1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 3
1.1 Лимфоциты: свойства и функции 3
1.1.1 Т-лимфоциты. Механизмы развития клеточного иммунитета 7
1.1.2 В-лимфоциты. Механизмы развития гуморального иммунитета 10
1.2 Реакция бласттрансформации лимфоцитов как проявление их
функциональной активности 12
1.3 Метаболизм клеток иммунной системы 13
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 15
2.1 Пациенты 15
2.2 Реакция бласттрансформации лимфоцитов и методика постановки 15
2.3 Биолюминесцентный анализ 18
2.4 Проточная цитометрия 22
2.5 Статистические методы исследований 26
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 27
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 28
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 29
Иммунная система в связи с ее функциональными задачами является главной в защите организма от внешних и внутренних патогенных факторов, принимает участие во всех регуляторных процессах в организме. Клетки иммунной системы, которые выполняют ключевые функции по осуществлению клеточного и гуморального иммунитета, являются лимфоциты.
Лимфоциты являются главными иммунными клетками, так как роль лимфоцитов в адекватном иммунном ответе наиболее значимая. Столь высокая значимость лимфоцитов обусловлена механизмом иммунного ответа на попадание в организм инфекции и чужеродных веществ. Именно они первые реагируют на инфекцию, распознают чужеродные антигены и запускают целые цепочки иммунных реакций, в результате которых вырабатываются антитела и происходит активация фагоцитоза. Лимфоциты способны специфически распознавать собственные и чужеродные антигены и отвечать активацией на контакт с конкретным антигеном. Это единственные клетки в организме, чье развитие не завершается без вмешательства внешних факторов, в роли таких факторов выступают антигены. Реакция лимфоцитов на антигенные стимулы составляет основу адаптивного иммунного ответа.
Целью моей работы является исследование изменений метаболических параметров клеток иммунной системы в динамике реакции бласттрансформации лимфоцитов.
На основании поставленной цели были определены следующие задачи:
1. Оптимизировать методику постановки реакции бласттрансформации для оценки метаболических параметров клеток иммунной системы;
2. Измерить уровень ДНК клеток иммунной системы в динамике реакции бласттрансформации;
3. Измерить уровни активности внутриклеточных ферментов лимфоцитов в динамике реакции бласттрансформации
1. Adam T., Waickman A.T., Powell J.D. mTOR, metabolism, and the regulation of T-cell differentiation and function // Immunol. Rev. 2012. V. 249. № 1. P. 43-58.
2. Aubert M., Krantz E.M., Jerome K.R. Herpes simplex virus genes Us3, Us5, and Us12 differentially regulate cytotoxic T lymphocyte-induced cytotoxicity // Viral. Immunol. - 2006. - Vol. 19, N 3. - P. 391-408.
3. Bi Y., Yang R. Direct and indirect regulatory mechanisms in TH17 cell differentiation and functions // Scand. J. Immunol. - 2012. - Vol. 75, N 6. - P. 543-552.
4. Biswas S.K., Mantovani A. Macrophage plasticity and interaction with lymphocyte subsets: cancer as a paradigm // Nat. Immunol. - 2010. - Vol. 11, N 10. - P. 889¬896.
5. Bleackley R.C. A molecular view of cytotoxic T lymphocyte induced killing // Biochem. Cell. Biol. - 2005. - Vol. 83, N 6. - P. 747-751.
6. Bortell R., Moss J., McKenna R.C. et al. Nicotinamide adenine dinucleo-tide (nad) and its metabolites inhibit T lymphocyte proliferation: role of cell sur-face nad glycohydrolase and pyrophosphatase activities//J. Immunol. - 2001. - Vol.167, N 4. - P.2049-2059.
7. Campello S., Lacalle R.A., Bettella M. et al. Orchestration of lymphocyte chemotaxis by mitochondrial dynamics // J. Exp. Med. - 2006. - Vol. 203, N 13. - P. 2879-2886.
8. Diaz G.A., Koelle D.M. Human CD4+ CD25 high cells suppress proliferative memory lymphocyte responses to herpes simplex virus type 2 // J. Virol. - 2006. - Vol. 80, N 16. - P. 8271-8273.
9. Fisher G., Schwartz D.D., Quindry J. et al. Lymphocyte enzymatic antioxidant responses to oxidative stress following high-intensity interval exercise // J. Appl. Physiol. - 2011. - Vol. 110, N 3. - P. 730-737.
10. Green D.R., Scott D.W. Activation-induced apoptosis in lymphocytes // Curr. Opin. Immunol. - 1994. - Vol. 6, N 3. - P. 476-487.
11. Hadzic T., Li L., Cheng N., Walsh S.A. et al. The role of low molecular weight thiols in T lymphocyte proliferation and IL-2 secretion // J. Immunol. - 2005. - Vol. 175, N 12. - P. 7965-7972.
12. Li M., Li C., Allen A. et al. The structure and allosteric regulation of glutamate dehydrogenase // Neurochem. Int. - 2011. - Vol. 59, N 4. - P. 445-455.
13. Luider J.1., Cyfra M., Johnson P., Auer I. Impact of the new Beckman Coulter Cytomics FC 500 5-color flow cytometer on a regional flow cytometry clinical laboratory service. Lab. Hematol. 2004, V. 10, P. 102-108.
14. Mason E.F., Rathmell J.C. Cell metabolism: an essential link between cell growth and apoptosis // Biochim. Biophys. Acta. - 2011. - Vol. 1813, N 4. - P. 645-654.
