Введение
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Активные формы кислорода - классификация и свойства 6
1.2 Перекисное окисление липидов 14
1.3 Антиоксидантная система 19
1.3.1 Структура, биосинтез и метаболизм церулоплазмина 20
1.3.2 Мочевая кислота: строение, свойства, биологическая роль 25
1.4 Физиологическая беременность 30
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 35
2.1 Объект исследования 35
2.2 Методы исследования 35
2.2.1 Определение содержания диеновых коньюгатов 35
2.2.2 Определение содержания малонового диальдегида 36
2.2.3 Определение содержания церулоплазмина в плазме крови методом
Ревина 37
2.2.4 Определение содержания мочевой кислоты 38
2.3 Статистическая обработка результатов 40
БЛАГОДАРНОСТИ 43
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 44
Известно, что при беременности практически во всех системах организма матери происходят серьёзные физиологические преобразования. Это сопровождается изменением энергетических запросов организма, удовлетворение которых критично для течения и исхода гестации. Увеличение потребления кислорода, необходимое, чтобы установить соответствие метаболизма энергетическим потребностям организма матери и плода, приводит к высокоинтенсивной продукции активных форм кислорода (АФК) и развитию окислительного стресса.
Одним из проявления силы и длительности окислительного стресса является активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ). Эти принимают участие в регуляции физико-химических процессов, протекающих в мембранах клеток и субклеточных структур. Доказано, что уровень продуктов ПОЛ в крови матери и плода является одним из показателей нормального или патологического течения беременности и развития плода. В качестве количественного маркера ПОЛ наиболее часто используется малоновый диальдегид (МДА) - один из продуктов процессов липопероксидации.
Физиологическая беременность сопровождается существенными изменениями в про/антиоксидантном статусе. Сравнительно недавно было показано, что некоторые белки плазмы крови проявляют свойства антиоксидантов. К этим белкам относятся церулоплазмин, альбумин, трансферрин и ферритин [3]. Антиоксидантные белки защищают, прежде всего, липопротеины плазмы крови, а также клетки крови от окислительного повреждения.
Церулоплазмин является основным медьсодержащим белком плазмы крови: он связывает 90-95% меди плазмы, естественным оксидативным регулятором, обладающий про- и антиоксидантной активностью. Антирадикальный эффект Цп объясняется его способностью связывать ионы металлов, снижая вероятность протекания реакций, генерирующих гидроксильные радикалы, а также супероксидные радикалы, высвобождающиеся при фагоцитозе.
К низкомолекулярным антиоксидантам плазмы крови относится мочевая кислота, которая действует как антиоксидант за счет связывания металлов c переменной валентностью, таких как железо. Замечена связь между антиоксидантными / восстанавливающими свойствами мочевой кислоты и ее физиологическими функциями.
Цель данной работы - оценить уровень продуктов перекисного окисления липидов и компонентов антиоксидантной системы в плазме крови беременных женщин.
Исходя из цели, были поставлены следующие задачи:
1. Определить содержание продуктов перекисного окисления липидов в плазме крови небеременных женщин;
2. Исследовать содержание диеновых конъюгатов и малонового диальдегида в плазме крови женщин в динамике беременности;
3. Оценить уровень церулоплазмина и мочевой кислоты в плазме крови здоровых небеременных женщин;
4. Определить содержание церулоплазмина и мочевой кислоты в плазме крови женщин в разные триместры беременности.
Работа выполнена на базе кафедры медицинской биологии ИФБиБТ Сибирского федерального университета и Хакасского центра планирования семьи (г. Абакан).
1 Золотухин, П.В. Окислительный стресс и беременность / П.В. Золотухин // Валеология. - 2010. - №2. - С. 16-20.
2 Бахтина, Т.П. Характеристика липидного обмена и перекисного окисления липидов у беременных с преэклампсией различной степени тяжести / Т.П. Бахтина, В.В. Ковалёв // Сибирский мед. журнал. - 2013. - №6. - С.73-76.
