Тип работы:
 Предмет:
 Язык работы:


Разработка алгоритма анализа сложных соматических мутаций у пациентов с ХМН

Работа №21698

Тип работы

Главы к дипломным работам

Предмет

биология

Объем работы55
Год сдачи2018
Стоимость7300 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
343
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 8
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 10
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
1.1 Хронические миелопролиферативные новообразования 10
1.1.1 Истинная полицитемия 11
1.2 Мутации обуславливающие развитие ХМН 14
1.3 Прогностические генетические маркеры ХМН 16
1.4 Взаимосвязь генотипа и фенотипа на примере мутаций в 12 и 14 экзоне
гена JAK2 18
1.5 High Resolution Melt (плавление высокого разрешения) или HRM анализ 23
1.6 Использование метода HRM для анализа мутаций в 12 экзоне гена JAK2 26
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 28
2.1 Объект исследования 28
2.2 Выделение ДНК из клинического материала с использованием реагента
«ДНК-сорб-B» 28
2.3 Измерение концентрации ДНК 30
2.4 Качественный анализ мутаций в 12 экзоне гена JAK2 31
2.4.1 Проведение ПЦР с использование комплекта реагентов «Для
проведения ПЦР-РВ в присутствии EVAGreen» (СИНТОЛ, Москва) на приборе CFX 96 (BioRad, США) 31
2.4.2 Электрофоретическая детекция продуктов амплификции 32
2.4.3 Проведение ПЦР-HRM с использование комплекта реагентов
«Precision Melt Supermix» (Bio-Rad, США) 33
2.5 Количественный анализ мутаций в 12 экзоне гена JAK2 34
2.5.1 Проведение пиросеквенирующего синтеза с применением системы генетического анализа серии PyroMark «АмплиСенс Пироскрин» на приборе пиросеквенатор PyroMarkTM Q24 (Qiagen) 34
2.6 Анализ мутаций в 12 экзоне гена JAK2 методом секвенирования по
Сенгеру 43
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 66
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 67


Хронические миелопролиферативные новообразования (ХМН) - это группа Ph-негативных гематологических заболеваний, сопровождающихся опухолевой трансформацией с последующей пролиферацией миелоидных клеток, длительно сохраняющих способность к дифференцировке. Истинная полицитемия (ИП) наряду с другими патологиями входит в группу ХМН. Доказано, что ключевым моментом в патогенезе всей группы ХМН, не ассоциированных с BCR-ABL, считается активация JAK-STAT сигнального пути, обусловленная чаще всего точечной мутацией V617F (rs10974944) в 14 экзоне гена JAK2 (Янус-киназа-2), обнаруженной в 2005 году и встречающейся 95% случаях при ИП. Соматическая мутация JAK2V617F, заключающаяся в замене валина на фенилаланин в кодоне 617 полипептидной цепи JAK2, вызывает нарушение структуры тирозинкиназы. Происходит изменение конформации белка, киназный и псевдокиназный домены пространственно удаляются друг от друга, что приводит к постоянной каталитической активности киназного домена, а псевдокиназный домен не может выполнять свои ингибирующие функции. Все это приводит к активации пролиферации клетки и блокаде процессов апоптоза. Наблюдается постоянная активация JAK2, вне зависимости от связывания цитокинового рецептора со своим лигандом и вызывает увеличение числа клеток всех трех ростков кроветворения. Вслед за JAK2V617F были обнаружены другие соматические мутации, приводящие к развитию различных нозологических форм ХМН: истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и миелофиброз (МФ). В частности, для небольшого числа JAK2V617F-отрицательных больных с диагнозом ИП был открыт кластер мутаций гена JAK2 в 12 экзоне, затрагивающий аминокислотные остатки в положении 536-547 белка JAK2. До настоящего времени описано около 40 видов мутаций в данной области, обуславливающих развитие ИП. Частота встречаемости таких мутаций среди больных ИП составляет не менее 5% для европейской популяции [1] и около 13% для китайской [2]. Для российской популяции соответствующие данные отсутствуют. Мутации в 12 экзоне вызывают увеличение числа клеток только эритроцитарного ростка по схожему механизму, что и мутации в 14 экзоне этого же гена. Клиническая картина течения заболевания и факторы риска развития тромбоза и вторичного миелофиброза у больных ИП, обусловленные возникновением мутации в 12-м экзоне гена JAK2, не имеют значимых различий от соответствующих проявлений у V617F-положительных больных.
