Тип работы:
 Предмет:
 Язык работы:


Разработка алгоритма проведения лабораторного тестирования соматических мутаций для дифференциальной диагностики онкогематологических заболеваний

Работа №21697

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы46
Год сдачи2016
Стоимость5600 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
356
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 3
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 5
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1 Хронические миелопролиферативные опухоли 5
1.1.1 Хронический миелоидный лейкоз 6
1.1.2 Истинная полицитемия 7
1.1.3 Эссенциальная тромбоцитемия 10
1.1.4 Миелофиброз 12
1.2 Мутации обуславливающие развитие ХМО 14
1.3 Прогностические генетические маркеры ХМО 16
1.4 JAK2 exon 12, 14. JAK-STAT^ra 18
1.5 Анализ сложных соматических мутаций на примере анализа мутаций в
12 экзоне гена JAK2 у пациентов с истинной полицитемией 23
1.6 Необходимость создания и применения алгоритмов для анализа и
дифференцировки фенотипически сходных заболеваний 23
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 24
2.1 Объект исследования 24
2.2 Выделение ДНК из клинического материала с использованием реагента
«ДНК-сорб-B» 24
2.3 Измерение концентрации ДНК 26
2.4 Разработка метода для качественного анализа мутаций в 12 экзоне 27
2.4.1 Проведение ПЦР с использование комплекта реагентов «Для
проведения ПЦР-РВ в присутствии EVAGreen» (СИНТОЛ) на приборе «CFX 96» (BioRad) 27
2.4.2 Электрофоретическая детекция продуктов амплификции 28
2.5 Проведение пиросеквенирующего синтеза с применением системы генетического анализа серии PyroMark «АмплиСенс Пироскрин» на приборе пиросеквенатор PyroMarkТМ Q24 (Qiagen) 29
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 40
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Хронические миелопролиферативные опухоли (ХМО) - это группа Ph- негативных гематологических заболеваний, сопровождающихся опухолевой трансформацией с последующей пролиферацией миелоидных клеток, длительно сохраняющих способность к дифференцировке. Истинная полицитемия (ИП) наряду с другими патологиями входит в группу хронических миелопролиферативных опухолей. Доказано, что ключевым моментом в патогенезе всей группы ХМО, не ассоциированных с BCR-ABL, считается активация JAK-STAT сигнального пути, обусловленная чаще всего точечной мутацией V617F (rs10974944) в 14 экзоне гена JAK2 (Янус-киназа-2), обнаруженной в 2005 году и встречающейся 95% случаях при ИП. Соматическая мутация JAK2V617F, заключающаяся в замене валина на фенилаланин в кодоне 617 полипептидной цепи JAK2, вызывает нарушение структуры тирозинкиназы. Происходит изменение конформации белка, киназный и псевдокиназный домены пространственно удаляются друг от друга, что приводит к постоянной каталитической активности киназного домена, а псевдокиназный домен не может выполнять свои ингибирующие функции. Все это приводит к активации пролиферации клетки и блокаде процессов апоптоза. Наблюдается постоянная активация JAK2, вне зависимости от связывания цитокинового рецептора со своим лигандом и вызывает увеличение числа клеток всех трех ростков кроветворения. Вслед за JAK2V617F были обнаружены другие соматические мутации, приводящие к развитию различных нозологических форм ХМО: истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и миелофиброз (МФ). В частности, для небольшого числа 1АК2У617Е-отрицательных больных с диагнозом ИП был открыт кластер мутаций гена JAK2 в 12 экзоне, затрагивающий аминокислотные остатки в положении 506-547 белка JAK2. До настоящего времени описано около 40 видов мутаций в данной области, обуславливающих развитие ИП. Частота встречаемости таких мутаций среди больных ИП составляет не менее 5% для европейской популяции [1] и около 13% для китайской [2]. Для российской популяции соответствующие данные отсутствуют. Мутации в 12 экзоне вызывают увеличение числа клеток только эритроцитарного ростка по схожему механизму, что и мутации в 14 экзоне этого же гена. Клиническая картина течения заболевания и факторы риска развития тромбоза и вторичного миелофиброза у больных ИП, обусловленные возникновением мутации в 12-м экзоне гена JAK2, не имеют значимых различий от соответствующих проявлений у V617F-положительных больных [3].