3 Холод В.М. Справочник по ветеринарной биологии / В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев. - Минск. - 1988. -166 с.
4 Завалко, А.Ф. Динамика показателей антиокислительной активности плазмы крови при физиологическом и патологическом течении I триместра беременности / А.Ф. Завалко, Э.Т. Нурмухаметова, В.В. Котельников // Вестник медицинского институра РЕАВИЗ. - 2015. - №1. - С. 28-31.
5 Васильева - Линецкая, Л.Я. Влияние лечебных физических факторов на оксидантную и антиоксидантную системы (лекция) / Л.Я. Васильева - Линецкая // Journal of Health Sciences. - 2013. - №3. - С. 48-66.
6 Мартиневич, Г.Г. Окислительно-восстановительные процессы в клетках: монография / Г.Г. Мартиневич, С.Н. Черенкевич. - Минск: БГУ. - 2008. -159 с.
7 Свободнорадикальные процессы в биосистемах / Т.Н. Попопва, А.Н. Пашков, Т.И. Рахманова, А.В. Семенихина.- Москва: Кириллица. - 2008. - 192.
8 Донцов, В.И. Активные формы кислорода как система: значение в физиологии, патологии и естественном старении / В.И. Донцов, В.Н. Крутько, Б.М. Мрикаев, С.В. Уханов // Информатика здоровья и долголетия: труды ИСА РАН. - 2006. - Т.19. - С.50-69.
9 Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский образовательный журнал. - 1999. - №1. - С. 2-7.
10 Осипов А.Н. Активные формы кислорода и их роль в организме / А.Н. Осипов, О.А. Азизова, Ю.А. Владимиров // Успехи соврем биологии. - 1990- Т.31. - C. 180-208.
11 Winterbourn, C. C. Free Radic. Biol. Med / Winterbourn C. C, Metodiewa D. 1999. - Vol. 27. - P. 322-328.
12 Fridovich, I. Free radicals in biology / I. Fridovich // New York: Acad. Press. - 1976. - P. 12-15.
13 Бодлырев, А.А. Антиоксидантные системы в тканях ускоренно стареющих мышей / А.А. Болдырев, М.О. Юнева // Биохимия. - 2001. - Т.6, №10. - С. 1157 - 1163.
14 Динамика антиоксидантного статуса больных с острым инфарктом миокарда на фоне ТЭС-терапии / Е.А. Губарева, А.Х. Каде, И.И. Павлюченко, А.А. Басов,
B. Г. Борисенко, М.О. Макарова // Санкт - Петербург, Материалы конференции: Актуальные проблемы ТЭС терапии. - 2008. - С. 132-136.
15 Ляхович, В.В. Активированные кислородные метаболиты в монооксидазных реакциях / В.В. Ляхович, В.А. Вавилин, Н.К. Зенков // Бюллетень СО РАМН. - 2005. - №4. - С. 7-12.
16 Герасимов, А.М. Тиолзависимое образование супероксидного радикала менадионом и викасолом / А.М. Герасимов, А.С. Захаров // Биохимия. - 1985. - Т. 83. - № 2. - с. 147 - 150.
17 Auchere, F. What is the ultimate fate of superoxide anion in vivo? / F. Auchere, F. Rusnak // J. Biol. Inord. Chem., 2005. - Vol. 7. - P. 664-667.
18 Антиоксидантное и антиагрегационное действие ковалентного биферментного конъюгата супероксиддисмутаза - хондроитинсульфат - каталаза на тромбоциты / А.В. Ваваев, Л.И. Бурячковская, Е.Г. Тищенко, И.А. Учитель, А.В. Максименко // Биомедицинская химия. - 2012. - Т. 58. - № 3. -C. 300-309.
19 Зенков, Н. К. Актированные кислородные метаболиты в биологических системах / Н.К. Зенков, Е.Б. Меньшикова // Успехи современной биологии. - 1993. - Т.113, №3. - С.286-296.
