ВВЕДЕНИЕ 3
1. Литературный обзор 5
1.1 Общая характеристика пестицидов 5
1.2 Распространение и действие пестицидов в почве 6
1.3 Полимеры в качестве разрушаемой основы для доставки
гербицидов 10
1.4 Биологическая деградация ПГА 13
1.5 Системы доставки на основе ПГА 15
2. Материалы и методы 18
2.1 Характеристика метрибузина 18
2.2 Характеристика экспериментальных форм гербицида 18
2.3 Лабораторные почвенные микроэкосистемы 19
2.4 Микробиологические исследования 21
3. Результаты и обсуждения 23
3.1 Влияние метрибузина на почвенную микрофлору 23
3.2 Влияние различных форм доставки метрибузина в почву на ризосферную микрофлору 25
3.3. Гербицидное действие различных форм метрибузина на тестовые растения 30
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 32
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 33
ПРИЛОЖЕНИЕ
На протяжении долгого времени полимерные изделия являются важной частью повседневной жизни. Сфера применения изделий, изготовленных из полимеров, широко распространена от биоматериалов для протезирования до материалов, используемых в аэрокосмической промышленности. В области сельского хозяйства полимеры также широко используются, для создания упаковок продуктов, укрывных материалов, сеток, кантов, горшечной продукции и много другого [15].
Однако при использовании синтетических полимеров, появляется проблема утилизации использованных продуктов. В настоящее время эта проблема решается с помощью биоразлагаемых полимеров, в том числе полигидроксиалканоатов (ПГА). Биоразлагаемые полимеры в биологически активных средах, деградируют с помощью ферментных систем микроорганизмов, таких как бактерии, грибы, и водоросли. Биоразлагаемые полимеры все чаще используются как заменители пластмасс в некоторых областях сельского хозяйства [26].
Чрезвычайно важной областью применения биоразлагаемых полимеров является создание систем контролируемой доставки агрохимикатов. При переходе с экстенсивных на интенсивные методы ведения сельского хозяйства агрономы стали активно использовать различные химические препараты для борьбы с насекомыми-вредителями, сорняками и болезнями культивируемых видов растений. Классическое использование химикатов в агрокультуре в жидком и порошкообразном виде не всегда обеспечивает адресную доставку препарата и приводит к нежелательным побочным эффектам, таким как их включение в пищевые цепи, а также их распространение и накопление в окружающей среде. Этот факт, конечно же, противоречит всемирной борьбе за охрану окружающей среды. Пестициды, обладающие мутагенным и канцерогенным действием, попав в организм человека, могут нанести вред здоровью [18].
Разработка препаратов с адресным и контролируемым выходом действующего вещества, сократит возможность распространения и аккумуляции поллютантов в биосфере. Проводятся различные исследования по созданию таких препаратов с разнообразными типами полимеров (поликапролактон, этилцеллюлоза, полилактид, альгинат, лигнин) [33]. В том числе проводились исследования по применению ПГА в качестве носителя для инсектицидов и гербицидов в форме объёмных матриксов, плёнок и микрогранул [45].
Поскольку микроорганизмы являются основными деструкторами как природных, так и химически синтезированных веществ в почве, целью настоящей работы явилось исследование влияния традиционных и депонированных форм гербицида метрибузина на почвенную микрофлору.
В задачи исследования входило:
1. Исследовать влияние различных концентраций гербицида на примере метрибузина на почвенную микрофлору.
2. Сравнить степень влияния метрибузина на почвенную микрофлору при различных способах его доставки: в традиционной форме и депонированный в поли-3-гидроксибутират.
3. Оценить гербицидное действие метрибузина на тестовые растения при разных способах доставки.
1. При внесении препарата метрибузина в почву в концентрации 3.0, 7.5 и 15.0 мг/г численность всех исследованных эколого-трофических групп микроорганизмов достоверно снижалась при длительном воздействии гербицида (60 суток); коэффициенты минерализации и олиготрофности также уменьшились.
