🔍 Поиск готовых работ

🔍 Поиск работ

Анализ наследственных мутаций в генах F2, F5, F7 и MTGFR у пациентов с диагнозом ХМПЗ, обусловленным наличием соматических мутаций

Работа №22313

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы49
Год сдачи2017
Стоимость4900 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
322
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 3
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 5
1 Обзор литературы 5
1.1 Хронические миелопролиферативные неоплазмы 5
1.1.1 Соматические мутации, обуславливающие развитие ХМН 6
1.1.2 Случаи семейного проявления ХМН 8
1.2 Система гемостаза 9
1.2.1 Полиморфизм G20210A протромбина фактора II (F2) 12
1.2.2 Полиморфизм G1691A фактора V (F5) - фактора Лейдена 13
1.2.3 Полиморфизм C677T гена метилентетрагидрофолатредуктазы . 16
1.3 Полиморфизмы в генах рецепторных белков тромбоцитов 18
1.3.1 Полиморфизм гена рецептора фибриногена ITGB3 (GpIIb/IIIa). 18
1.3.2 Полиморфизм гена рецептора коллагена ITGA2 (GpIa/IIa) 20
1.3.3 Полиморфизмы гена рецептора фактора Виллебранда GPIBA... 22
1.3.4 Полиморфизм P-селектина, лиганда гликопротеина SELPLG.... 24
1.3.5 Полиморфизм ADP-рецептора тромбоцитов P2RY12 H1/H2 25
2 Материалы и методы 27
2.1 Объект исследования 27
2.2 Выделение ДНК из лейкоцитов цельной крови с использованием
комплекта реагентов «SNP - экспресс» (НПО «Литех») 27
2.3 Проведение полимеразной цепной реакции 28
2.3.1 Проведение полимеразной цепной реакции при помощи системы детекции продуктов ПЦР-РВ «iCycler iQ5» (BioRad) 30
2.4 Статистический анализ 32
3 Результаты и обсуждения 33
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 41
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 42
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 43


На сегодняшний день одна из основных причин летальности населения России - болезни органов кровообращения. В структуре этих заболеваний находятся такие патологические состояния как инфаркты, тромбоэмболии, тромбозы, инсульты и др. Согласно статистике последних лет, в структуре смертности от сердечно-сосудистых заболеваний в российской популяции 85,5% приходится на долю ишемической болезни сердца (ИБС) (46,8%) и мозгового инсульта (38,7%). На развитие этих патологий влияет множество факторов [1]. Тромботические осложнения часто могут диагностироваться при хронических миелопролиферативных неоплазмах (ХМН) [2]. Это группа Ph- негативных гематологических заболеваний сопровождается опухолевой трансформацией с последующей пролиферацией миелоидных клеток, длительно сохраняющих способность к дифференцировке. В основную группу миелопролиферативных неоплазм входят истинная полицитемия (ИП), эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и миелофиброз (МФ). Известно, что данные заболевания ассоциируют с возникновением трех основных соматических мутаций: в гене Янус-киназы (JAK2), в гене рецептора тромбопоэтина (MPL), в гене кальретикулина (CALR). Для пациентов с наличием данных мутаций отмечается гиперклеточность костного мозга, склонность к тромбозам и геморрагиям, риск лейкозной трансформации и развитие фиброза в процессе эволюции болезни [3].
Важную роль в развитии тромботических осложнений у пациентов с ХМН могут иметь наследственные факторы риска, которые предрасполагают к изменениям в системе гемостаза. К ним относятся тромбогенные полиморфизмы генов плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза. Полиморфизмы часто встречаются в сочетании друг с другом, при этом возрастает риск возникновения геморрагий или тромбофилии. Установлено, что генетические аномалии гемостаза ответственны за развитие тромбозов в 80¬90% случаев. В настоящее время увеличение риска возникновения тромботических моментов при наличии у пациентов с ХМН наследственных факторов риска, обсуждается.
Таким образом, в работе была поставлена цель: анализ тромбогенных полиморфизмов генов плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза у пациентов с ХМН.
Исходя из цели, были сформулированы следующие задачи:
1. Провести сравнительный анализ распространенности тромбогенных полиморфизмов в группе пациентов с ХМН с соответствующими данными по европейской популяции и общей популяции г.Красноярска;
2. Оценить наличие ассоциации между анализируемыми
полиморфизмами и фенотипическими вариантами (диагнозом) ХМН;
3. Оценить наличие ассоциации между анализируемыми
полиморфизмами и соматическими мутациями среди пациентов с ХМН;
4. Сопоставить наличие выявленных полиморфизмов с тромботическими проявлениями у пациентов с ХМН.
Работа проведена на базе Красноярского филиала ФГБУ Гематологического научного Центра Минздравсоцразвития.

Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!
ДИПЛОМНЫЕ МАГИСТЕРСКИЕ ДИССЕРТАЦИИ
КУРСОВЫЕ СТАТЬИ ВКР

1. Полученные данные по распространенности тромбогенных полиморфизмов в группе с ХМН в целом соответствуют литературным по европейским показателям, а так же контрольной группе людей;
3. При сравнении групп пациентов с разными фенотипическими вариантами ХМН (ИП, ЭТ, МФ) выявлено достоверное отличие по распространенности полиморфизма гена GP1BA C482T между пациентами с диагнозом ИП и ЭТ (P-0,03). Полиморфизм гена GPIBA C482T встречается чаще у больных эссенциальной тромбоцитемией (ЭТ), чем у пациентов с истинной полицитемией (ИП);
2. Большинство пациентов с выявленными полиморфизмами также имеют сочетание какой-либо соматической мутации (JAK2, CALR, MPL), что может влиять на риск возникновения тромботических осложнений у пациентов с ХМН;
4. На данный момент из 153-ти отобранных пациентов с подтверждённым диагнозом ХМН у 33 человек имелись тромботические осложнения в виде инсульта головного мозга, инфаркта миокарда, тромбозов глубоких вен, портальной гипертензии. Связи между исследуемыми полиморфизмами и риском развития тромбозов не обнаружено.