20 Безручко, Н.В. Каталаза биологических сред организма человека и её клинико-биохимическое значение в оценке эндотоксикоза / Н.В. Безручко, Г.К. Рубцов, Н.Б. Ганяева // Вестник ТГПУ. - 2012. - №7. - С. 94-96.
21 Янковский, О.Ю. Гидроскильный радикал - продукт и потенциальный эффектор кислородзависимой антимикробной системы лейкоцитов / О.Ю. Янковский, Ю.А. Эйсмонт // Вестник СПбГУ. - 2003. - №11. - С. 98-101.
22 Мошков, К.А. Церулоплазмин: внутримолекулярный перенос электронов и ферроксидазная активность / К.А. Мошков, В.Н. Зайцев, Е.В. Романовская // Fundamental research. - 2014. - №3. - С. 104-108.
23 Beckman, K.B. The free radical theory of ageing matures / K.B. Beckman, Ames B.N // Physiol. Rev. - 1998. - Vol. 78. - P. 547-581.
24 Maiorino, M. Prooxidant role of vitamin E in copper induced lipid peroxidation / M. Maiorino, A. Zamburlini, A. Roveri // FEBS Lett., 2005. - Vol. 330. - P. 174¬176.
25 Wasserman, H. H. Organic Chemistry: Singlet Oxygen / H. H. Wasserman, R. Murray // W N.Y.: Acad. Press. - 1979. - V. 40. P. 45-49.
26 Хавинсон В.Х. Свободнорадикальное окисление и старение / В.Х. Хавинсон, В.А. Баринов, А.В. Арутюнян и др. //СПб.: Наука. - 2003. - С.10-122
27 Нагорная, Н.В. Оксидативный сресс: влияние на организм человека, методы оценки [Электронный ресурс] / Н.В. Нагорная, Н.А. Четверик // Журнал «здоровье ребёнка». - 2010. - №2. - Режим доступа:http://www.mif- ua.com/archive/article/12762
28 Нестерова, И.В. Двойственная роль нейтрофильных гранулоцитов в реализации противоопухолевой защиты / И.В. Нестерова, С.В. Ковалёва, Г.А. Чудилова, Л.В. Ломтатидзе // Иммунология. - 2012. - Т.33. - С.124-151.
29 Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / В.З. Ланкин // Кардиология. - 2000. - № 7. - С. 48-57
30 Kelly, S.A. Oxidative stress in toxicology: established mammalian and emerging piscine model systems / S.A. Kelly, C.M. Havrilla, T.C. Brady, K.H. Abramo, E.D. Levin // Environ Health Perspect. - 1998. - Vol. 106. - P. 375-384.
31 Yu, B.P. Cellular defenses against damage from reactive oxygen species / B.P. Yu // Physiol. Rev. - 1994. - Vol. 74. - P. 139-162.
32 Узбеков, М.Г. Перекисное окисление липидов и антиоксидантные системы при психических заболеваниях. Сообщение II. / М.Г. Узбеков // Социальная и клиническая психиатрия. - 2015. - Т. 25, №4. - С. 92-95
33 Gutteridge, J. M. C. Lipid peroxidation and antioxidation as biomarkers of tissues damage / J. M. C. Gutteridge // Clinikal Chemistry, 2005. - Vol. 41, №12. - P. 1819-1828
34 Перекисное окисление липидов [Электронный ресурс] // Медицинская энциклопедия «NedugRu». - 2013. - Режим доступа:
http://www.nedug.ru/library/nерекисное_окисление_лиnиgов.
35 Попова, Ю.А. Состояние процессов перекисного окисления липидов, антиоксидантной системы и липидного обмена сыворотки крови беременных, больных хронической герпес-вирусной инфекцией / Ю.А. Попова // ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Бюллетень. - 2003. - №14. - С. 19-21.
