Особенности реализации репродуктивной функции в программах вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией
|
ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………………...4
Глава 1.ОСОБЕННОСТИ РЕАЛИЗАЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ У СУПРУЖЕСКИХ ПАР С ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ………......14
1.1 Эпидемиология и пути передачи ВИЧ-инфекции………………………....14
1.2 Репродуктивная функция у женщин с ВИЧ-инфекцией………………..…17
1.2.1 Гинекологические заболевания и фертильность ВИЧ-инфицированных женщин…………………………………………………….…………..….17
1.2.2 Методы реализации репродуктивной функции у женщин с ВИЧ-инфекцией…………………………………………………………………….…20
1.3 Репродуктивная функция у мужчин с ВИЧ-инфекцией………………..…22
1.3.1 Фертильность ВИЧ-инфицированных мужчин……………………….…22
1.3.2 Обработка спермы у мужчин с ВИЧ-инфекцией……………………...…24
1.3.3 Методы реализации репродуктивной функции у мужчин с ВИЧ-инфекцией……………………………………………………………………….26
1.4 Реализация репродуктивной функции в ВИЧ - конкордантных парах…..30
1.5 Митохондриальная ДНК гамет………………………………………….....31
1.5.1 Роль кумулюсных клеток в компетентности ооцитов…………………34
1.5.2 Митохондриальная токсичность антиретровирусной терапии………..34
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ…………...…40
2.1 Материал исследования……………………………………………………..40
2.2 Методы исследования………………………………………………………44
2.3 Специальные методы исследования……………………..………………...57
2.3.1 Исследование числа копий мтДНК в клетках кумулюса……………….57
2.3.2 Исследование числа копий мтДНК в сперматозоидах………………….58
2.4 Статистический анализ полученных результатов………………………...59
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ…..….61
3.1 Клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у женщины…………………………......61
3.1.1 Анализ показателей овариального резерва у пациенток исследуемых групп……………………………………………………………………………...73
3.2 Клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у мужчин……………………………….77
3.2.1 Параметры спермограммы у ВИЧ-положительных пациентов, использующих АРВТ……………………………………………………………84
3.2.2 Параметры спермограммы у ВИЧ-положительных пациентов, не использующих АРВТ……………………………………………………………89
3.3 Анализ основных параметров овариальной стимуляции, эмбриологического этапа и исходов программы ЭКО у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у женщины ……………………………………………….94
3.4 Анализ основных параметров овариальной стимуляции, эмбриологического этапа и исходов программы ЭКО у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у мужчины………………………………………………… 94
3.5 Анализ копийности митохондриальной ДНК гамет при ВИЧ-инфекции………………………………………………………………………..105
3.5.1 Копийность мтДНК в кумулюсных клетках……………………………105
3.5.2 Копийность мтДНК в сперматозоидах………………………………….110
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ СОБСТВЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ……….116
ВЫВОДЫ…………………………………………………………………….....133
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ……………………………………….136
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ……………………………………..………………141
ПРИЛОЖЕНИЕ……………………………………………………………...…160
Глава 1.ОСОБЕННОСТИ РЕАЛИЗАЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ У СУПРУЖЕСКИХ ПАР С ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ………......14
1.1 Эпидемиология и пути передачи ВИЧ-инфекции………………………....14
1.2 Репродуктивная функция у женщин с ВИЧ-инфекцией………………..…17
1.2.1 Гинекологические заболевания и фертильность ВИЧ-инфицированных женщин…………………………………………………….…………..….17
1.2.2 Методы реализации репродуктивной функции у женщин с ВИЧ-инфекцией…………………………………………………………………….…20
1.3 Репродуктивная функция у мужчин с ВИЧ-инфекцией………………..…22
1.3.1 Фертильность ВИЧ-инфицированных мужчин……………………….…22
1.3.2 Обработка спермы у мужчин с ВИЧ-инфекцией……………………...…24
1.3.3 Методы реализации репродуктивной функции у мужчин с ВИЧ-инфекцией……………………………………………………………………….26
1.4 Реализация репродуктивной функции в ВИЧ - конкордантных парах…..30
1.5 Митохондриальная ДНК гамет………………………………………….....31
1.5.1 Роль кумулюсных клеток в компетентности ооцитов…………………34
1.5.2 Митохондриальная токсичность антиретровирусной терапии………..34
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ…………...…40
2.1 Материал исследования……………………………………………………..40
2.2 Методы исследования………………………………………………………44