2. Внесение различных концентраций коммерческого препарата метрибузина Зенкор Ультра в традиционной форме в лабораторные почвенные экосистемы с высшими растениями в большинстве случаев достоверно не изменяло численность микроорганизмов в ризосфере тестовых растений.
3. Внесение депонированных форм метрибузина П(3ГБ)/МЕТ увеличивало общий титр микроорганизмов по сравнению с контрольной почвой в большинстве случаев, независимо от уровня нагрузки формы метрибузином, что может быть связано с поступлением П(3ГБ) как дополнительного источника углеродного питания.
4. Гербицидное действие депонированного метрибузина на тестовые растения усиливалось с ростом концентрации препарата в форме и длительности воздействия. На 10-е сутки все экспериментальные формы не уступали коммерческому препарату Зенкор Ультра, а на 30-е превосходили его по эффективности.
1) Бояндин, А. Н. Биодеградация полигидроксиалканоатов почвенными микробиоценозами различной структуры и выявление микроорганизмов деструкторов / А. Н. Бояндин, С. В. Прудникова, М. Л. Филипенко, Е. А. Храпов, А. Д. Васильев, Т. Г. Волова // Прикладная биохимия и микробиология. - 2012. - Т. 48, № 1. - С. 35-44.
2) Волова, Т. Г. Биоразрушаемые биополимеры: получение, свойства, применение : монография / Т. Г. Волова, Е. И. Шишацкая. — Красноярск: Красноярский писатель, 2011. - 400 с.
3) Горбатова, О. Н. Триазиновые пестициды: структура, действие на живые организмы, процессы деградации / О. Н. Горбатова, А. В. Жердев, О. В. Королева // Успехи биологической химии. - 2006. - Т.46, № 2. - С. 323-348.
4) Иванцова, Е. А. Влияние пестицидов на микрофлору почвы и полезную биоту : Вестник Волгоградского государственного университета. Сер. 11, Естественные науки. - 2013. - № 1. - С. 35-40.
5) Коваленко, Л. В. Определение суммарной токсичности почвы корневой системы и конечной продукции при применении химических средств защиты растений: методика и результаты / Л. В. Коваленко, В. Т. Минее, Е. Х. Ремпе, Л. П. Воронина // Вестник с.-х. науки. - 1991. - № 6. - С. 63-71.
6) Круглов, Ю. В. Микрофлора почвы и пестициды : учебное пособие / Ю. В. Круглов. - Москва : Агропромиздат, 1991. - 128 с.
7) Куликова, Н. А. Гербициды и экологические аспекты их применения : учебное пособие. / Н. А. Куликова, Г. Ф. Лебедев. - Москва : Либриком, 2010. - 153 с.
8) Леонова, А. А. Миграция метрибузина в почвах: лизиметрические исследования и моделирование : дис. ... канд. биологических наук: 06.01.03 / Леонова Анна Александровна. - Москва, 2001. - 140 с.
9) Мельников, Н. Н. Химия пестицидов : учебное пособие. / Н. Н. Мельников. - Москва : Химия, 1968. - 494 с.
10) Нетрусов, А. И. Микробиология : учебник / А. И. Нетрусов, И. Б. Котова. - Москва : Академия , 2005. - 343 c.
11) Прудникова, С. В. Экологическая роль полигидроксиалканоатов - аналога синтетических пластмасс: закономерности биоразрушения в природной среде и взаимодействия с микроорганизмами : учебное пособие / С. В. Прудникова, Т. Г. Волова. - Красноярск : Красноярский писатель, 2012. - 184 c.
12) Сметник, А. А. Миграция пестицидов в почвах / А. А. Сметник, Ю. Я. Спиридонов, Е. В. Шеин. - Москва : РАСХН - ВНИИФ Москва, 2005. - 327 с.