Определение мутаций в 12 экзоне имеет решающее значение для диагностики и мониторинга терапии истинной полицитемии. В связи с этим актуально определять данную мутацию как качественными методами, позволяющими интерпретировать результат на наличие или же отсутствие мутации, так и количественными методами, позволяющими определить
аллельную нагрузку, то есть количество аллелей данного гена, пораженных мутацией, выраженное в процентах от общего числа аллелей.
Таким образом, целью данной работы явилось разработать алгоритма проведения лабораторного тестирования соматических мутаций для дифференциальной диагностики истинной полицитемии.
Исходя из поставленной цели, нами были сформулированы следующие задачи:
1. Разработать алгоритм анализа соматических мутаций для пациентов с высокой клинико-гематологической вероятностью диагноза ИП с учетом имеющихся на базе СФУ и Гематологического центра молекулярногенетических технологий.
2. Разработать технологию для качественной оценки наличия соматических мутаций в 12 экзоне гена JAK2.
3. Проанализировать ДНК пациентов с высокой клинико-гематологической вероятностью диагноза ИП на наличие мутаций в 12 экзоне гена JAK2 с использованием разработанной технологии.
4. Определить чувствительность метода электрофореза в ПААГ при анализе мутаций в 12 экзоне гена JAK2.
Работа проведена на базе СФУ и Красноярского филиала ФГБУ «Гематологический научный центр Минздрав соцразвития России».


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!
ДИПЛОМНЫЕ МАГИСТЕРСКИЕ ДИССЕРТАЦИИ
КУРСОВЫЕ СТАТЬИ ВКР

1. Pardanani, A. Prevalence and clinicopathologic correlates of JAK2 exon 12 mutations in JAK2V617F-negative polycythemia vera / A. Pardanani, T.L. Lasho, C. Finke, C.A. Hanson, A. Tefferi // Leukemia. - 2007. - Vol. 21. - P. 1960-1963.
2. Wu, Z. The mutation profile of JAK2 and CALR in Chinese Han patients with Philadelphia chromosome-negative myeloproliferative neoplasms / Z. Wu, X. Zhang, X. Xu, Y. Chen et al. // J. Hematol. Oncol. - 2014. - Vol. 48. - P. 735-740.
3. Passamonti, F. Molecular and clinical features of the myeloproliferative neoplasm associated with JAK2 exon 12 mutations / F. Passamonti, C. Elena, S. Schnittger, R.C. Skoda et al. // Blood. - 2011. - Vol. 117, № 10. - P. 2813-2816.
4. Hermouet, S. Pathogenesis of myeloproliferative neoplasms: role and mechanisms of chronic inflammation / S. Hermouet, E. Bigot-Corbel, B. Gardie // Mediators of inflammation. - 2015. - Vol. 17, № 4. - С. 135-136.
5. Yin, C.C. Recent advances in the diagnosis and classification of myeloid neoplasms- comments on the 2008 WHO classification/ C.C. Yin, L.J. Medeiros // International journal of laboratory hematology. - 2010. - Vol. 32, № 5. - P. 461-476.
6. Рукавицын, О. А. Гематология / О. А. Рукавицын, С.В. Скворцов, М.Н. Зенина // Гематология - 2007. - С. 68-91.
7. Соколова, M.A. Современные представления о «классических» Ph-негативных хронических миелопролиферативных заболеваниях/ M.A. Соколова // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2010. - Т. 3, № 3. - C. 17-24.
8. Меликян, А.Л. Классические Ph-негативные миелопролиферативные неоплазии / А.Л. Меликян, И.Н. Суборцева // Материалы 56-го конгресса американского гематологического общества. - 2015. - Т. 8, № 2. - С. 20-25
9. Абдулкадыров, К. М. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и терапии хронического миелолейкоза / К.М. Абдулкадыров и др. // Вестник гематологии. - 2013. - Т. 9, № 3. - С. 19-26.
