ВВЕДЕНИЕ 3
1 Обзор литературы 5
1.1 Диффузный токсический зоб (болезнь Грейвса) 5
1.1.1 Патогенез ДТЗ 6
1.2 Механизмы развития аутоиммунных реакций 7
1.2.1 Антитело-опосредованный лизис 7
1.2.2 Толерантность 8
1.2.4 Общие механизмы 9
1.3 Нейтрофилы 9
1.3.1 Общие сведения о нейтрофилах 9
1.3.2 Функция нейтрофилов 12
1.3.3 Респираторный (кислородный) взрыв 13
2 Материалы и методы 15
2.1 Объект исследования 15
2.2 Методы исследования 15
2.2.1 Выделение нейтрофилов из цельной крови 15
2.2.2 Оценка хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов
крови 16
2.2.3 Биолюминесцентный метод определения активности НАД(Ф)-зависимых
дегидрогеназ в нейтрофилах 17
2.2.4 Определение концентрации гормонов в плазме крови 21
2.2.5 Статистические методы исследования 21
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 24
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 27
Актуальность темы. Диффузный токсический зоб является одним из наиболее часто встречающихся аутоиммунных заболеваний - его распространенность достигает 0,1% населения [1]. в регионах с адекватным йодным обеспечением у 1% населения имеется или имелся ДТЗ [2]. В течение последних десятилетий отмечается неуклонный рост распространенности заболеваний щитовидной железы (тиреоидная патология является наиболее частой в структуре эндокринных заболеваний) [1]. Болеют преимущественно женщины (в 5 раз чаще мужчин) молодого возраста, пик заболеваемости приходится на возраст между 25 и 40 годами. Даже субклинический тиреотоксикоз у лиц старше 60 лет сопровождается увеличением, как общей смертности, так и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний [1,2]. В связи с этим изучение патогенеза ДТЗ и его осложнений является чрезвычайно актуальным.
В патогенезе ДТЗ ведущая роль, несомненно, принадлежит нарушениям иммунной системы и наиболее реактивными клетками этой системы являются нейтрофильные гранулоциты.
Целью работы явилось изучение состояния метаболизма и функциональной активности нейтрофилов крови больных диффузным токсическим зобом.
На основании поставленной цели были определены следующие задачи:
1. Определить особенности хемилюминесценции нейтрофилов в крови при ДТЗ;
2. оценить уровень тиреоидных гормонов при ДТЗ;
3. оценить взаимосвязь хемилюминесцентной активности нейтрофилов и уровня тиреоидных гормонов в норме и при ДТЗ;
4. исследовать уровень активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ нейтрофилов в норме и у больных ДТЗ;
5. оценить взаимосвязь ферментативной активности нейтрофилов уровня тиреоидных гормонов в норме и при ДТЗ.
1. Кандрор, В. И. Механизмы развития болезни Грейвса и действия тиреоидных гормонов / В. И. Кандрор// Клиническая и экспериментальная тиреоидология. - 2008. - №1. - С. 26-34.
2. Фадеев, В. В. Болезнь Грейвса: диагностика, современные средства лечения / В. В. Фадеев, Г. А. Мельниченко // Врач. - 2005. - № 12. - С. 35-39.
3. Эндокринология: национальное руководство / под. ред. И. И. Дедова, Г. А. Мельниченко. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 1072 с.
4. Вольпе, Р. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы / Р. Вольпе // Болезни щитовидной железы; под. ред. Л. И. Бравермана. - Москва: Медицина, 2000. - С. 140-165
5. Котова,Г.А. Диффузный токсический зоб: учебник / Г.А.Котова // Клиническая эндокринология. - Питер: 2002.- С. 131-150.
6. Глазанова, Т. В. Сравнительная характеристика иммунных нарушений у больных диффузным токсическим зобом и аутоиммунным тиреоидитом / Т. В. Глазанова, Л. Н. Бубнова // Клиническая эндокринология - достижения и перспективы: сб. науч. тр. - СПб., 2003. - С. 169-170.