2.3 Специальные методы исследования……………………..………………...57
2.3.1 Исследование числа копий мтДНК в клетках кумулюса……………….57
2.3.2 Исследование числа копий мтДНК в сперматозоидах………………….58
2.4 Статистический анализ полученных результатов………………………...59
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ…..….61
3.1 Клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у женщины…………………………......61
3.1.1 Анализ показателей овариального резерва у пациенток исследуемых групп……………………………………………………………………………...73
3.2 Клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у мужчин……………………………….77
3.2.1 Параметры спермограммы у ВИЧ-положительных пациентов, использующих АРВТ……………………………………………………………84
3.2.2 Параметры спермограммы у ВИЧ-положительных пациентов, не использующих АРВТ……………………………………………………………89
3.3 Анализ основных параметров овариальной стимуляции, эмбриологического этапа и исходов программы ЭКО у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у женщины ……………………………………………….94
3.4 Анализ основных параметров овариальной стимуляции, эмбриологического этапа и исходов программы ЭКО у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией у мужчины………………………………………………… 94
3.5 Анализ копийности митохондриальной ДНК гамет при ВИЧ-инфекции………………………………………………………………………..105
3.5.1 Копийность мтДНК в кумулюсных клетках……………………………105
3.5.2 Копийность мтДНК в сперматозоидах………………………………….110
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ СОБСТВЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ……….116
ВЫВОДЫ…………………………………………………………………….....133
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ……………………………………….136
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ……………………………………..………………141
ПРИЛОЖЕНИЕ……………………………………………………………...…160
ВИЧ-инфекция – эпидемическое заболевание, которое в настоящее время приобрело характер пандемии. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) около 40 млн. человек в мире проживает с ВИЧ-инфекцией[1]. Более 80% ВИЧ-инфицированных находятся в возрасте от 15 до 44 лет, большинство из них планируют беременность [2,3,4].
Использование антиретровирусной терапии (АРВТ) существенно увеличило продолжительность жизни ВИЧ-инфицированных пациентов, в связи с чем, становится актуальным повышение качества их жизни и возможность реализации репродуктивной функции. Более того, при сохраненной фертильности у обоих супругов существует возможность самостоятельного зачатия [5]. Однако результаты ряда исследований показывают снижение фертильности как женщин, так и мужчин с ВИЧ-инфекцией [3,6,7], что создает предпосылки для реализации репродуктивной функции с использованием программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
В настоящее время влияние ВИЧ-инфекции и/или АРВТ на фертильность, качество гамет и эффективность программ ВРТ у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией недостаточно изучено. Отсутствуют однозначные данные о воздействии ВИЧ-инфекции на овариальный резерв. Так, в исследовании Seifer и соавт. (2007), не было выявлено снижения параметров овариального резерва [8]. Ohl и соавт. (2010), напротив, показали, что у пациенток у ВИЧ-инфицированных женщин уровни ФСГ были на 36% выше, чем в контрольной группе, в то время как уровни ингибина В и АМГ были на 57% и 23% ниже, соответственно [9]. Обсуждается негативное влияние препаратов АРВТ на качество ооцитов и их способность к оплодотворению. Известно, что нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), которые всегда используются в схемах АРВТ, ингибируя активность фермента-мишени — обратной транскриптазы ВИЧ, нарушают процесс репликации вируса. Однако данная группа препаратов также способна подавлять гамма-полимеразу человека, необходимую для репликации митохондриальной ДНК (мтДНК), что приводит к снижению (истощению, деплеции) содержания мтДНК, увеличению мутации мтДНК [10, 11, 12]. Известно, что существует взаимосвязь между числом копий мтДНК, продукцией АТФ митохондриями и качеством ооцитов, а также потенциалом развития эмбрионов. При этом показано, что ооциты с меньшим количеством копий мтДНК имеют более низкую частоту оплодотворения [10]. Исследования Lopez и соавт. (2008), впервые показали, что в ооцитах ВИЧ-инфицированных женщин с бесплодием, принимающих комбинированную АРВТ в 32% случаев наблюдалось истощение мтДНК по сравнению с контролем [13, 14].