Определение мутаций в 12 экзоне имеет решающее значение для диагностики и мониторинга терапии истинной полицитемии. В связи с этим актуально определять данную мутацию как качественными методами, позволяющими интерпретировать результат на наличие или же отсутствие мутации, так и количественными методами, позволяющими определить параллельную нагрузку, то есть количество аллелей данного гена, пораженных мутацией, выраженное в процентах от общего числа аллелей.
Таким образом, цель данной работы - разработать алгоритм анализа сложных соматических мутаций для диагностики хронических миелопролиферативных новообразований.
Исходя из поставленной цели, были сформулированы следующие задачи:
1. Разработать технологию с использованием пиросеквенирования для выявления и количественного определения уровня аллельной нагрузки мутаций в 12 экзоне гена JAK2.
2. Разработать технологии с использованием гетеродуплексного анализа в вертикальном ПААГ, а также с использованием High Resolution Melt (HRM) для качественной оценки наличия соматических мутаций в 12 экзоне гена JAK2.
3. Сравнить чувствительность методов гетеродуплексного анализа и HRM при выявлении мутаций типа indel в 12 экзоне гена JAK2.
4. Разработать алгоритм анализа соматических мутаций в 12 экзоне гена JAK2 для дифференциальной диагностики ИП.
5. Проанализировать ДНК пациентов с высокой клиникогематологической вероятностью диагноза ИП на наличие мутаций в 12 экзоне гена JAK2 с использованием предложенного алгоритма.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!
ДИПЛОМНЫЕ МАГИСТЕРСКИЕ ДИССЕРТАЦИИ
КУРСОВЫЕ СТАТЬИ ВКР

in JAK2V617F-negative polycythemia vera / A. Pardanani, T.L. Lasho, C. Finke, C.A. Hanson, A. Tefferi // Leukemia. - 2016. - Vol. 21. - P. 1960-1963.
2. Wu, Z. The mutation profile of JAK2 and CALR in Chinese Han patients with Philadelphia chromosome-negative myeloproliferative neoplasms / Z. Wu, X. Zhang, X. Xu, Y. Chen et al. // J. Hematol. Oncol. - 2014. - Vol. 48. - P. 735-740.
3. Passamonti, F. Molecular and clinical features of the myeloproliferative neoplasm associated with JAK2 exon 12 mutations / F. Passamonti, C. Elena, S. Schnittger, R.C. Skoda et al. // Blood. - 2015. - Vol. 117, № 10. - P. 2813-2816.
4. Hermouet, S. Pathogenesis of myeloproliferative neoplasms: role and mechanisms of chronic inflammation / S. Hermouet, E. Bigot-Corbel, B. Gardie // Mediators of inflammation. - 2015. - Vol. 17, № 4. - C. 135-136.
5. Yin, C.C. Recent advances in the diagnosis and classification of myeloid neoplasms- comments on the 2008 WHO classification/ C.C. Yin, L.J. Medeiros // International journal of laboratory hematology. - 2010. - Vol. 32, № 5. - P. 461-476.
6. Рукавицын, O.A. Гематология / O.A. Рукавицын, C.B. Скворцов, M.H. Зенина // Гематология - 2007. - С. 68-91.
7. Соколова, M.A. Современные представления о «классических» Ph-негативных хронических миелопролиферативных заболеваниях/ M.A. Соколова // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2010. - Т. 3, № 3. - C. 17-24.
8. Меликян, А.Л. Классические Ph-негативные миелопролиферативные неоплазии / А.Л. Меликян, И.Н. Суборцева // Материалы 56-го конгресса американского гематологического общества. - 2015. - Т. 8, № 2. - С. 20-25
9. Гусева, С.А. Истинная полицитемия / С. А. Гусева, С.С. Бессмельцев, К.М. Абдулкадыров, Я.П. Гончаров // Киев, 2009. - С. 405.
10. Tefferi, A. Proposals and rationale for revision of the World Health Organization diagnostic criteria for polycythemia vera, essential thrombocythemia, and primary myelofi brosis: recommendations from an ad hoc international expert panel / A. Tefferi, J. Thiele, A. Orazi et al. // Blood. — 2007. — Vol. 110, № 4. — P. 10921097.
11. James, C. A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling causes polycythaemia vera / C. James, V. Ugo, J. Le Couedic et al. // Nature. — 2015. — Vol. 434, № 7037. — P. 1144-1148.