1. McMahon, B. Thrombotic and bleeding complications in classical myeloproliferative neoplasms / B. McMahon, B. Stein // Semin Thromb Hemost. -
2013. - P. 101-111.
2. Popov, V. The role of JAK2 mutation in thrombotic complications of chronic myeloproliferative neoplasms / V. Popov, M. Onisai // EMJ Hematology. -
2014. - P. 106-113.
3. Vainchenker, W. New mutations and pathogenesis of myeloproliferative neoplasms / W.Vainchenker, F.Delhommeau // Blood. - 2011. - P. 1723-1735.
4. Соколова, Н. Изменения в представлении о патогенезе Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний / Н. А. Соколова, М. И. Савина // Молодой ученый. - 2011. - №5(2). - С. 216-219.
5. Tefferi, A. Classification and diagnosis of myeloproliferative neoplasms: the 2008 World Health Organization criteria and point-of-care diagnostic algorithms / A. Tefferi, J. Vardiman // Leukemia. - 2008. - P. 14-22.
6. Козловская, М. Генетическая диагностика Ph-отрицательных хронических миелопролиферативных заболеваний (ХМПЗ) / М.А. Козловская // Вестник гематологии. - 2013. - №9.- C. 27.
7. Vardiman, J. The 2008 revision of the World Health Organization (WHO) classification of myeloid neoplasms and acute leukemia: rationale and important changes / J. Vardiman, J. Thiele // Blood. - 2009. - P. 93.
8. Абдулкадыров, К. Критерии диагностики и современные методы лечения первичного миелофиброза / К. М. Абдулкадыров, В. А. Шуваев // Вестник гематологии. - 2013. - C. 44-78.
9. Волкова, C. Основы клинической гематологии: учебное пособие / С. Волкова, Н. Боровков // - Нижний Новгород. - 2013. - C. 228-242.
10. Kaushansky, K. The chronic myeloproliferative disorders and mutation of JAK2: Dameshek's 54 year old speculation comes of age / K. Kaushansky // Best Pract. Res. Clin. Haematol. - 2007. - №20(1). - P. 5-12.
11. Соколова, М. Современные представления о «классических» Ph- негативных хронических миелопролиферативных заболеваниях / М. А. Соколова // Клиническая онкогематология. - 2010. - №3(3). - C. 235-242.
12. Klampfl, T. Somatic mutations of calreticulin in myeloproliferatie neoplasms / T. Klampfl, H. Gisslinger // The new England journal of medicine. - 2013. - P. 2379-2389.
13 Ning, L. Frequency and allele burden of CALR mutations in Chinese with essential thrombocythemia and primary myelofibrosis without JAK2V617F or MPL mutations / L. Ning, Y. Qui-Mei, L. Jin-Lan // Leukemia Recearch. - 2015. - № 39. - P. 510-514.
14. Schwarz, J. PhD International Hematology Expert Meeting /J. Schwarz // - Austria - 2014. - P. 8-9.
15. Kralovics, R. Clonal hematopoiesis in familial polycythemia vera suggests the involvement of multiple mutational events in the early pathogenesis of the disease / R. Kralovics, D. Stockton, J. Prchal // Blood. - 2003 - №102(10) - P. 3793-3796.
16. Kralovics, R. Molecular pathogenesis of Philadelphia chromosome negative myeloproliferative disorders / R. Kralovics, R. Skoda // Blood Rev. - 2005 - №19(1). P. 1-13.
17. Rumi, E. JAK2 (V617F) as an acquired somatic mutation and a secondary genetic event associated with disease progression in familial myeloproliferative disorders / E. Rumi, F. Passamonti, D. Pietra // Cancer. - 2006 - №107(9) - P. 2206¬2211.
18. Пантелеев, М. Свертывание крови: современные проблемы / М. А. Пантелеев, Ф. И. Атауллаханов // Клиническая онкогематология. - 2007. - №1(1). - C. 50-62.
19. Клинико-лабораторная диагностика системы гемостаза, принципы и схемы исследования. [В Интернете] [Цитировано: 23 Сентябрь 2013 г.] http://www.labdiagnostic.ru/docs/gemostaz.shtml
20. Рагимов, А. Синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови / А. А. Рагимов. Л. А. Алексеева // Практическая медицина. - 2007. - C. 37-38.
21. Радзинский, В. Репродуктивное здоровье: учебное пособие / В. Е. Радзинский // - Москва - 2011.
22. Poort, S. A common genetic variation in the 3'-untranslated region of the prothrombin gene is associated with elevated plasma prothrombin levels and an increase in venous thrombosis / S. Poort, F. Rosendaal // Blood - 1996. - P. 3698¬3703.
23. Калашникова, Е. Частоты мутаций в генах фактора V (FV Leiden), протромбина (G20210A) и 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (C677T) у русских / Е. А. Калашникова, С. Н. Кокаровцева // Медицинская генетика. - 2006. - №7(5). - C. 27-29.
24. Колосков, A. Частота встречаемости полиморфизмов гена фактора V (A506G), гена протромбина (G20210A) и гена MTHFR (C677T И A1298C) у здоровых доноров крови Санкт-Петербурга / А. В. Колосков, О. И. Филиппова, А. А. Лыщев // - Гематология. - 2015. - №16 - C. 682-688.
25. Первушин, Ю. Лабораторные методы исследования системы гемостаза и диагностика нарушений системы гемокоагуляции: учебное пособие / Ю. В. Первушин, С. Ш. Рогова // Ставрополь-Москва - 2009. - C. 7-24.
26. Bertina, R. Mutation in blood coagulation factor V associated with resistance to activated protein C / R. Bertina // Nature - 1994. - P. 64-67.
27. Rodger, M. Inherited thrombophilia and pregnancy complications revisited / M. Rodger, M. Paidas // Obstetrics and Gynecology - 2008. - P. 320-324.
28. Bozikova, A. The frequency of factor V Leiden and prothrombin G20210A mutations in Slovak and Roma ethnic group of Eastern Slovakia / A. Bozikova // J Thromb Thrombolysis. - 2012. - Vol. 34. - P. 406-409.
29. Kujovich, J. Factor V Leiden thrombophilia / J. Kujovich // Genetics in Medicine. - 2011. - Vol. 13. - P. 1-16.
30. Калашникова Е. Частоты мутаций в генах фактора V (FV Leiden), протромбина (G20210A) и 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (C677T) у русских / Е. А. Калашникова // Медицинская генетика - 2006. - № 7 - C. 27-29.
31. O'Shaughnessy, D. Practical hemostasis and thrombosis / D. O'Shaughnessy, M. Markis, D. Lillicap // Oxford: Blackwell Publishing - 2005. - P. 224.
32. Wang, X. Geographical and Ethnic Distributions of the MTHFR C677T, A1298C and MTRR A66G Gene Polymorphisms in Chinese Populations: A Meta¬Analysis / X. Wang, Q. Li // PLoS One. - 2016. - P. 4.
33. Yang, B. Geographical distribution of MTHFR C677T, A1289C and MTRR A66G gene polymorphisms in China: findings from 15357 adults of Han nationality / B. Yang, Y. Liu // PLoS One - 2013.- P. 3.
34. Kim, R. Association between factor V Leiden, prothrombin G20210A, and methylenetetrahydrofolate reductase C677T mutations and events of the arterial circulatory system: a meta-analysis of published studies / R. Kim, R. Becker // Am Heart J. - 2013. - P. 948-957.
35. Васильева, O. Молекулярно-генетические аспекты кардиоваскулярных и цереброваскулярных заболеваний / О. В. Васильева, А. В. Полонников, В. П. Иванов // Научно-практический журнал «Клинико-лабораторный консилиум. - 2009 - №4. - C. 56-59.
36. Чикова Е. Наследственные факторы риска тромбофилии у женщин западно-сибирского региона: материалы VII Всероссийской научно¬практической конференции с международным участием / Е. Д. Чикова, Г. А. Цветовская, Г. И. Лифшиц // Молекулярная диагностика. - 2010. - С. 166.
37. Воронина, Е. Мембранные рецепторы тромбоцитов: Функции и полиморфизм / Е. Н. Воронина, М. Л. Филипенко, Д. С. Сергеевичев // Вестник ВОГиС - Новосибирск. - 2006. - №3(10). - C. 553-564.
38. Wang, B. Association of MTHFR gene polymorphism C677T with susceptibility to late-onset alzheimer's disease / B. Wang, F. Jin // Journal of Molecular Neuroscience. - 2015. - № 1(27). - Р. 23-27.
39. Lu, J. Polymorphism in Integrin ITGA2 is Associated with Ischemic Stroke and Altered Serum Cholesterol in Chinese Individuals / Jian-Xia Lu, Zhong-Qian Lu, Shao-lan Zhang // Balkan Med Journal. - 2014. - №31(1) - P. 55-59.
40. FitzGerald, L. Identification of a prostate cancer susceptibility gene on chromosome 5p13q12 associated with risk of both familial and sporadic disease / L. M. FitzGerald, B. Patterson, R. Thomson // European Journal Human Genetics. - 2009. - №17(3) - P. 368-377.

Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.