13) Федоров, А. А. Пестициды - токсический удар по биосфере и человеку / А. А. Федоров, А. В. Яблоков. - Москва : Наука, 1999. - 285 с.
14) Шутко, А. П. Рынок средств защиты растений в мире и России: тенденции, динамика, прогнозы / А. П. Шутко, А. Г. Долгова // Международный студенческий научный вестник. - 2015. - № 2. - 14 с.
15) Akelah, A. Applications of functionalized polymers in agriculture / A. Akelah // J. Islam. Acad. Sci. - 1990. - Vol. 3. - P. 49-61.
16) Boutin, O. Co-precipitation of a herbicide and biodegradable materials by the supercritical anti-solvent technique // O. Boutin, E. Badens, E. Carretier, G. Charbit // The Journal of supercritical fluids. - 2004. - Vol. 31. - P. 89- 99.
17) Celis, R. Controlled pesticide release from biodegradable polymers / R. Celis, M. C. Hermosin, M. J. Carrizosa, J. Cornejo // J. Agric. Food Chem. - 2002. - Vol. 6. - Р. 453-469.
18) Damalas, С. A. Pesticide exposure, safety issues, and risk assessment indicators / С. A. Damalas, I. G. Eleftherohorinos // Int. J. Environ. Res. Public Health. - 2011. - Vol. 8. - Р. 1402-1419.
19) Dave, A. M. A review on controlled release of nitrogen fertilizers through polymeric membrane devices / A. M. Dave, M. H. Mehta, T. M. Aminabhavi, A. R. Kulkarni, K. S. Soppimath // Polymer Plastics Technology and Engineering. - 1999. - Vol. 38. - Р. 675-711.
20) Doi, Y. Biodegradation of microbial poly(hydroxyalkanoates) / Y. Doi, Y. Kanesawa, N. Tanahashi // Makromol. Chem. Rapid. Commun. - 1989. - Vol. 10. - Р. 227-230
21) Fedtke, C. Biochemistry and physiology of herbicide action / C. Fedtke. - Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 1982. — 204 p.
22) Fernandez-Perez, M. Lignin-polyethylene glycol matrices and ethylcellulose to encapsulate highly soluble herbicides / M. Fernandez-Perez, M. Villafranca-Sanchez, F. Flores-Cespedes, I. Daza-Fernande // J. Appl. Polym. Sci. - 2015. - Vol. 132.
23) Flores-Cespedes, F. Bentonite and anthracite in alginate-based controlled release formulations to reduce leaching of chloridazon and metribuzin in a calcareous soil / F. Flores-Cespedes, S. Perez-Garcia, M. Villafranca-Sanchez, M. Fernandez- Perez // Chemosphere. - 2013. - Vol. 92. - Р. 918-924.
24) Grillo, R. Controlled release system for ametryn using polymer microspheres. Preparation, characterization and release kinetics in water / R. Grillo, A. E. Pereira, N. F. de Melo, R. M. Porto, L. O. Feitosa, P. S. Tonello, N. Filho, A. H. Rosa, R. Lima, L. F. Fraceto // Journal of Hazardous Materials. - 2011. - Vol. 186. - Р. 1645-1651.
25) Grillo, R. Poly(-caprolactone) nanocapsules as carrier systems for herbicides. Physico-chemical characterization and genotoxicity evaluation / R. Grillo, N. Zocal Pereira, C. R. Maruyama, A. H. Rosa, R. de Lima, L. F. Fraceto // Journal of Hazardous Materials. - 2012. - Vol. 231. - P. 1-9.
26) Gross, R. A. Biodegradable polymers for the environment / R. A. Gross, B. Kalra // Green Chem. - 2002. - Vol. 297. - Р. 803-807.
27) Kaur, G. Strategies for large-scale production of polyhydroxyalkanoates / G. Kaur, I. Roy // Chem. Biochem Ing. - 2015. - Vol. 29. - Р. 157-172.