12. Verstovsek, S. Results of a prospective, randomized, open-label phase 3 study of ruxolitinib (RUX) in polycythemia vera (PV) patients resistant to or intolerant of hydroxyurea (HU): the RESPONSE trial / S. Verstovsek, J. Kiladjian // J Clin Oncol. — 2014. — Vol. 32, № 5. — P. 7026.
13. Passamonti, F. Polycythemia vera in young patients: a study on the long-term risk of thrombosis, myelofi brosis and leukemia / F. Passamonti, L. Malabarba, E. Orlandi et al. // Blood. — 2013. — Vol. 88. — P. 13-18.
14. Lasho, T.L. LNK Mutations in JAK2 Mutation-Negative Erythrocytosis / T.L. Lasho, A. Pardanani, A. Tefferi // New England Journal of Medicine. — 2010. — Vol. 363, № 12. — P. 1189-1190.
15. Baxter, E.J. Acquired mutation of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative disorders / E.J. Baxter, L.M. Scott, P.J. Campbell et al. // The Lancet. — 2005. — Vol. 365, № 9464. — P. 1054-1061.
16. Saini, K.S. Polycythemia vera-associated pruritus and its management / K.S. Saini, M.M. Patnaik, A. Tefferi // European Journal of Clinical Investigation. — 2010. — Vol. 40, № 9. — P. 828-834.
17. Демидова, A.B. Эритремия и вторичные эритроцитозы / А.В. Демидова, Н.Н. Коцюбинский, В.И. Мазуров // — 2001. — C. 228.
18. Абдулкадыров, К.М. Современные представления о диагностике и лечении истинной полицитемии / КМ. Абдулкадыров и др. // Вестник гематологии. - 2015. - Т. 11, № 1. - C. 22-30.
19. Меликян, А.Л. Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph- негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз) / А.Л. Меликян и др. // Гематология и трансфузиология. - 2014. - Т. 59, № 4. - C. 15-27.
20. Vannucchi, A.M. Molecular pathophysiology of Philadelphia-negative myeloproliferative disorders: beyond JAK2 and MPL mutations / A.M. Vannucchi, P. Guglielmelli // Haematologica. — 2008. — Vol. 93, № 7. — P. 972-976.
21. Lu, X. Expression of a homodimeric type I cytokine receptor is required for JAK2V617F-mediated transformation / X. Lu, R. Levine, W. Tong et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.
— 2015. — Vol. 102, № 52. — P. 18962-18967.
22. Vannucchi, A.M. Clinical profi le of homozygous JAK2V617F mutation in patients with polycythemia vera or essential thrombocythemia / A.M. Vannucchi, E. Antonioli, P. Guglielmelli et al. // Blood. — 2007. — Vol. 110, № 3. — P. 840-846.
23. Courtier, F. Genomic analysis of myeloproliferative neoplasms in chronic and acute phases / F. Courtier et al. // Haematologica. - 2017. - Vol. 102. № 1. - P. e11-e14.
24. Nangalia, J. Somatic CALR Mutations in Myeloproliferative Neoplasms with Nonmutated JAK2 / J. Nangalia, C.E. Massie, E.J. Baxter et al. // N. Engl. J. Med. - 2013 - Vol. 369, № 25. - P. 2391-2405.
25. Tefferi, A. Polycythemia vera and essential thrombocythemia: 2013 update on diagnosis, risk-stratification, and management / A. Tefferi // Am. J. Hematol. - 2013.
- Vol. 88, № 6. - P. 507-516.
26. Rotunno, G. Impact of calreticulin mutations on clinical and hematological phenotype and outcome in essential thrombocythemia / G. Rotunno, C. Mannarelli, P. Guglielmelli et al. // Blood. - 2013. - Vol. 123, № 10. - P. 1552-1555.
27. Rumi, E. JAK2 or CALR mutation status defines subtypes of essential thrombocythemia with substantially different clinical course and outcomes / E. Rumi, D. Pietra, V. Ferretti et al. // Blood. - 2013. - Vol. 123, № 10. - P. 1544-1551.
28. Абдулкадыров, KM. Критерии диагностики и современные методы лечения первичного миелофиброза / КМ. Абдулкадыров, В.А. Шуваев, И.С. Мартынкевич // Вестник гематологии. - 2013. - Т. 9, № 3. - С. 139-147.
29. Shih, A.H. The role of mutations in epigenetic regulators in myeloid malignancies / A.H. Shih et al. //Nature Reviews Cancer. - 2014. - Vol. 12, № 9. - P. 599-612.