36 Суханова, Т.А Патохимия клетки / Т. А. Суханова // Успехи соврем. биологии, 2004. - Т. 40. - С. 82-104.
38 Воскресенский, О. Н. Перекиси липидов в живом организме / О. Н. Воскресенский, А. П. Левицкий // Вопросы медицинской химии, 2003. - Т. 16, №6. - С. 563-583.
39 Милентьева, И.С. Изучение процесса перекисного окисления липидов в модельной системе микроорганизмов / И.С. Милентьева, С.А. Сухих, Л.А. Астахова // Science time. - 2015. - №5. - С. 272 - 276.
40 Michiels, C. Cytotoxicity of linoleic acid peroxide, malondialdehyde and 4- hydroxynonenal towards human fibroblast / C. Michiels, J. Remacle // Toxicology, 2004. - Vol. 66. - №2. - P. 225-234.
41 Чеснокова, Н.П. Общая характеристика источников образования свободных радикалов и антиоксидантных систем / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина, М.Н. Бизенкова // Успехи современного естествознания. - 2006. - №7. - С. 37-40.
42 Луцкий, М.А. Активность эндогенной системы антиоксидантной защиты в процессе жизнедеятельности организма / М.А. Луцкий, Т.В. Кускова, М.А.Смелянец, Ю.П. Лушникова // Advances in current natural sciences. - 2014. - №12. - С. 20-23
43 Максименко, А.В. Внеклеточное оксидативное поражение сосудистой стенки и её ферментная антиоксидантная защита / А.В. Максименко // Химико-фармацевтический журнал. - 2007. - Т.41, №5. - С. 3-10
44 Бурлаков, Е.Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте / Е.Б. Бурлаков, А.В. Алесенко, Е.М. Малочкина и др.// Москва: Наука. - 1975. - 211 с.
45 Holmberg, C.G. Investigation in serum copper. III. Coeruloplasin as an enzyme / C.G. Holmberg, C-B. Laurell // Acta. Chem. Scand. - 1951. - V. 5, No. 3. - Р. 476¬480.
46 Вавилова Т.П. Роль Церулоплазмина при развитии неопластических процессов / Т.П. Вавилова, Ю.Н. Гусарова, О.В. Королева, А.Е. Медведев // Биомедицинская химия. - 2005. - Т. 51, Вып. 3. - С.263-275.
47 Мжельская Т.И. Биологические функции церулоплазмина и их дефицит при мутациях генов, регулирующих обмен меди и железа / Т.И.Мжельская // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 2000. - Т.130, №8. - С. 124-133.
48 Ермолаева, Е.Н. Церулоплазмин - эндогенный регулятор функционального состояния тромбоцитов / Е.Н. Ермолаева, Л.В. Кривохижина, С.А. Кантюков, В.П. Яковлева // Fundamental research. - 2014. - № 7. - С.492-495.
49 Назаров П.Г. Реактанты острой фазы воспаления / П.Г.Назаров. - СПб.: Наука, 2001. - 423с.
50 Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: Т.2 / В.С. Камышников. - Минск, 2000. - 463с.
51 Крайнова, Т.А. Исследование специфической оксидазной активности сывороточного церулоплазмина у беременных женщин / Т.А. Крайнова, Ю.В. Морозова, Л.М. Ефремова, Л.А. Шерер // Биомедицинская химия. - 2005. - Т.51, №6. - С. 673 - 678.
52 Алексеева Н.Н. Изменение активности Церулоплазмина в сыворотке крови под воздействием различных факторов / Н.Н.Алексеева // Гигиена и санитария.- 1991. - N2. - С.70-71.
53 Ващенко, В.И. Церулоплазмин - от метаболита до лекарственного средства / В.И. Ващенко, Т.Н. Ващенко // Психофармакология и биологическая наркология. - 2006. - Т.6, №3. - С. 1254-1266.