7. Уитман, Э. Этиология, диагностика и лечение болезни Грейвса / Э. Уитман // Thyroid International. - 2003. - №2. - С. 68-86.
8. Колода, Д. Е. Антитела к рецептору тиреотропного гормона в диагностике и лечении болезни Грейвса-Базедова / Д. Е. Колода, В. В. Фадеев // Проблемы эндокринологии. - 2005. - №2. - С. 8-14.
9. Балаболкин, М. И. Фундаментальная и клиническая тироидология / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова, В. М. Креминская. - Москва: Медицина, 2007. - 816 с.
10. Variation in phenotypic appearance of Graves' disease: effect of genetic anticipation and duration of complaints / X. G. Vos, N. Smit, E. Endert // Eur. J. Endocrinol. - 2009. - Vol.161, № 1. - P. 113-118.
11. Abbas, A. K. Knoechel B and Nagabhushanam T cell tolerance and autoimmunity / A.K.Abbas, J. Lohr // Autoimmunity Reviews. - 2004. - Vol 3. - P. 471-475.
12. Бубнов, А. Н. Иммунологические и иммуногенетические особенности аутоиммунных заболеваний щитовидной железы / А. Н. Бубнов, Т. В. Глаза- нова, Ю. Н. Федотов // Материалы IV Всероссийского тиреодологического Конгресса. - Москва, 2007. - С. 26.
13. Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз. - Москва: Мир, 2006. - 320 c.
14. Геворкян, А. Г. Сравнительная характеристика показателей иммунного статуса больных диффузным токсическим зобом и аутоиммунным тиреоидитом / А. Г. Геворкян // Вестник новых медицинских технологий. - 2007. - № 3. - С.155-156.
15. Hart, D.N. Dendritic cells: unique leukocyte populations, which control the primary immune response / D.N. Hart. // Blood. - 1997. - Vol. 90. - P. 3245¬3287.
16. Katzenback, B.A. Isolation and functional characterization of neutrophil-like cells, from goldfish kidney // Dev. Comp. Immunol. - 2009. - Vol.33. - P. 601¬611.
17. Baldridge, C.W. The extra respiration of phagocytosis //Am. J. Physiol. - 1933. - Vol.103. - P. 235-236.
18. Babior, B.M. Biological Defense Mechanisms. The production by leukocytes of superoxide, a potential bactericidal agent / B.M. Babior, R.S.Kipnes, J.T. Curnutte // Clin. Investig. - 1973.- Vol.53. - P. 741-744.
19. Briggs, R. Localization of NADH oxidase on the surface of human polymorphonuclear leukocytes by a new cytochemical method /R. Briggs, D.B Drath, M.L. Karnovsky, M.J. Karnovsky // J. Cell Biol. 1975. - Vol. 67. - P. 566-586.
20. Boltana, S. Characterization and expression of NADPH oxidase in LPS-, poly(I:C)- and zymosan-stimulated trout (Oncorhynchus mykiss W.) macrophages/ S. Boltana, C. Donate, F.W. Goetz, S. MacKenzie, J.C. Balasch //Fish Shellfish Immunol. - 2009. - Vol. 26. - P. 651-661.
21.Inoue, Y. Molecular cloning and sequencing of Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) NADPH oxidase cDNAs / Y. Inoue, Y.Suenaga, Y. Yoshiura, T.Moritomo, M.Ototake, T. Nakanishi // Dev. Comp. Immunol.- 2004. - Vol 28. - P. 911-925.
22. Савченко, А.А. Клиническое состояние и хемилюминисценчиская активность нейтрофильных гранулоцитов больных распространенным гнойный перитонитом в динамике послеоперационного периода/ Черданцев Д.В., Первова О.В., Гвоздев И.И., А.Г.Борисов, В.А. Шапкина //Бюллетень сибирской медицины - 2014. - Т. 13, № 6. - C. 10-19.
23. Савченко,А.А. Высокочувствительное определение активности
дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолюминесцентным методом/ А.А.Савченко, Л.Н. Сунцова // 1989. - №11.- С. 23-25.