Обсуждаются особенности овариальной стимуляции у ВИЧ-позитивных женщин. Так, в ряде работ показано, что для стимуляции суперовуляции у ВИЧ-положительных женщин потребовались более высокие дозы гонадотропинов [3, 15, 7,16]. Авторы также объясняют это возможной овариальной резистентностью, обусловленной негативными эффектами АРВТ на овариальный ответ.
Данные литературы об эффективности программ ВРТ в серодискордантных парах с ВИЧ-инфицированной женщиной противоречивы. Однако большинство из них указывают на более низкую частоту наступления беременности после ЭКО (14,3%-26,3%) по сравнению с аналогичным показателем в парах с негативными по ВИЧ женщинами [3, 7, 17], что объясняют гонадотоксичными эффектами препаратов АРВТ. Это подтверждают результаты исследований Coll и соавт. (2006), Stora и соавт. (2016), показавшие, что у ВИЧ-положительных женщин при использовании собственных ооцитов наблюдалось снижение частоты наступления беременности, тогда как при использовании ооцитов донора этот показатель был сопоставим с эффективностью программ ЭКО у женщин без ВИЧ-инфекции [7,15].
Отсутствует единая точка зрения относительно воздействия АРВТ на характеристики эякулята у ВИЧ-инфицированных мужчин. Согласно данным Nicopoullos и соавт. (2011), АРВТ оказывает негативное влияние на параметры спермы, что проявляется в снижении концентрации, подвижности сперматозоидов, увеличении количества их патологических форм [18]. Robbins и соавт. (2001) напротив, не выявили изменений показателей спермы у мужчин с ВИЧ-инфекцией, принимающих АРВТ [19]. Тем не менее, все чаще появляются сообщения, что использование АРВТ способствует нарушению целостности ДНК сперматозоидов, а также приводит к снижению количества мтДНК [6,20]. Теоретически, проникновение в сперматозоиды препаратов группы НИОТ могут обусловливать митохондриальную токсичность в сперматозоидах, что, в свою очередь, приводит к снижению их подвижности. Однако эта гипотеза нуждается в подтверждении [21].
Результаты анализа исходов циклов ЭКО в серодискордантных парах с ВИЧ-инфицированным мужчиной весьма неоднозначны. По разным данным частота наступления беременности в данной группе пациентов варьирует от 22 % до 45 % [22, 3]. В качестве основной причины низкой эффективности программ ВРТ в данной группе пациентов обсуждается воздействие ВИЧ и АРВТ на митохондриальный потенциал сперматозоидов, как маркер их качества и способности к оплодотворению [159].
Таким образом, на сегодняшний день отсутствуют однозначные данные о влиянии ВИЧ-инфекции и/или АРВТ на фертильность, качество гамет и эффективность программ ВРТ у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией, что является основанием для проведения настоящего исследования.
Цель исследования - повышение эффективности и безопасности реализации репродуктивной функции в программах ВРТ у супружеских пар с ВИЧ- инфекцией.
Задачи исследования
1. Изучить клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией, обратившихся для оценки фертильности и/или проведения программы ЭКО
2. У ВИЧ-позитивных женщин оценить влияние длительности заболевания и продолжительности антиретровирусной терапии на состояние овариального резерва.
3. У ВИЧ-позитивных мужчин оценить влияние длительности заболевания и продолжительности антиретровирусной терапии на параметры эякулята.
4. Оценить параметры стимулированного цикла, эмбриологический этап и эффективность программы ЭКО в зависимости от ВИЧ-статуса супружеской пары
5. Изучить влияние антиретровирусной терапии на качество гамет на основании оценки копийности митохондриальной ДНК в клетках кумулюса и сперматозоидах
6. Разработать алгоритм подготовки и проведения программ ВРТ у супружеских пар с бесплодием и ВИЧ-инфекцией.