10. Hehlmann, R. Chronic myeloid leukaemia / R. Hehlmann et al. // The Lancet. - 2007. - Vol. 370, № 9584. - P. 342-350.
11. Смирнова, О.В. Хронический миелолейкоз клинические и иммунологические особенности у взрослых больных / О.В. Смирнова // Бюллетень Восточносибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2012. - № 2. - C. 3-4.
12. Гусева, С.А. Истинная полицитемия / С.А. Гусева, С.С. Бессмельцев, К.М. Абдулкадыров, Я.П. Гончаров // Киев, 2009. - С. 405.
13. Tefferi, A. Proposals and rationale for revision of the World Health Organization diagnostic criteria for polycythemia vera, essential thrombocythemia, and primary myelofi brosis: recommendations from an ad hoc international expert panel / A. Tefferi, J. Thiele, A. Orazi et al. // Blood. — 2007. — Vol. 110, № 4. — P. 10921097.
14. Verstovsek, S. Results of a prospective, randomized, open-label phase 3 study of ruxolitinib (RUX) in polycythemia vera (PV) patients resistant to or intolerant of hydroxyurea (HU): the RESPONSE trial / S. Verstovsek, J. Kiladjian // J Clin Oncol.
— 2014. — Vol. 32, № 5. — P. 7026.
15. James, C. A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling causes polycythaemia vera / C. James, V. Ugo, J. Le Couedic et al. // Nature. — 2005. — Vol. 434, № 7037. — P. 1144-1148.
16. Passamonti, F. Polycythemia vera in young patients: a study on the long-term risk of thrombosis, myelofi brosis and leukemia / F. Passamonti, L. Malabarba, E. Orlandi et al. // Blood. — 2003. — Vol. 88. — P. 13-18.
17. Lasho, T.L. LNK Mutations in JAK2 Mutation-Negative Erythrocytosis / T.L. Lasho, A. Pardanani, A. Tefferi // New England Journal of Medicine. — 2010. — Vol. 363, № 12. — P. 1189-1190.
18. Baxter, E.J. Acquired mutation of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative disorders / E.J. Baxter, L.M. Scott, P.J. Campbell et al. // The Lancet. — 2005. — Vol. 365, № 9464. — P. 1054-1061.
19.Saini, K.S. Polycythemia vera-associated pruritus and its management / K.S. Saini, M.M. Patnaik, A. Tefferi // European Journal of Clinical Investigation. — 2010. — Vol. 40, № 9. — P. 828-834.
20. Демидова, А.В. Эритремия и вторичные эритроцитозы / А.В. Демидова, Н.Н. Коцюбинский, В.И. Мазуров // — 2001. — C. 228.
21. Абдулкадыров, К.М. Современные представления о диагностике и лечении истинной полицитемии / К.М. Абдулкадыров и др. // Вестник гематологии. - 2015. - Т. 11, № 1. - C. 22-30.
22. Alvarez-Larran, A. Essential thrombocythemia in young individuals: frequency and risk factors for vascular events and evolution to myelofibrosis in 126 patients / A. Alvarez-Larran, F. Cervantes, B. Bellosillo, M. Giralt et al. // Leukemia. - 2007. - Vol. 21, № 6. - P.1218-1223.
23. Palandri, F. Long-term follow-up of essential thrombocythemia in young adults: treatment strategies, major thrombotic complications and pregnancy outcomes. A study of 76 patients / F. Palandri, N. Polverelli, E. Ottaviani, F. Castagnetti // Haematologica. - 2010. - Vol. 95, № 6. - P. 1038-1040.
24. Меликян, А.Л. Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph- негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз) / А.Л. Меликян и др. // Г ематология и трансфузиология. - 2014. - Т. 59, № 4. - C. 15-27
25. Beer, P.A. How I treat essential thrombocythemia / P.A. Beer, W.N. Erber, P.J. Campbell et al. // Blood. - 2011. - Vol. 117, № 5. - P. 1472-1482.
26. Tefferi, A. Polycythemia vera and essential thrombocythemia: 2013 update on diagnosis, risk-stratification, and management / A. Tefferi // Am. J. Hematol. - 2013.- Vol. 88, № 6. - P. 507-516.
