ВВЕДЕНИЕ 4
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ 6
1.2 ХАРАКТЕРИСТИКА БАКТЕРИИ STAPHYLOCOCCUS 8
1.4 ФАГОЦИТОЗ 12
1.5 ПОЛИОЗНЫЙ РИНОСИНУСИТ 18
2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.1 ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.2 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 21
2.2.1 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ 21
2.2.1.1 ВЫДЕЛЕНИЕ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ STAPHYLOCOCCUS AUREUS 21
2.2.1.2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ
STAPHYLOCOCCUS AUREUS 21
2.2.2 ВЫДЕЛЕНИЕ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ И МОНОЦИТОВ ИЗ
ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ 22
2.2.3 ОПРЕДЕЛЕНИЕ КИСЛОРОД-НЕЗАВИСИМОГО ФАГОЦИТОЗА 23
2.2.4 ОПРЕДЕЛЕНИЕ КИСЛОРОД-ЗАВИСИМОГО ФАГОЦИТОЗА 24
2.3 СТАТИСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 25
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ 26
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 38
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 39
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Полипозный риносинусит (ПРС) — хроническое воспалительное заболевание слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух, характеризующееся образованием и рецидивирующим ростом полипов, состоящих преимущественно из отечной ткани, инфильтрированной эозинофилами или нейтрофилами в зависимости от формы заболевания. Основным клиническим проявлением заболевания является образование и рецидивирующий рост полипов [1]. Полипы - это доброкачественные новообразования, которые располагаются на стенках полых органов, имеющих слизистую оболочку. На сегодняшний день до конца не известны точные причины появления полипов в носовой полости. Но установлены некоторые факторы: наличие грибковых инфекций, аллергические реакции в организме, хронические воспаления, которые сопровождаются гнойными выделениями из носа, муковисцидоз и даже наследственная предрасположенность. Полипозный риносинусит в большинстве случаев развивается в совокупности нескольких факторов и редко становится следствием, какой-то одного из этих причин. Одной из причин развития ПРС являются бактерии Staphylococcus aureus. Бактерии золотистого стафилококка являются своеобразными суперантигенами, которые способны поддерживать эозинофильный воспалительный процесс. Было обнаружено влияние энтероксина золотистого стафилококка на рост и развитие полипов, как суперантигена. Роль бактерий в этиологии заболевания подтверждает образование «нейтрофильных» новообразований или полипозного гнойного риносинусита [2].
Известно, что при стафилококковой инфекции киллинг бактерий осуществляется в основном с участием кислород-зависимой ферментной системы. При этом, как показывают результаты исследования, на этапах инициации инфекции реактивность этих бактерицидных систем зависит как от вида, так и от степени вирулентности возбудителя [3, 4].
Одной из главных систем защиты организма от чужеродных агентов является фагоцитоз, но играет важную роль при гнойно-воспалительных заболеваниях, особенно при стафилококковой инфекции, так как выполняет защитную функцию организма. Нейтрофильные гранулоциты и моноциты являются фагоцитирующими клетками, которые направлены на антибактериальную защиту, являются мощными эффекторами и запускают механизмы каскадных реакций, предотвращая развитие воспаления. Моноциты первыми мобилизуются в очаг воспаления и, от их фагоцитарной активности зависит элиминация возбудителя [4, 5, 6].
В связи с этим, актуальным является исследование фагоцитарной активности клеток крови у больных полипозным риносинуситом при воздействии бактерий устойчивых к метициллин-резистентным штаммам Staphylococcus aureus.
Таким образом, целью исследования является оценка фагоцитарной активности клеток крови больных полипозным риносинуситом при воздействии метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.
Для достижения данной цели, поставлены следующие задачи:
1. Определение первичных радикалов кислорода выделяемых нейтрофильными гранулоцитами и моноцитами крови при воздействии метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.
2. Определение вторичных радикалов кислорода выделяемых нейтрофильными гранулоцитами и моноцитами крови при воздействии метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.
3. Определение фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов крови при воздействии метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.
4. Определение фагоцитарной активности субпопуляций моноцитов крови при воздействии метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.
Исследование первичных радикалов кислорода показало активацию выработки АФК нейтрофильными гранулоцитами в спонтанной ХЛ реакции и при индукции MRSA штаммами относительно контрольной группы. Моноциты у больных полипозным риносинуситом активизируются, усиливая продукцию супер-оксидный-анион-радикала в спонтанной ХЛ реакции. Таким образом, наблюдаем активизацию работы моноцитов и нейтрофильных гранулоцитов уже в кровяном русле.
Исследование вторичных радикалов кислорода показало активацию процессов кислород-зависимого фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов у больных полипозным риносинуситом. При этом происходит повышение интенсивности выработки вторичных радикалов, таких как H2O2, .OH, 1O2, HClO, в спонтанном процессе усиление выработки вторичных радикалов моноцитами у больных полипозным риносинуситом в спонтанной реакции.
Исследование фагоцитоза показало снижение фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов крови у больных полипозным риносинуситом относительно контроля
Оценка активности субпопуляционного состава моноцитов при воздействии устойчивыми штаммами Staphylococcus aureus, относительно контрольной группы показала снижение, как фагоцитарного индекса, так и фагоцитарного числа провоспалительных и регуляторных моноцитов, а также фагоцитарного числа классических моноцитов.
Таким образом, фагоцитарное звено больных полипозным риносинуситом активизируется в ответ на метициллин-резистентные штаммы Staphylococcus aureus, как нейтрофильных гранулоцитов, так и моноцитов интенсивнее, чем у контрольной группы.