Использование антиретровирусной терапии (АРВТ) существенно увеличило продолжительность жизни ВИЧ-инфицированных пациентов, в связи с чем, становится актуальным повышение качества их жизни и возможность реализации репродуктивной функции. Более того, при сохраненной фертильности у обоих супругов существует возможность самостоятельного зачатия [5]. Однако результаты ряда исследований показывают снижение фертильности как женщин, так и мужчин с ВИЧ-инфекцией [3,6,7], что создает предпосылки для реализации репродуктивной функции с использованием программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
В настоящее время влияние ВИЧ-инфекции и/или АРВТ на фертильность, качество гамет и эффективность программ ВРТ у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией недостаточно изучено. Отсутствуют однозначные данные о воздействии ВИЧ-инфекции на овариальный резерв. Так, в исследовании Seifer и соавт. (2007), не было выявлено снижения параметров овариального резерва [8]. Ohl и соавт. (2010), напротив, показали, что у пациенток у ВИЧ-инфицированных женщин уровни ФСГ были на 36% выше, чем в контрольной группе, в то время как уровни ингибина В и АМГ были на 57% и 23% ниже, соответственно [9]. Обсуждается негативное влияние препаратов АРВТ на качество ооцитов и их способность к оплодотворению. Известно, что нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), которые всегда используются в схемах АРВТ, ингибируя активность фермента-мишени — обратной транскриптазы ВИЧ, нарушают процесс репликации вируса. Однако данная группа препаратов также способна подавлять гамма-полимеразу человека, необходимую для репликации митохондриальной ДНК (мтДНК), что приводит к снижению (истощению, деплеции) содержания мтДНК, увеличению мутации мтДНК [10, 11, 12]. Известно, что существует взаимосвязь между числом копий мтДНК, продукцией АТФ митохондриями и качеством ооцитов, а также потенциалом развития эмбрионов. При этом показано, что ооциты с меньшим количеством копий мтДНК имеют более низкую частоту оплодотворения [10]. Исследования Lopez и соавт. (2008), впервые показали, что в ооцитах ВИЧ-инфицированных женщин с бесплодием, принимающих комбинированную АРВТ в 32% случаев наблюдалось истощение мтДНК по сравнению с контролем [13, 14].
Обсуждаются особенности овариальной стимуляции у ВИЧ-позитивных женщин. Так, в ряде работ показано, что для стимуляции суперовуляции у ВИЧ-положительных женщин потребовались более высокие дозы гонадотропинов [3, 15, 7,16]. Авторы также объясняют это возможной овариальной резистентностью, обусловленной негативными эффектами АРВТ на овариальный ответ.
Данные литературы об эффективности программ ВРТ в серодискордантных парах с ВИЧ-инфицированной женщиной противоречивы. Однако большинство из них указывают на более низкую частоту наступления беременности после ЭКО (14,3%-26,3%) по сравнению с аналогичным показателем в парах с негативными по ВИЧ женщинами [3, 7, 17], что объясняют гонадотоксичными эффектами препаратов АРВТ. Это подтверждают результаты исследований Coll и соавт. (2006), Stora и соавт. (2016), показавшие, что у ВИЧ-положительных женщин при использовании собственных ооцитов наблюдалось снижение частоты наступления беременности, тогда как при использовании ооцитов донора этот показатель был сопоставим с эффективностью программ ЭКО у женщин без ВИЧ-инфекции [7,15].
Отсутствует единая точка зрения относительно воздействия АРВТ на характеристики эякулята у ВИЧ-инфицированных мужчин. Согласно данным Nicopoullos и соавт. (2011), АРВТ оказывает негативное влияние на параметры спермы, что проявляется в снижении концентрации, подвижности сперматозоидов, увеличении количества их патологических форм [18]. Robbins и соавт. (2001) напротив, не выявили изменений показателей спермы у мужчин с ВИЧ-инфекцией, принимающих АРВТ [19]. Тем не менее, все чаще появляются сообщения, что использование АРВТ способствует нарушению целостности ДНК сперматозоидов, а также приводит к снижению количества мтДНК [6,20]. Теоретически, проникновение в сперматозоиды препаратов группы НИОТ могут обусловливать митохондриальную токсичность в сперматозоидах, что, в свою очередь, приводит к снижению их подвижности. Однако эта гипотеза нуждается в подтверждении [21].