54 Aiser P. Transerrin and Iron Transport Physiology [Электронный ресурс]/ P.
Aisen, L. Listowsky. - Mediasfera, 2000. - Режим доступа:
http: //www.partners .org/bwh.
55 Lapin A. Soluble transferrin receptor [Электронный ресурс] / A. Lapin. - PAMLD, 2001. - Режим доступа:http://www.ramld.ru.articles.files-lapin.1.jpg.files.
56 Василенко, Ю.А. Изменение обмена меди в печени адреналэктомированных крыс / Ю.А. Василенко, Е.Ю. Ильичёва, Е.А. Затуловский, П.С. Бабич // Доклады академии наук. - 2012. - Т.445, №5. - С. 597-601.
57 Берлинских, Н.К. Антиоксидантное и иммуномоделирующее воздействие церулоплазмина при экспериментальной гриппозной инфекции /Н.К. Берлинских, З.Д. Савцова,. О.А. Санина // Бюлл. экспер. биол. - 1994. - Т. 118, №9.- С. 285-287.
58 Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестн. РАМН. - 1998. - №7. - С.43-51.
59 Becker, B. Towards physLologLcal functLon of urLc acLd / B. Becker // Free RadLc BLol Med. - 1993. - V. 14. - P. 615-631.
60 Галунска, Б. Двуликий янус биохимии: мочевая кислота - оскидант или антиоксидант / Б. Галунска, Д. Паскалев, Т. Янкова, П. Чанкова // Нефрология.- 2004. - Т.8, №.4. - С.25-30.
61 Модуль 10. Обмен пуринов [Электронный ресурс] / Справочная система VMedeOrg: Сообщество студентов Кировской ГМА. - 2011.
62 Кит, О.И. Гендерные отличия содержания пуринов в плазме и эритроцитах людей разного возраста / О.И. Кит, Е.М. Франциянцс, И.В. Каплиева, Л.К. Трепитаки // Fundamental research. - 2014. - №7. - С. 290-294.
63 Берёзов, Т.Т. Биологическая химия: учебник / Т.Т. Берёзов, Б.Ф. Коровкин: под общ. ред. С.С. Дебова. Москва: Медицина. - 1983. -752 с.
64 Поздняков, И.М. Мочевая кислота и железо сыворотки крови при беременности, осложнённой артериальной гипертензией / И.М. Поздняков, А.В. Ширинская // Бюллетень СО РАМН. - 2013. - Т. 33, №. 4. - С. 85-87.
65 Титов, Н.В. Физико-химическая активность мочевой кислоты. Гиперурикемия - нарушение биологических функций эндоэкологии и адаптации, биологических реакций экскреции, воспаления и гидродинамического артериального давления / Н.В. Титов, В.А. Дмитриев, О.В. Гущина, Е.В. Ощепкова // Успехи современной биологии. - 2011. - Т.131, №5. - С. 483 - 502.
66 Товчига, О.В. Мочевая кислота и деятельность центральной нервной системы (Обзор литературы) / О.В. Товчига, С.Ю. Штрыголь // Журнал общей биологии. - 2013. - Т.74, №4. - С.269-278.
67 Зарайкина О.А. Активность супероксиддисмутазы и каталазы в эритроцитах крови онкологических больных / О.А. Зарайкина.- Дипломная работа - 2003.
68 Стрюк, Р.И. Профилактика и лечение нарушений кальций - фосфорного обмена при беременности / Р.И. Стрюк // Клиницист. - 2008. - №2. - С. 51-54.
69 Олемпиева, Е.В. Молекулярные аспекты формирования окислительного стресса у женщин с физиологическим течением беременности / Е.В. Олемпиева, Т.Д. Коваленко, И.А. Логинов, Л.Н.Гришина // Медицинский альманах. - 2013. - №3. - С. 44-45.
70 Колесникова, Л.И. Окислительный стресс как неспецифическое патогенетическое звено репродуктивных нарушений (обзор) / Л.И. Колескникова, Л.А. Гребёнкина, М.А. Даренская, Б.Я. Власов // Бюллетень СО РАМН. - 2012. - Т. 32, №1. - С. 58-62.