30. Nangalia, J. The evolving genomic landscape of myeloproliferative neoplasms / J. Nangalia, T.R. Green // ASH Education Program Book. - 2014. - Vol. 2014, № 1. - P. 287-296.
31. Abdel-Wahab, O.D. DNMT3A mutational analysis in primary myelofibrosis, chronic myelomonocytic leukemia and advanced phases of myeloproliferative neoplasms /
O. D. Abdel-Wahab, A. Pardanani, R. Rampal, T.L. Lasho et al. // Leukemia. - 2011.
- Vol. 25, № 7. - P. 1219-1220.
32. Pronier, E. Role of TET2 mutations in myeloproliferative neoplasms / E. Pronier, F. Delhommeau //Current hematologic malignancy reports. - 2012. - Vol. 7, № 1. - P. 57-64.
33. Delhommeau, F. Mutation in TET2 in myeloid cancers / F. Delhommeau, S. Dupont, V. Della Valle et al. // N Engl J Med. - 2010. - Vol. 360, № 22. - P. 2289-2301.
34. Gelsi-Boyer, V. Mutations in ASXL1 are associated with poor prognosis across the spectrum of malignant myeloid diseases / V. Gelsi-Boyer et al. // Journal of hematology and oncology. - 2012. - Vol. 5, № 1. - P. 1-4.
35. Martinez-Aviles, L. TET2, ASXL1, IDH1, IDH2, and c-CBL genes in JAK2-and MPL-negative myeloproliferative neoplasms / L. Martinez-Aviles et al. // Annals of hematology. - 2015. - Vol. 91, № 4. - P. 533-541.
36. Laughlin, T.S. Detection of exon 12 mutations in the JAK2 gene: Enhanced analytical sensitivity using clamped PCR and nucleotide sequencing / T.S. Laughlin, A.R. Moliterno, B.L. Stein, P.G. Rothberg // J Mol Diagn. - 2015. - Vol. 12. - P. 278-282.
37. Ernst, T. Inactivating mutations of the histone methyltransferase gene EZH2 in myeloid disorders / T. Ernst, A.J. Chase, J. Score et al. // Nat Genet. - 2010. - Vol. 42, № 8. - P. 722-726.
38. Stegelmann, F. DNMT3A mutations in myeloproliferative neoplasms / F. Stegelmann, L. Bullinger, R.F. Schlenk et al. // Leukemia. - 2016. - Vol. 25, № 7. - P. 1217-1219.
39. de Freitas, R.M. Myeloproliferative neoplasms and the JAK/STAT signaling pathway: an overview / R.M de Freitas, C.M. da Costa Maranduba // Revista brasileira de hematologia e hemoterapia. - 2015. - Vol. 37. - №. 5. - P. 348-353.
40. Rawlings, J.S. The JAK/STAT signaling pathway / J.S. Rawlings, K.M. Rosler, D.A. Harrison // Journal of cell science. - 2012. - Vol. 117. - № 8. - P. 1281-1283.
41. McPherson, S. Epigenetics in myeloproliferative neoplasms / S. McPherson, M.F. McMullin, K. Mills // Journal of cellular and molecular medicine. - 2017. - Vol. 21. - № 9. - P. 1660-1667.
42. Babon, J.J. The molecular regulation of Janus kinase (JAK) activation / J.J. Babon et al. // Biochemical Journal. - 2014. - Vol. 462. - №. 1. - P. 1-13.
43. Gnanasambandan, K. A structure-function perspective of jak2 mutations and implications for alternate drug design strategies: the road not taken / K. Gnanasambandan, P.P. Sayeski // Current medicinal chemistry. - 2011. - Vol. 18. - №. 30. - P. 4659-4673.
44. Shan, Y. Molecular basis for pseudokinase-dependent autoinhibition of JAK2 tyrosine kinase / Y. Shan et al. // Nature structural & molecular biology. - 2014. - Vol. 21. - №. 7. - P. 579-584.
45. Hammaren, H.M. ATP binding to the pseudokinase domain of JAK2 is critical for pathogenic activation / H.M. Hammaren et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2015. - Vol. 112. - №. 15. - P. 4642-4647.
46. Silvennoinen, O. Molecular insights into regulation of JAK2 in myeloproliferative neoplasms / O. Silvennoinen, S.R. Hubbard // Blood. - 2015. - Vol. 125. - №. 22. - P. 3388-3392.