27. Campbell, P.J. Definition of subtypes of essential thrombocythaemia and relation to polycythaemia vera based on JAK2 V617F mutation status: a prospective study / P.J. Campbell, L.M. Scott, G. Buck et al. // Lancet. - 2005. - Vol. 366, № 9501. - P. 1945-1953.
28. Абдулкадыров, К.М. Эссенциальная тромбоцитемия: современные
представления о диагностике и лечении / К.М. Абдулкадыров, В.А. Шуваев // Вестник гематологии. - 2014. - C. 49.
29. Campbell, P.J. Correlation of blood counts with vascular complications in essential thrombocythemia: analysis of the prospective PT1 cohort / P.J. Campbell, C. MacLean, P.A. Beer et al. // Blood. - 2012. - Vol. 120, № 7. - C. 1409-1411.
30. Абдулкадыров, К.М. Современные подходы к диагностике и лечению эссенциальной тромбоцитемии: обзор литературы и собственные данные / К.М. Абдулкадыров, В.А. Шуваев, И.С. Мартынкевич // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2015. - Т. 8, № 3. - С. 35-47.
31. Воробьев, А. И. Руководство по гематологии / А.И. Воробьев // Ньюдиамед. - 2003. - С. 9-15.
32. Абдулкадыров, К.М. Критерии диагностики и современные методы лечения первичного миелофиброза / К.М. Абдулкадыров, В.А. Шуваев, И.С. Мартынкевич // Вестник гематологии. - 2013. - Т. 9, № 3. - С. 139-147
33. Vannucchi, A.M. Molecular pathophysiology of Philadelphia-negative myeloproliferative disorders: beyond JAK2 and MPL mutations / A.M. Vannucchi, P. Guglielmelli // Haematologica. — 2008. — Vol. 93, № 7. — P. 972-976.
34. Lu, X. Expression of a homodimeric type I cytokine receptor is required for JAK2V617F-mediated transformation / X. Lu, R. Levine, W. Tong et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. — 2005. — Vol. 102, № 52. — P. 18962-18967.
35. Vannucchi, A.M. Clinical profi le of homozygous JAK2V617F mutation in patients with polycythemia vera or essential thrombocythemia / A.M. Vannucchi, E. Antonioli, P. Guglielmelli et al. // Blood. — 2007. — Vol. 110, № 3. — P. 840-846.
36. Klampfl, T. Somatic Mutations of Calreticulin in Myeloproliferative Neoplasms / T. Klampfl, H. Gisslinger, A.S. Harutyunyan et al. // N. Engl. J. Med. - 2013. - Vol. 369, № 25. - P. 2379-2390.
37. Nangalia, J. Somatic CALR Mutations in Myeloproliferative Neoplasms with Nonmutated JAK2 / J. Nangalia, C.E. Massie, E.J. Baxter et al. // N. Engl. J. Med. - 2013 - Vol. 369, № 25. - P. 2391-2405.
38. Rotunno, G. Impact of calreticulin mutations on clinical and hematological phenotype and outcome in essential thrombocythemia / G. Rotunno, C. Mannarelli, P. Guglielmelli et al. // Blood. - 2013. - Vol. 123, № 10. - P. 1552-1555.
39. Rumi, E. JAK2 or CALR mutation status defines subtypes of essential thrombocythemia with substantially different clinical course and outcomes / E. Rumi,
D. Pietra, V. Ferretti et al. // Blood. - 2013. - Vol. 123, № 10. - P. 1544-1551.
40.Shih, A.H. The role of mutations in epigenetic regulators in myeloid malignancies / A.H. Shih et al. //Nature Reviews Cancer. - 2012. - Vol. 12, № 9. - P. 599-612.
41. Nangalia, J. The evolving genomic landscape of myeloproliferative neoplasms / J. Nangalia, T.R. Green // ASH Education Program Book. - 2014. - Vol. 2014, № 1. - P. 287-296.
42. Abdel-Wahab, O.D. DNMT3A mutational analysis in primary myelofibrosis, chronic myelomonocytic leukemia and advanced phases of myeloproliferative neoplasms /
O. D. Abdel-Wahab, A. Pardanani, R. Rampal, T.L. Lasho et al. // Leukemia. - 2011.
- Vol. 25, № 7. - P. 1219-1220.
