Тема: Тестирование функциональной активности клеток моноцитарного ряда in vitro
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
📋 Содержание
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 6
1 Обзор литературы 6
1.1 Наночастицы и наноматериалы - использование в биологии и
медицине 6
1.2 Биологические эффекты наночастиц 14
2 Объекты и методы исследования 19
2.1 Объекты исследования 19
2.2 Методы исследования 19
2.2.1 Метод выделения и культивирования моноцитов и эритроцитов 19
2.2.2 Метод оценки жизнеспособности клеток (МТТ-тест) 20
2.2.3 Методы электронно-микроскопического исследования
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
📖 Введение
Наряду с цитотоксичностью (одним из основных «побочных» эффектов наноматериалов) очень серьезную опасность может представлять активация наночастицами и наноструктурированными материалами систем нерецепторного сигналинга и его эффекторных мишеней. Рецептор- независимый сигналинг - механо-химическая трансляция сигнала, зависящая от кривизны биомембраны. Физические силы, которые возникают в плазматической мембране в процессе интернализации частиц запускают наноразмерные деформации мембраны, которые затем транслируются в химический сигнал, активирующий каскад трансдукции. С системами нерецепторного сигналинга могут быть связаны неоднозначные эффекты наночастиц на липидный метаболизм, процессы дифференцировки и пролиферации клеток [1, 2, 3, 4, 5].
Наконец, биологические эффекты наноматериалов (в частности, их цитотоксичность) могут в значительной степени модифицироваться через формирование белковой «короны»: сорбции различных белков на поверхности наночастиц. Особенности белковой короны определяют пути интернализации, системы внутриклеточного сигналинга и эффекторные мишени: системы липидного метаболизма, окислительно-восстановительного гомеостаза, провоспалительных и антивоспалительных реакций [6, 8, 9, 11].
Цитотоксичность, нерецепторный сигналинг, формирование белковой короны лежат в основе неопределенности «побочных» эффектов наноматериалов и снижают их эффективность как терапевтических агентов и биоимплантов [4, 5, 7].
Это определяет востребованность систем эффективной оценки биологической активности наноматериалов in vitro, которые позволяют отбирать наиболее «безопасные» варианты нанокомпозитов и использовать их для дальнейшего функционального инжиниринга.
Кратковременная культура моноцитов (выделенных из периферической крови), как система скрининга наноматериалов, представляется наиболее оптимальным, биологически «оправданным» вариантом. Клиренс наночастиц, процессы биодеградации имплантов на основе нанокомпозитов in vivo зависят от функциональной активности системы моноцитов-макрофагов. Более того, простая хорошо воспроизводимая процедура выделения в перспективе позволяет использовать кратковременную культуру моноцитов для оценки индивидуальных особенностей биологических эффектов наноматериалов. Это тем более актуально потому, что функциональная активность моноцитов- макрофагов (например, соотношение фенотипов М1 и М2) in vitro значительно варьирует у разных доноров [4, 8, 10].
Как правило, в системах скрининга in vitro оценивается влияние исследуемых факторов на некоторые интегральные параметры: жизнеспособность и морфологию клеток. Анализ небольшой группы интегральных параметров вполне достаточен для решения конкретных промежуточных задач и выбора наиболее перспективной группы наноматериалов для дальнейшей функционализации.
В связи с этим изучали возможность использования кратковременной культуры моноцитов для оценки in vitro влияния различных типов биополимерных наноматериалов на жизнеспособность и морфологию клеток.
Целью работы было изучение влияния наноалмазов (НА) и фуллеренов (Ф) на структурно-функциональные особенности моноцитов и эритроцитов в условиях кратковременного культивирования in vitro.
Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
1. Выделение и культивирование моноцитов и эритроцитов in vitro в стандартных условиях и в присутствии наночастиц.
2. Оценка жизнеспособности клеток в различных условиях культивирования.
3. Изучение морфологии клеток в различных условиях культивирования.