47. Catalog Of Somatic Mutations In Cancer. - Режим доступа: http://cancer.sanger.ac.uk/cosmic/
48. Scott, L.M. The JAK2 exon 12 mutations: a comprehensive review / L.M. Scott // American journal of hematology. - 2011. - Vol. 86, № 8. - P. 668-676.
49. Kleppe, M. JAK-STAT pathway activation in malignant and nonmalignant cells contributes to MPN pathogenesis and therapeutic response / M. Kleppe et al. // Cancer discovery. - 2015. - Vol. 5, № 3. - P. 316-331.
50. White, H. Mutation scanning by high resolution melt analysis. Evaluation of Rotor- Gene 6000 (Corbett Life Science), HR-1 and 384 well LightScanner (Idaho technology) / H. White, G. Potts // National Genetics Reference Laboratory. - 2013. - P. 1-45.
51. Gregory, R. Genotyping of Chlamydophila psittaci by Real-Time PCR and High- Resolution Melt Analysis / R. Gregory et al. // Journal of Clinical Microbiology. - 2015. - Vol. 211, № 734. - P. 175-181.
52. Rebelo, A.R. Use of high-resolution melting curve analysis to identify Mycoplasma species commonly isolated from ruminant, avian, and canine samples / A.R. Rebelo,
L. Parker, H.Y. Cai // Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. - 2014. - Vol. 23, № 5. - P. 932-936.
53. Reed, G. High-resolution DNA melting analysis for simple and efficient molecular diagnostics / G. Reed et al. // Pharmacogenomics. - 2015. - Vol. 8, № 6. - P. 597608.
54. Carillo, S. Nested High-Resolution Melting Curve Analysis: A Highly Sensitive, Reliable, and Simple Method for Detection of Jak2 Exon 12 Mutations—Clinical Relevance in the Monitoring of Polycythemia / S. Carillo, L. Henry, E. Lippert et al. // The Journal of Molecular Diagnostics. - 2015. - Vol. 13, № 3. - P. 263-270.
55. Rapado, I. High Resolution Melting Analysis for JAK2 Exon 14 and Exon 12 Mutations: A Diagnostic Tool for Myeloproliferative Neoplasms / I. Rapado, S. Grande, E. Albizua et al. // The Journal of Molecular Diagnostics. - 2016. - Vol. 11, № 2. - P. 155-161.
56. Ibanez, M. Rapid screening of ASXL1, IDH1, IDH2, and c-CBL mutations in de novo acute myeloid leukemia by high-resolution melting / M. Ibanez et al. // The Journal of Molecular Diagnostics. - 2012. - Vol. 14, № 6. - P. 594-601.
57. Bilbao-Sieyro, C. High resolution melting analysis: a rapid and accurate method to detect CALR mutations / C. Bilbao-Sieyro et al. // PLoS One. - 2014. - Vol. 9, № 7.- P. e103511.
58. Ugo, V. Interlaboratory Development and Validation of a HRM Method Applied to the Detection of JAK2 Exon 12 Mutations in Polycythemia Vera Patients / V. Ugo, S. Tondeur, M-L. Menot et al. // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 5, № 1. - P. e8893.
59. Bench, A. J. Molecular diagnosis of the myeloproliferative neoplasms: UK guidelines for the detection of JAK2 V617F and other relevant mutations / A. J. Bench et al. // British journal of haematology. - 2014. - Vol. 160, № 1. - P. 25-34.
60. Langabeer, S. E. Molecular diagnostics of myeloproliferative neoplasms / S.E. Langabeer et al. // European journal of haematology. - 2015. - Vol. 95, № 4. - P. 270-279.
61. Jones, A.V. Rapid identification of JAK2 exon 12 mutations using high resolution melting analysis / A.V. Jones, N.C. Cross, H.E. White et al. // Haematologica. - 2008. - № 93. - P. 1560-1564.
62. Rapado, I. Validity test study of JAK2 V617F and allele burden quantification in the diagnosis of myeloproliferative diseases / I. Rapado, E. Albizua, R. Ayala et al. // Ann Hematol. - 2008. - Vol. - P. 741-749.
63. Furtado, L.V. A multiplexed fragment analysis-based assay for detection of JAK2 exon 12 mutations / L.V. Furtado et al. // The Journal of Molecular Diagnostics. - 2014. - Vol. 15, № 5. - P. 592-599.
64. Субботина, Т.Н. Использование гетеродуплексного анализа и пиросеквенирования в алгоритме диагностики истинной полицитемии, ассоциированной с соматическими мутациями в 12 экзоне гена JAK2 / Т.Н. Субботина и др. // Лабораторная служба. - 2017. - Т. 6, №. 1. - С. 29-33.