28) Li, J. Carboxylmethylcellulose/bentonite composite gels: water sorption behavior and controlled release of herbicide / J. Li, J. Lu, Y. Li // Journal of Applied Polymer Science. - 2008. - Vol. 112. - Р. 261-268.
29) Maqueda, C. Novel system or reducing leaching of the herbicide metribuzin using clay-gelbased formulations / C. Maqueda, J. Villaverde, F. Sopena, T. Undabeytia, E. Morillo // J. Agric. Food Chem. - 2008. - Vol. 56. - Р. 11941¬11946
30) McCormick, C. L. Controlled activity polymers with pendent metribuzin. Effect of structure on hydrolytic release. Macromolecules as drugs and as carriers for biologically active materials / C. L. McCormick // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 2006. - Vol. 446. - Р. 76-92.
31) Omidi, F. Application of molecular imprinted polymer nanoparticles / F. Omidi, M. Behbahani, H. S. Abandansari // Journal of Environmental Health Science & Engineering. - 2014. - Vol. 12. - Р. 137-147.
32) Piletska, E. V. Controlled release of the herbicide simazine from computationally designed molecularly imprinted polymers / E. V. Piletska, N. W. Turner, A. P. Turner, S. A. Piletsky, // Journal of controlled release. - 2005. - Vol. 108. - Р. 132-139.
33) Puoci, F. Polymer in Agriculture / F. Puoci, F. Iemma, U. G. Spizzirri, G. Cirillo, M. Curcio and N. Picci // American Journal of Agricultural and Biological Sciences. - 2008. - Vol. 3. - Р. 299-314.
34) Rehab, A. Controlled-release systems based on the intercalation of polymeric metribuzin onto montmorillonite / A. Rehab, A. Akelah, M. M. El-Gamal // J. Polym. Sci., Part A: Polym. Chem. - 2002. - Vol. 40. - Р. 2513-2525.
35) Sahoo, S. Kinetics of metribuzin release from bentonite-polymer composites in water // S. Sahoo, K. M. Manjaiah, S. C. Datta, A. Shabeer, J. Kumar //
J. Environ. Sci. Health, Part B. - 2014. - Vol. 49. - Р. 591-600.
36) Sаnchez-Bayo, F. Impacts of Agricultural Pesticides on Terrestrial Ecosystems. // F. Sanchez-Bayo, P. J. van den Brink, R. M. Mann // Bentham Science Publishers Ltd. - 2011. - Vol. 4. - P. 63-87.
37) Sannino, F. Pesticide influence on soil enzymatic activities // F. Sannino,
L. Gianfreda // Chemosphere. - 2001. - Vol. 45. - Р. 417-425.
38) Savenkova, L. PHB-based films as matrices for pesticides // L. Savenkova, Z. Gercberga, O. Muter, V. Nikolaeva, A. Dzene, V. Tupureina // Process Biochem. - 2002. - Vol. 37. - Р. 719-722.
39) Shаngguan, Y. The mechanical properties and in vitro biodegradation and biocompatibility of UV-treated poly(3-xydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate) // Y. Shаngguan, Y. Wang, Q. Wu // Biomaterials. - 2006. - Vol. 27, № 11. - Р. 2349¬2357.
40) Singh, B. In vitro release dynamics of thiram fungicide from starch and poly (methacrylic acid) - based hydrogels / B. Singh, D. K. Sharma, А.Gupta // Journal of hazardous materials. - 2008. - Vol. 154, № 1. - Р. 278-286.
41) Suave, J. Biodegradable microspheres of poly(3-hydroxybutyrate)/poly(e- caprolactone) loaded with malathion pesticide. Preparation, characterization, and in vitro controlled release testing / J. Suave, E. C. Dall'Agnol, A. P. Pezzin, M. M. Meier, D. A. Silva // J. Appl. Polym. Sci. - 2010. - Vol. 117. - P. 3419-3427.