Результаты анализа исходов циклов ЭКО в серодискордантных парах с ВИЧ-инфицированным мужчиной весьма неоднозначны. По разным данным частота наступления беременности в данной группе пациентов варьирует от 22 % до 45 % [22, 3]. В качестве основной причины низкой эффективности программ ВРТ в данной группе пациентов обсуждается воздействие ВИЧ и АРВТ на митохондриальный потенциал сперматозоидов, как маркер их качества и способности к оплодотворению [159].
Таким образом, на сегодняшний день отсутствуют однозначные данные о влиянии ВИЧ-инфекции и/или АРВТ на фертильность, качество гамет и эффективность программ ВРТ у супружеских пар с ВИЧ-инфекцией, что является основанием для проведения настоящего исследования.
Цель исследования - повышение эффективности и безопасности реализации репродуктивной функции в программах ВРТ у супружеских пар с ВИЧ- инфекцией.
Задачи исследования
1. Изучить клинико-анамнестические данные и лабораторные параметры супружеских пар с ВИЧ-инфекцией, обратившихся для оценки фертильности и/или проведения программы ЭКО
2. У ВИЧ-позитивных женщин оценить влияние длительности заболевания и продолжительности антиретровирусной терапии на состояние овариального резерва.
3. У ВИЧ-позитивных мужчин оценить влияние длительности заболевания и продолжительности антиретровирусной терапии на параметры эякулята.
4. Оценить параметры стимулированного цикла, эмбриологический этап и эффективность программы ЭКО в зависимости от ВИЧ-статуса супружеской пары
5. Изучить влияние антиретровирусной терапии на качество гамет на основании оценки копийности митохондриальной ДНК в клетках кумулюса и сперматозоидах
6. Разработать алгоритм подготовки и проведения программ ВРТ у супружеских пар с бесплодием и ВИЧ-инфекцией.
1. Женщины с ВИЧ-инфекцией репродуктивного возраста (34 года, 31-37) с длительностью заболевания 8 лет (6;11 лет), преимущественно половым путем инфицирования (51,6%) и 3-ей субклинической стадией заболевания (61,05%), имели неопределяемую вирусную нагрузку на фоне АРВТ (4 года, 2;6,5 лет), медиану уровня CD4+ 622,5 ( 446,7;808,7) мкл/кл.
2. Для ВИЧ-положительных женщин характерно более раннее начало половой жизни (16,9(2,2) и 18,3(2,6); р<0,001), высокая частота ИППП (16,4% и 3,2%; р=0,007), осложненных форм воспалительных заболеваний придатков матки (8,4% и 1%; р=0,01), высокая частота абортов (42,1% и 12,5%; р=0,001), трубной беременности (34,7% и 17,7%; р=0,004) и преобладание вторичного бесплодия(68,1% и 38%; р<0,001).
3. У женщин с ВИЧ-инфекцией ниже уровни АМГ (1,5 (0,8;3,1) и 2,8 (1,9;5,7) нг/мл; р<0,001); число антральных фолликулов (7 (2,5;13) и 12 (6,5;18) р=0,001) и выше концентрация ФСГ (7,4 (6,1;9,4) и 6,3(5,2;7,3) МЕ/л; р=0,001) по сравнению с пациентками без ВИЧ - инфекции. Уровень АМГ обратно коррелирует с длительности АРВТ (r=-0,251; р = 0,008) и существенно снижается при продолжительности АРВТ более 1 года (2,9 нг/мл (1,9;5,8); р<0,001), достигая критического уровня при длительности АРВТ более 5 лет (1,0 нг/мл (0,5;2,4); р<0,001).