15. Pallardo F.V., Markovic J., Garda J.L., Vina J. Role of nuclear glutathione as a key regulator of cell proliferation // Mol. Aspects Med. - 2009. - Vol. 30, N 1 - 2. - P. 77-85.
16. Rosa L.F., de Almeida A.F., Safi D.A., Curi R. Thioglycollate stimulus modifies lymphocyte metabolism and proliferation // Cell. Biochem. Funct. - 1993. - Vol. 11, N 4. - 251-255.
17. Ройт А. Иммунология: учебное пособие / Бросстоф Дж. [и др.]. -Пер с англ. - М.: Мир, 2000. - 592 с.
18. Борисов А.Г. Кластерный анализ типов иммунных нарушений при инфекционно-воспалительных заболеваниях // Российский иммунологический журнал, 2014, Т. 8, № 4, С. 1002-1011.
19. Борисов А.Г., Савченко А.А., Смирнова С.В. К вопросу о классификации нарушений функционального состояния иммунной системы // Сибирский медицинский журнал - Томск, - 2008. - Т. 23, № 3-1. - С. 13-18.
20. Булыгин, Г. В. Метаболические основы регуляции иммунного ответа / Г. В. Булыгин, Н. И. Камзалакова, А. В. Андрейчиков. - Новосибирск: СО РАМН,
1999. - 340 с.
21. Владимиров, Ю.А. Активированная хемилюминесценция и биолюминесценция как инструмент в медико биологических исследованиях /. Ю.А.Владимиров // Соросовский образовательный журнал. 2001. № 1. С.16-23.
22. Дроков, М.Ю. Исследование экспрессии организма в CD4+ лимфоцитах и Т-регуляторных клетках / М.Ю. Дроков // Иммунофенотипические характеристики Т клеточного звена иммунной системы - 2014. - № 1. - С. 14.
23. Зинченко В.П., Антонов С.А., Сергеев А.Н. Конститутивно-активный кальциевый канал плазматической мембраны Т-лимфоцитов // Биологические мембраны: Журн. мембранной и клеточной биологии. - 2009. - Т. 26, № 4. - С. 293-297.
24. Козлов, В.А. Практические аспекты диагностики и лечения иммунных нарушений / Борисов А.Г. Смирнова С.В. Савченко А.А. // Издательство «Наука» Новосибирск - 2009.
25. Кудрявцев И.В. Т-клетки памяти: основные популяции и стадии дифференцировки // Российский иммунологический журнал, 2014. Т.8, № 4, С. 947-964.
26. Кудрявцев И.В., Субботовская А.Н. Опыт измерения параметров иммунного статуса с использованием шести-цветного цитофлуориметрического анализа // Медицинская иммунология, 2015, Т. 17, № 1, С. 19-26.
27. Кудрявцев И.В., Елезов Д.С. Анализ основных популяций цитотоксических Т-лимфоцитов периферической крови на основании уровня экспрессии CD27,
CD28, CD45R0 и CD62L // Российский иммунологический журнал, 2013, Т.7, №2-3, С.57-61.
28. Новиков, Л. В. Клиническая иммунология и аллергология с основами общей иммунологии / А. Б. Новиков, Л.В. Банковская, Р.Я. Мешкова // Клинически значимые характеристики клеток, органов и тканей иммунной системы - Москва, - 2011. - С. 35.
29. Новицкий В.В., Уразова О.И., Филинюк О.В.и др. Показатели апоптоза и пролиферативной активности лимфоцитов у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью к M. tuberculosis // Мед. иммунология. - 2012. - Т. 14, № 1-2. - С. 119-126.
30. Рабсон А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз. - М.: Мир, 2006. - С. 320.
31. Робинсон М.В., Топоркова Л.Б., Труфакин В.А. Морфология и метаболизм лимфоцитов. - Новосибирск: Наука,1986. - С. 127.
32. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология: Пер. с англ. - М.: Мир,
2000. - 592 с.
33. Савченко А.А., Борисов А.Г. Основы клинической иммунометаболомики. Новосибирск: Наука, 2012. 263 с.
34. Савченко А.А. / Иммунологические нарушения при распространенном гнойном перитоните/ Д.Э. Здзитоветский, А.Г. Борисов// Издательство «Наука» Новосибирск - 2009.
35. Савченко А.А., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом // Лаб. дело. 1989. №11. С. 23-25.
36. Савченко А.А., Смирнова С.В., Пыцкий В.И. Метаболические особенности лимфоцитов крови у больных истинной аллергией и псевдоаллергией // Аллергология и иммунология. - 2002. - Т.3, № 1. - С.180-187.
37. Сидорова Е.В. / В-1 лимфоциты. Происхождение, дифференцировка, функции // Успехи современной биологии. -2009.-Т. 129, № 1.-С. 27-38.
38. Тюлькова Н.А., Антонова Э.В. НАД(Ф)Н-реагент для биолюминесцентного анализа. - Красноярск: ИБФ, 1991. - С. 18.
39. Уразова О.И., Новицкий В.В., Помогаева А.П. и др. Структурно-метаболический статус мононуклеаров периферической крови при инфекционном мононуклеозе // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2001. - Т.131, № 5. - С.571-573.
40. Хайдуков С.В., Зурочка А.В., ТотолянАрег А., Черешнев В.А. Основные и малые популяции лимфоцитов переферической крови человека и их нормативные значения (методом многоцветного цитометрического анализа) // Мед. иммунология. - 2009. - Т. 11, № 2 - 3. - С. 227-238.
41. Ярилин А.А. Иммунология. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - С. 752.