, А.А. Бухараев, О.С. Дружинина // Письма в ЖТФ, - 2009. - C. 55.
24. Панюшева, Е.С. Исследование структурно-функционального состояния
эритроцитов методом атомно-силовой спектроскопии [Текст] /
Е.С.Панюшева, А.М.Бодрягина, М.В.Сонина, И.АИванова,
О.В.Столбовская // Ульяновский Государственный Университет, - 2012. -
C. 1.
25. Поляков, В.В. Исследование параметров биологических объектов методом атомно-силовой микроскопии [Текст] / В.В.Поляков, М.В.Рубашкина, В.А.Смирнов, В.В.Полякова // Современные проблемы науки и образования. - 2011. - С. 2.
26. Кусельман, А.И. Нанотехнологии в педиатрии: перспективы
использования атомно-силовой микроскопии для диагностики [Текст] /
A. И.Кусельман, Ю.Н.Басырова, В.В.Светухин, Б.Б.Костишко,
Ю.С.Нагорнов, И.Ю.Матвеева, М.М.Джанджгава // Вопросы диагностики в педиатрии. - 2010. - С. 6.
27. Ферсман, А.Е. Занимательная геохимия [Текст] /А.Е. Ферсман //-Л. -
1954. - С. 113.
28. Фердман, Д.Л. Обмен фосфорных соединений [Текст] // М.-Л.: Медгиз, 1940.- 54 с.
29. Ленинджер, А. Основы биохимии [Текст] // Биохимия - М.:Мир, 1974. - 957 с.
30. Костецкий, Э.Я. возможности синтеза нуклеопротеидов на матрице апатита [Текст] / Э.Я.Костецкий, С.А.Алексаков. // Докл. АН СССР. - 1981. -Т.260, №4. - С. 1013.
31. Миронов, В.Л. Основы сканирующей зондовой микроскопии [Текст] //
B. Л.Миронов.- М.: Техносфера, 2005.-144 с.
32. Гараев, Р.С. Изыскание новых лекарственных средств в рядах фосфорорганических соединениях [Текст] / Р.С. Гараев // Казанский мед. журнал.-2008.-Т.89.- С.585-590.
33. Мельникова, Н.Б. Разработка фармацевтической композиции мицефосфон с димефосфоном и ее исследование при моелировании остеопороза [Текст] / Н.Б. Мельникова, А.Е.Большакова, М.В. Сидорова, И.П. Пьянзина, И.В. Гуляев, О.П. Тихобразова, Т.И. Соловьева, И.В. Мухина // Химико-фармацевтический журнал.-2012.- №8, Т.46.- С. 33-38.
34. Зиганшина, Л.Е. Влияние димефосфона на барьерно-защитную функцию кожи при длительном местном применении [Текст] / Л.Е. Зиганшина, И.А. Студенцова, А.У. Зиганшин // Эксер. И клини.фармакология. - 1992. - №2. - С.60.
35. Цибулькина, В.Н. Ведущие механизмы лечебного действия димефосфона [Текст] / В. Н. Цибулькина // Казанский медицинский журнал. - 1999. - № 2. - С. 120-122.
36. Балыкова, Л.А. Эффективность димефосфона, цитохрома С и мексидола в лечении нарушений сердечного ритма у детей [Текст] / Л. А. Балыкова, М. И. Альмяшева // Казанский медицинский журнал. - 2001. - № 1. - С. 5-7.
37. Борен, К. Поглощение и рассеяние света малыми частицами [Текст] / К.Борен, Д.Хафмен. // - М.: Мир, -1986. - 664 с.
38. Сердюк, И. Методы в молекулярной биофизике. Структура, функция, динамика [Текст] / И.Сердюк, Н.Заккаи, Дж.Заккаи // - 2001. - № 1. - С. 23.
39. Бойнович Л.Б. Гидрофобные материалы и покрытия: принципы создания, свойства и применение [Текст] / Л.Б.Бойнович, А.М.Емельяненко // Успехи химии. - 2008. - С. 632.
40. Рашкович, Л.Н.. Как растут кристаллы в растворе [Текст] / Л.Н.Рашкович // Соросовский образовательный журнал. - 1996. - № 3.- С. 97.
41. Кристиан, Г. Аналитическая химия [Текст] / Г.Кристиан // БИНОМ. - 2009. - № 1. - С. 63.