4. Мужчины с ВИЧ-инфекцией (37 лет, 33;39) имели длительность заболевания 5 лет (2;9 лет), преимущественно 3 субклиническую стадию заболевания (64,89%), неопределяемую вирусную нагрузку на фоне АРВТ (2 года, 1;5 лет), медиану уровня CD4+ - 535 (383;679) мкл/кл. Путь инфицирования был неизвестен у 63,8% пациентов, 10,6% – указывали на употребление наркотиков, в 25,5% случаях отмечен половой путь инфицирования.
5. У ВИЧ – инфицированных мужчин, принимающих АРВТ, увеличивается число патологических форм сперматозоидов (97 (96;98) и 96 (94,5;96,5); р=0,006), которое обратно коррелирует с уровнем СD4+ (r = -0,362; р=0,02). Концентрация сперматозоидов (r= -0,242; р=0,02) обратно зависит от «стажа» ВИЧ-инфекции, а число их неподвижных форм (r = 0,220; р=0,04) имеет прямую зависимость с длительностью заболевания. АРВТ повышает фрагментацию ДНК сперматозоидов (15,8 % и 9,95%; р=0,001). У ВИЧ-положительных пациентов, не использующих АРВТ, при высоких уровнях вирусной нагрузки снижается объем эякулята (r =-0,669;р=0,03), тогда как при использовании АРВТ и увеличении уровня CD4+ лимфоцитов (r=0,667;р=0,05) объем эякулята возрастает.
6. У ВИЧ- позитивных женщин в программе ЭКО снижено число ооцитов (6(3;11) и 10(7;15,5); р<0,001), зрелых ооцитов (5(2;10) и 8 (5;12); р<0,001), зигот (4(2;7) и 7 (4;10); р<0,001), дробящихся эмбрионов (4(2;7) и 6 (4;10); р<0,001), бластоцист (1(0;3) и 3(1;6); р<0,001) и криоконсервированных эмбрионов (1(0;2) и 2(0;4); p=0,02). Эффективность программ ВРТ у пациенток с ВИЧ-инфекцией значимо ниже, чем у здоровых женщин, как в «свежих» циклах (клинической беременности (11,5% и 31,3%, р=0,008) и родов живым плодом (7,7% и 23,9%, р=0,007)), так и в криоциклах (клинической (22,2% и 50%, р=0,002) беременности и родов живым плодом (11,1% и 37,9%; р=0,001)).
7. У ВИЧ-инфицированных женщин число копий мтДНК в клетках кумулюса значимо ниже, чем у женщин без ВИЧ-инфекции (566,7(229,1) и 639,7(197) о.е; р=0,02) и обратно зависит от стадии ВИЧ-инфекции: 4а стадия - 535,2(256,4) о.е., 3 субклиническая стадия - 588,6(208,1) о.е. Копийность мтДНК обратно зависит от длительности АРВТ (r=-0,228;р=0,04) и значимо снижается при продолжительности АРВТ от 1 года до 5 лет (505,39(175,0) и 639,7(197,9) о.е; р=0,001) и более (520,7(203) и 639,7(197,9) о.е; р=0,04).
8. У мужчин с ВИЧ-инфекцией при тяжелой патозооспермии длительность АРВТ отрицательно коррелирует с количеством мтДНК, лишенной делеций (r=-0,542;р=0,04) и тотальной мтДНК (r=-0,627;р=0,01). Выраженная отрицательная корреляция выявлена между уровнем CD4+ и mtDNAtotal / mtDNAdel- (r=-0,629;р=0,03).
2. Для ВИЧ-положительных женщин характерно более раннее начало половой жизни (16,9(2,2) и 18,3(2,6); р<0,001), высокая частота ИППП (16,4% и 3,2%; р=0,007), осложненных форм воспалительных заболеваний придатков матки (8,4% и 1%; р=0,01), высокая частота абортов (42,1% и 12,5%; р=0,001), трубной беременности (34,7% и 17,7%; р=0,004) и преобладание вторичного бесплодия(68,1% и 38%; р<0,001).