65. Субботина, Т. Н. Использование метода пиросеквенирования для выявления и количественной оценки аллельной нагрузки мутаций в 12-м экзоне гена JAK2 / Т.Н. Субботина и др. // Гематология и трансфузиология. - 2016. - Т. 61, №. 4. - С. 196-200.
66. Klampfl, T. Somatic Mutations of Calreticulin in Myeloproliferative Neoplasms / T. Klampfl, H. Gisslinger, A.S. Harutyunyan et al. // N. Engl. J. Med. - 2015. - Vol.
369, № 25. - P. 2379-2390.
67. Rozovski, U. An accurate, simple prognostic model consisting of age, JAK2, CALR, and MPL mutation status for patients with primary myelofibrosis/ U. Rozovski, S. Verstovsek, T. Manshouri et al. // Haematologica. - 2017. - Vol. 102, № 1. - P. 7984.
68. Волкова, Ю.В. Технология пиросеквенирования как инструмент
персонализированной медицины / Ю.В. Волкова, Т.Ф. Садыков, Л.В. Кудрявцева // Лабораторная служба. - 2013. - № 2. - С. 12-15.
69. Меликян, А.Л. Биология миелопролиферативных новообразований / А.Л. Меликян, И.Н. Суборцева // Клиническая онкогематология. - 2016. - Т. 9, № 3.
- С. 314-325
70. Arber, D.A. The 2016 revision to the World Health Organization (WHO) classification of myeloid neoplasms and acute leukemia / D.A. Arber et al. // Blood. - 2016. - Vol. 127, № 20. - P. 2394
71. Tefferi A., Barbui T. Polycythemia vera and essential thrombocythemia: 2017 update on diagnosis, risk-stratification, and management //American journal of hematology.
- 2017. - T. 92, №. 1. - C. 94-108.
72. Oliveira, J.L. Genotype-Phenotype Correlation of Hereditary Erythrocytosis Mutations, a single center experience / J.L. Oliveira et al. // American journal of hematology. - 2018. - Vol. 13, № 7. - P. 28.
73. Djulbegovic, M. Evaluation of Polycythemia: A Teachable Moment / M. Djulbegovic, L.S. Dugdale, A.I. Lee // JAMA internal medicine. - 2018. - Vol. 178, № 1. - P. 128-130.
74. Суборцева, И.Н. Истинная полицитемия: обзор литературы и собственные данные / И.Н. Суборцева и др. // Клиническая онкогематология. - 2015. - Т. 8, № 4. - С. 397-412.
75. Alghasham, N. Detection of mutations in JAK2 exons 12-15 by Sanger sequencing /
N. Alghasham et al. // International journal of laboratory hematology. - 2016. - Vol. 38, № 1. - P. 34-41.
76. Park, C.H. High frequency of JAK2 exon 12 mutations in Korean patients with polycythaemia vera: novel mutations and clinical significance / C.H. Park et al. // Journal of clinical pathology. - 2016. - № 69. - P. 737-741.
77. Xie, G. The mutation rates of EGFR in non-small cell lung cancer and KRAS in colorectal cancer of Chinese patients as detected by pyrosequencing using a novel dispensation order / G. Xie et al. // Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. - 2015. - Vol. 34, № 1. - P. 63.
78. Tsiatis, A.C. Comparison of Sanger sequencing, pyrosequencing, and melting curve analysis for the detection of KRAS mutations: diagnostic and clinical implications / A.C. Tsiatis et al. // The Journal of Molecular Diagnostics. - 2015. - Vol. 12, № 4. - P. 425-432.
79. Дрибноходова, О.П. Выявление активирующих соматических мутаций в гене KRAS методом пиросеквенирования / О.П. Дрибноходова и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2013. - № 6. - C. 49-51.
80. Дунаева, Е.А. Количественное определение мутации V617F в гене JAK2 методом пиросеквенирования / Е.А. Дунаева и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2014. - Т. 59, № 11. - С. 60-63.
81. Farrar, J.S. High-resolution melting curve analysis for molecular diagnostics / J.S. Farrar, C.T. Wittwer // Molecular Diagnostics. - 2017. - № 47. - P. 79-102.
82. Mazaj, M.J.M. Identification of JAK2 exon 12 mutations in patients with polycythemia vera / M.J.M. Mazaj et al. // Zdravniski Vestnik. - 2014. - Vol. 81. - P. 161-167.

Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.