Интегрины это класс молекул, которые являются посредниками при взаимодействии между клетками живых организмов, участвуя в этом процессе путем связывания с конкретными макромолекулярными белковыми лигандами. Каждая субъединица интегрина состоит из большого внеклеточного образования, трансмембранной спирали и короткого цитоплазматического хвоста и комплементарных субъединиц (домен а-субъединицы связывается с доменом Р-субъединицы и т д).
Основной интегрин allbp3 тромбоцитов управляет первичным гемостазом, позволяя формировать агрегаты тромбоцитов в местах повреждения сосудов. Агрегация тромбоцитов происходит, когда растворимый фибриноген связывается с головной частью молекулы allbp3. Поскольку константа диссоциации (Kd) для комплекса фибриногена с активным allbp3 ~ 100 нМ в 100 раз ниже, чем для свободного фибриногена в плазме, то тромбоциты активируются в плазменной среде, головная часть allbp3 немедленно связывается с фибриногеном. Соответственно, аПЬрЗ жестко регулирует связывание фибриногена для предотвращения спонтанного образования внутрисосудистых агрегатов тромбоцитов.
Связывание в растворе фибриногена с головной частью аПЬрЗ осуществляется исключительно AGDV-содержащей последовательностью, расположенной на С-концс цепи фибриногена у. Однако сайт связывания пептидов, соответствующих последовательностям Arg-Gly-Asp (RGD), расположенных в двух местах в цепи фибриногена Аа, перекрывается с сайтом связывания для последовательности у-цепи, и RGD-содержащие пептиды являются мощными ингибиторами связывание фибриногена с ccllbp в растворе. [I]
Поэтому в качестве объекта исследования был выбран додекапептид (пептид, образованный цепочкой из 12 аминокислот), соответствующий С-концу у цепи фибриногена.
Главной задачей было соотнесение сигналов на одномерном 'Н ЯМР спектра, двумерном 2D TOCSY и составление таблицы химических сдвигов для каждой аминокислоты.
В данной дипломной работе был изучен образец линейного додекапептида (Fibrinogen-Binding Inhibitor Peptide) в смеси воды -0,05 мл D2O и 0,55 мл Н2О . Была изучена теория ЯМР высокого разрешения и получены следующие результаты:
1. Записан одномерный 'Н ЯМР спектр.
2. Записаны двумерные 2D COSY и 2D TOCSY спектры.
3. Проведено соотнесение сигналов в спектрах.
4. Предоставлена таблица химических сдвигов для каждой аминокислоты.