3. У женщин с ВИЧ-инфекцией ниже уровни АМГ (1,5 (0,8;3,1) и 2,8 (1,9;5,7) нг/мл; р<0,001); число антральных фолликулов (7 (2,5;13) и 12 (6,5;18) р=0,001) и выше концентрация ФСГ (7,4 (6,1;9,4) и 6,3(5,2;7,3) МЕ/л; р=0,001) по сравнению с пациентками без ВИЧ - инфекции. Уровень АМГ обратно коррелирует с длительности АРВТ (r=-0,251; р = 0,008) и существенно снижается при продолжительности АРВТ более 1 года (2,9 нг/мл (1,9;5,8); р<0,001), достигая критического уровня при длительности АРВТ более 5 лет (1,0 нг/мл (0,5;2,4); р<0,001).
4. Мужчины с ВИЧ-инфекцией (37 лет, 33;39) имели длительность заболевания 5 лет (2;9 лет), преимущественно 3 субклиническую стадию заболевания (64,89%), неопределяемую вирусную нагрузку на фоне АРВТ (2 года, 1;5 лет), медиану уровня CD4+ - 535 (383;679) мкл/кл. Путь инфицирования был неизвестен у 63,8% пациентов, 10,6% – указывали на употребление наркотиков, в 25,5% случаях отмечен половой путь инфицирования.
5. У ВИЧ – инфицированных мужчин, принимающих АРВТ, увеличивается число патологических форм сперматозоидов (97 (96;98) и 96 (94,5;96,5); р=0,006), которое обратно коррелирует с уровнем СD4+ (r = -0,362; р=0,02). Концентрация сперматозоидов (r= -0,242; р=0,02) обратно зависит от «стажа» ВИЧ-инфекции, а число их неподвижных форм (r = 0,220; р=0,04) имеет прямую зависимость с длительностью заболевания. АРВТ повышает фрагментацию ДНК сперматозоидов (15,8 % и 9,95%; р=0,001). У ВИЧ-положительных пациентов, не использующих АРВТ, при высоких уровнях вирусной нагрузки снижается объем эякулята (r =-0,669;р=0,03), тогда как при использовании АРВТ и увеличении уровня CD4+ лимфоцитов (r=0,667;р=0,05) объем эякулята возрастает.
6. У ВИЧ- позитивных женщин в программе ЭКО снижено число ооцитов (6(3;11) и 10(7;15,5); р<0,001), зрелых ооцитов (5(2;10) и 8 (5;12); р<0,001), зигот (4(2;7) и 7 (4;10); р<0,001), дробящихся эмбрионов (4(2;7) и 6 (4;10); р<0,001), бластоцист (1(0;3) и 3(1;6); р<0,001) и криоконсервированных эмбрионов (1(0;2) и 2(0;4); p=0,02). Эффективность программ ВРТ у пациенток с ВИЧ-инфекцией значимо ниже, чем у здоровых женщин, как в «свежих» циклах (клинической беременности (11,5% и 31,3%, р=0,008) и родов живым плодом (7,7% и 23,9%, р=0,007)), так и в криоциклах (клинической (22,2% и 50%, р=0,002) беременности и родов живым плодом (11,1% и 37,9%; р=0,001)).
7. У ВИЧ-инфицированных женщин число копий мтДНК в клетках кумулюса значимо ниже, чем у женщин без ВИЧ-инфекции (566,7(229,1) и 639,7(197) о.е; р=0,02) и обратно зависит от стадии ВИЧ-инфекции: 4а стадия - 535,2(256,4) о.е., 3 субклиническая стадия - 588,6(208,1) о.е. Копийность мтДНК обратно зависит от длительности АРВТ (r=-0,228;р=0,04) и значимо снижается при продолжительности АРВТ от 1 года до 5 лет (505,39(175,0) и 639,7(197,9) о.е; р=0,001) и более (520,7(203) и 639,7(197,9) о.е; р=0,04).
8. У мужчин с ВИЧ-инфекцией при тяжелой патозооспермии длительность АРВТ отрицательно коррелирует с количеством мтДНК, лишенной делеций (r=-0,542;р=0,04) и тотальной мтДНК (r=-0,627;р=0,01). Выраженная отрицательная корреляция выявлена между уровнем CD4+ и mtDNAtotal / mtDNAdel- (r=-0,629;р=0,03).