71 Александрова, А.А. Геномные и постгеномные маркеры развития плаценты и плода: учебно-метод. пособие / А.А. Александрова, Л.В. Гутникова, Е.Г.Деревянчу; Мин-во образования и науки РФ «Южный Фед. Университет». - 2011.
72 Арутюнян, А.В. Роль кислорода и его метаболитов в развитии плаценты / А.В. Арутюнян, А.В. Шестопалов, М. Акуева // Журнал акушерства и женских болезней. - 2008. - Т.57, №4. - С. 115-118.
73 Burton, G. J. Oxygen, early embryonic metabolism and free radical-mediated embryopathies / G. J. Burton, J. Hempstock, E. Jauniaux // Reprod. Biomed.Online. - 2003. - Vol. 6, N 1. - P. 84-96.
74 Храмова, И.А. Секреторно - синтетическая активность моноцитов/ макрофагов и экспрессия рецепторов к половым гормонам в эндометрии / И.А. Храмова, Е.Е. Слюсарева, В.С. Каредина // Фундаментальные исследования. - 2014. - №4. - С. 182-183.
75 Ширшев, С.В. Влияние прогестерона на фагоцитарную и окислительную активость моноцитов и нейтрофилов / С.В. Ширшев, Е.М. Куклина, А.В. Баженова // Вестник Пермского университета. - 2008. - Вып. 9 (25). - С. 87-90.
76 Щуров, В.А. Оценка уровня неконъюгированного эстриола при патологии беременности / В.А. Шуров, Н.О. Могеладзе // Научно - практический журнал «Клинико-лабораторный консилиум». - 2011. - № 2. - С.73-75.
77 Довжикова, И.В. Эстрогены при осложнённой герпетической инфекцией беременности ранних сроков / И.В. Довжинова, М.Т. Луценко, И.А. Андриевская // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2012. - №2 (84). - С. 22-25.
78 Титова, Н.М. Оценка структурно-функционального состояния клетки: метод. указания к практическим занятиям / Н.М. Титова, Т.М. Замай, Т.Н. Субботина, А.А. Савченко // Красноярск: ИПК СФУ. - 2009. - 60 с.
79 Медведев, Л.Н. Биометрия: практическое руководство по математическому статистическому анализу биомедицинских данных. / Л.Н. Медведев // Красноярск: РИО ГОУ ВПО КГПУ им. В.П. Астафьева - 2004. - 326 с.
80 Банкова, В.В. Деградация малонового диальдегида в эритроцитах и ее возрастные, сезонные и суточные изменения / В. В. Банкова, Т. М. Никанорова // Вопр. мед. Химии, 1988. - № 6. - С. 27-29.
81 Низамова, Э.И. Перекисное окисление липидов гормональный профиль крови у перенесших факторы боевого стресса больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки в процессе медицинской реабилитации / Э.И. Низамова,, А.Р. Гильмутдинов, А.Г. Саханов //Башкирский химический журнал. - 2006. - Т.13, №2. - С. 61 - 64.
82 Соловьева, А. Г. Активность альдегиддегидрогеназы в эритроцитах, тромбоцитах и плазме крови крыс в норме и при ожоге / А. Г. Соловьева // Успехи соврем. Естествознания, 2007. - №12. - С. 12-15.
83 Качалина, Т. С. Прогностическая значимость определения церулоплазмина в третьем триместре беременности [Электронный ресурс] / Т. С. Качалина, Т. А. Морозова, 2006. - Режим доступа: http: www.iprit.ru/ chemical agents action=1179.
84 Кан, Д.В. Изменения мочевой системы при беременности [Электронный ресурс] / Д.В. Кан - Медицинский справочник, 2006. - Режим доступа: http://www.uroweb.ru/catalog/med_lib/uro_gin_kan/chapter03_02.htm.