24. Тюлькова, Н. А. НАД(Ф)-Н-реагент для биолюминесцентного анализа / Н.А.Тюлькова, Э.В. Антонова. - Красноярск: ИБФ, 1991. - 17с.
25. Березов, Т.Т. Биологическая химия: учебник / Т.Т Березов, Б.Ф. Коровкин. - Москва: Медицина,1998. - 704 с.
26. Егоров, А.М. Теория и практика иммуноферментного анализа / А.М. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова. - Москва: Высш.шк., 1991. - 288 с.
27. Thyroid hormone state and quality of life at long-term follow-up after ran¬domized treatment of Graves' disease / M. Abraham-Nordling, G. Wallin, G. Lundell // Eur. J. Endocrinol. - 2007. - Vol.156, № 2. - P. 173-179.
28. Куртасова, Л.М. Иммунологические показатели и ферментный профиль лимфоцитов крови у часто болеющих детей раннего возраста / Л.М. Куртасова, Т.В. Лубнина // Эпидемиология и инфекционные болезни. -2012.- №5.-С22-25
29. Elliott W. Biochemistry and Molecular Biology. Second edition. -Oxford: University Press [Electronic resource]. - Mode of access:www.pdffactory.com
30. Jeong, D.W. Effects of lactate dehydrogenase suppression and glycerol-3- phosphate dehydrogenase overexpression on cellular metabolism/ D.W. Jeong,
I. T. Cho, T.S. Kim // Mol. Cell. Biochem. -2009. -Vol. 284, № 1-2. -P. 1-8.
31. Perez, A. Molecular mechanisms involved in the enhancement of mitochondrial malate dehydrogenase activity by calcitriol in chick intestine/ A.Perez, V.A. Centeno, N.G. Tolosa de Talamoni // Nutr. Biochem. -2010. -Vol. 21, № 12. -P. 1232- 1237.
32. Kim, S.Y. Modulation of hypoxia-inducible factor-1a expression by mitochondrial NADP+-dependent is citrate dehydrogenase/ S.Y. Kim, J.W. Park // Biochimie. -2010. - Vol. 92, № 12. -P. 1908-19013.
33. Tomer, Y. The etiology of autoimmune thyroid disease: a story of genes and environment / Y. Tomer, A. Huber // J. Autoimmun. - 2009. - Vol. 32, № 3-4. - P. 231-239.
34. Yamauchi, M. Thyroid hormone activates adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase via intracellular calcium mobilization and activation of calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase-beta / M. Yamauchi, F. Kambe, X. Cao// Mol. Endocrinol. - 2008. - Vol. 22, № 4. - P. 893-903.
35. Park, I. Increase in Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase in Adipocytes Stimulates Oxidative Stress and Inflammatory Signals/ I.Park, S.C. Choe, A.H. Choi //Diabetes. - 2006. - Vol. 55. — P. 2939-2949
36. Provinciali, M. Recovery of spleen cell natural killer activity by thyroid hormone treatment in old mice / M. Provinciali, M. Muzzioli, G. Di Stefano, N. Fabris //Nat. Immun. Cell. Growth Regul. - 1991. - Vol.10. - P. 226-236.
37. Ikemoto, A. Glycolysis and Glutamate Accumulation into Synaptic Vesicles. Role of glyceraldehydes phosphate dehydrogenase and 3-phosphphoglycerate kinase //J Biol Chem. - 2003. - Vol. 278, № 8. - P. 5929-5940.
38. Zhou, H. Vitamin D receptor (VDR) gene polymorphisms and Graves' disease: a meta-analysis / H. Zhou, C. Xu, M. Gu // Clin. Endocrinol. (Oxf). - 2009. - Vol.70, № 6. - P. 938-45.
39. Кравец, Е.Б. Клинические лекции по детской эндокринологии. - Томск, 2004. - 364 с.
40. Петунина, Н.А. Клиника, диагностика и лечение аутоиммунного тиреоидита // Проблемы эндокринологии. - 2002. - Т. 48, № 6. - С.1621.