43. Pronier, E. Role of TET2 mutations in myeloproliferative neoplasms / E. Pronier, F. Delhommeau //Current hematologic malignancy reports. - 2012. - Vol. 7, № 1. - P. 57-64.
44. Delhommeau, F. Mutation in TET2 in myeloid cancers / F. Delhommeau, S. Dupont, V. Della Valle et al. // N Engl J Med. - 2009. - Vol. 360, № 22. - P. 2289-2301.
45. Gelsi-Boyer, V. Mutations in ASXL1 are associated with poor prognosis across the spectrum of malignant myeloid diseases / V. Gelsi-Boyer et al. // Journal of hematology and oncology. - 2012. - Vol. 5, № 1. - P. 1-4.
46. Martinez-Aviles, L. TET2, ASXL1, IDH1, IDH2, and c-CBL genes in JAK2-and MPL-negative myeloproliferative neoplasms / L. Martinez-Aviles et al. // Annals of hematology. - 2012. - Vol. 91, № 4. - P. 533-541.
47. Ernst, T. Inactivating mutations of the histone methyltransferase gene EZH2 in myeloid disorders / T. Ernst, A.J. Chase, J. Score et al. // Nat Genet. - 2010. - Vol. 42, № 8. - P. 722-726.
48.Stegelmann, F. DNMT3A mutations in myeloproliferative neoplasms / F. Stegelmann, L. Bullinger, R.F. Schlenk et al. // Leukemia. - 2011. - Vol. 25, № 7. -P. 1217-1219.
49. Zhou, Y. Unexpected Effects of FERM Domain Mutations on Catalytic Activity of Jak3 / Y. Zhou, M. Chen, N.A. Cusack et al. // Molecular Cell. — 2002. — Vol. 8, № 5. — P. 959-969.
50. Vardiman, J.W. The World Health Organization (WHO) classifi cation of the myeloid neoplasms / J.W. Vardiman, N.L. Harris, R.D. Brunning // WHO — 2002.
— Vol. 100. — P. 2292-2302.
51. Catalog Of Somatic Mutations In Cancer. - Режим доступа: http: //cancer.sanger.ac.uk/co smic/
52.Scott, L.M. The JAK2 exon 12 mutations: a comprehensive review / L.M. Scott // American journal of hematology. - 2011. - Vol. 86, № 8. - P. 668-676.
53. Lindauer, K. Prediction of the structure of human Janus kinase 2 (JAK2) comprising the two carboxy-terminal domains reveals a mechanism for autoregulation / K. Lindauer, T. Loerting, K.R. Liedl, R.T. Kroemer // Protein Eng. - 2001. - №. 14 - P. 27-37.
54. Giordanetto, F. Prediction of the structure of human Janus kinase 2 (JAK2) comprising JAK homology domains 1 through 7 / F. Giordanetto, R.T. Kroemer // Protein Eng. - 2002. - № 15. - P. 727-737.
55. Albiero, E. Loss of the JAK2 intramolecular autoinhibition mechanism is predicted by structural modelling of a novel exon 12 insertion mutation in a case of idiopathic erythrocytosis / E. Albiero, D. Madeo, M. Ruggeri et al. // Br J Haematol. - 2008. - № 142. - P. 986-990.
56. Lee, T.S. Structural effects of clinically observed mutations in JAK2 exons 13-15: Comparison with V617F and exon 12 mutations / T.S. Lee, W. Ma, X. Zhang et al. // BMC Struct Biol. - 2009. - № 9. - P. 58.
57. Rawlings, J.S. The JAK/STAT signaling pathway / J.S. Rawlings, K.M. Rosler, D.A. Harrison //Journal of cell science. - 2004. - Vol. 117, № 8. - P. 1281-1283.
58. Kleppe, M. JAK-STAT pathway activation in malignant and nonmalignant cells contributes to MPN pathogenesis and therapeutic response / M. Kleppe et al. // Cancer discovery. - 2015. - Vol. 5, № 3. - P. 316-331.
59.Scott, L.M. JAK2 exon 12 mutations in polycythemia vera and idiopathic erythrocytosis / L.M. Scott, W. Tong, R.L. Levine et al. // N Engl J Med. - 2007. - Vol.356. - P. 459-468.
60. Li, S. Clonal heterogeneity in polycythemia vera patients with JAK2 exon12 and JAK2-V617F mutations / S. Li, R. Kralovics, G. De Libero et al. // Blood. - 2008. - № 111. - P. 3863-3866.
61. Jones, A.V. Rapid identification of JAK2 exon 12 mutations using high resolution melting analysis / A.V. Jones, N.C. Cross, H.E. White et al. // Haematologica. - 2008. - № 93. - P. 1560-1564.
62. Rapado, I. High resolution melting analysis for JAK2 exon 14 and exon 12 mutations: A diagnostic tool for myeloproliferative neoplasms / I. Rapado, S. Grande,
E. Albizua et al. // J Mol Diagn. - 2009. - Vol. 11. - P. 155-161.
63.Schnittger, S. Detection of JAK2 exon 12 mutations in 15 patients with JAK2V617F negative polycythemia vera / S. Schnittger, U. Bacher, C. Haferlach et al. // Haematologica. - 2009. - № 94. - P. 414-418.
64. Laughlin, T.S. Detection of exon 12 mutations in the JAK2 gene: Enhanced analytical sensitivity using clamped PCR and nucleotide sequencing / T.S. Laughlin, A.R. Moliterno, B.L. Stein, P.G. Rothberg // J Mol Diagn. - 2010. - Vol. 12. - P. 278-282.
65. Pietra, D. Somatic mutations of JAK2 exon 12 in patients with JAK2 (V617F)- negative myeloproliferative disorders / D. Pietra et al // Blood. - 2008. - Vol. 111, №3. - P. 1686-1689.
66. Furtado, L.V. A multiplexed fragment analysis-based assay for detection of JAK2 exon 12 mutations / L.V. Furtado et al. //The Journal of Molecular Diagnostics. - 2013. - Vol. 15, № 5. - P. 592-599.
67. Субботина, Т.Н. Случай развития гомозиготности мутации N542-E543del в 12ом экзоне гена JAK2 у пациента с истинной полицитемией / Т.Н. Субботина, Е.А. Дунаева, К.О. Миронов, О.П. Дрибноходова и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2015. - Т. 60, № 9. - С. 37.
68. Миронов, К.О. Детекция генетических полиморфизмов с использованием системы генетического анализа на основе пиросеквенирования PyroMark Q24 / К.О. Миронов, Е.А. Дунаева, О.П. Дрибноходова и др. // Справочник заведующего КДЛ. - 2011. - № 4. - C. 39-48.
69. Миронов, К.О. Опыт использования систем генетического анализа на основе технологии пиросеквенирования / К.О. Миронов, Е.А. Дунаева, О.П. Дрибноходова и др. // Справочник заведующего КДЛ. - 2016. - № 5. - С. 33-42.
70. Mazaj, M.J.M. Identification of JAK2 exon 12 mutations in patients with polycythemia vera / M.J.M. Mazaj et al. // Zdravniski Vestnik. - 2012. - Vol. 81. - P. 161-167.
71. Kj^r, L. A highly sensitive quantitative real-time PCR assay for determination of mutant JAK2 exon 12 allele Burden / L. Kj^r, M. Westman et al. // PLoS One. - 2012. - Vol. 7, № 3. - P. 1-8.
72. Theocharides, A. The allele burden of JAK2 mutations remains stable over several years in patients with myeloproliferative disorders / A. Theocharides, J.R. Passweg, M. Medinger, R. Looser et al. // Haematologica. - 2008. - Vol. 93, № 12. - P. 18901893.
73. Lippert, E. Clinical and biological characterization of patients with low (0.1-2%) JAK2V617F allele burden at diagnosis / E. Lippert, O. Mansier, M. Migeon, B. Denys et al. // Haematologica. - 2014. - Vol. 99, № 7. - C. 98-101.
74. Nussenzveig, R.H. Increased frequency of coexisting JAK2 exon-12 or MPL exon-10 mutations in patients with low JAK2V617F allelic burden / R.H. Nussenzveig, H.T. Pham, S.L. Perkins, J.T. Prchal et al. // Leuk Lymphoma. - 2015. - № 30. - C. 1-22.

Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ
.