Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕРМАЛЬНОГО ЭКВИВАЛЕНТА НА БАЗЕ БИОПОЛИМЕРНЫХ НОСИТЕЛЕЙ

Работа №21543

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы49
Год сдачи2017
Стоимость5750 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
338
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 6
1.1 Тканевая инженерия 6
1.2 Материалы, используемые в тканевой инженерии 8
1.2.1 Природные полимеры 11
1.2.1.1 Коллаген 12
1.2.1.2 Фибрин 12
1.2.1.3 Гиалуроновая кислота 13
1.2.1.4 Альгинаты 13
1.2.1.5 Хитозан 15
1.2.2 Синтетические полимеры 16
1.2.2.1 Поликапролактон 19
1.2.2.2 Полимерные гидрогели 20
1.2.2.3 Поливиниловый спирт 21
1.2.3 Полигидроксиалканоаты 23
1.3 Особенности тканевой инженерии мягких тканей 26
1.3.1 Кожа 27
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 31
2.1 Объекты исследования 31
2.2 Изготовление и стерилизация плёночных образцов 32
2.3 Исследование физико-химических свойств полученных образцов 33
2.4 Выделение и ведение клеточных культур 34
2.4.1 Эмбриональные фибробласты мыши линии NIH 3T3 34
2.4.2 Кератиноциты человека 35
2. 5 Исследование абсолютного количества адгезированных клеток 36
2. 6 Исследование биосовместимости полученных плёночных образцов in vitro 37
2. 7 Окраска клеток флуоресцентным красителем DAPI 38
2. 8 Исследование биополимерных сферических частиц из полигидроксиалканоатов в качестве носителя для дермального эквивалента 38
2. 9 Статистическая обработка 39
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 40
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 42

В настоящее время медицина сталкивается с рядом трудностей, в частности трансплантация органов и тканей - одна из насущных её проблем. По оценке экспертов, реальная потребность в трансплантации органов в России составляет в год не менее 11 000 трансплантаций почки; 2000 - печени; 1100 - сердца (включая комплекс «сердце-легкие»); 800 - легких; 300 - поджелудочной железы [1].
Для трансплантации используются донорские органы, ксеногенные протезы, изготовленные из органов животных, и, наконец, трансплантаты из синтетических полимерных материалов. При этом имплантаты природного происхождения имеют ряд существенных недостатков, среди которых проблемы, связанные с иммунологической совместимостью, изменением размеров трансплантата со временем и возможным несовпадением размеров трансплантата и заменяемого органа, а также трудности с получением и хранением донорского материала. Искусственные имплантаты лишены некоторых из этих недостатков и позволяют восстановить утраченные органы и ткани.
Имеющиеся на сегодня искусственные имплантаты отличаются по механическим свойствам от природных; кроме того, они плохо интегрируются в ткани пациента и на их поверхности не формируется нормальный клеточный слой. Несмотря на немалый прогресс в создании материалов для протезирования за последние пятьдесят лет, таких как дакрон или политетрафторэтилен, возможности этих материалов на сегодняшний день практически исчерпаны.
Также одной из наиболее важных и сложных проблем современности являются злокачественные опухоли. В проблеме злокачественных опухолей важны как изучение этиологии и патогенеза, так и разработка новых методов лечения и реабилитации. При этом роль медицинской реабилитации в решении многих проблем онкологии существенно возросла. Это связано с внедрением новых технологий в медицинскую практику. Одним из наиболее перспективных и результативных направлений современной биомедицины является тканевая инженерия. Огромный интерес как в практическом отношении, так и в научном плане представляют культивирование, ауто- и аллотрансплантация выращенных вне организма клеток, формирование тканеинженерных конструкций (ТИК) с целью восстановления пораженных тканей.
С развитием тканевой инженерии одним из перспективных направлений для замещения тканей является создание клеточных графтов из биодеградируемых материалов в сочетании с донорскими клетками, способных восстанавливать поврежденный орган или ткань. Однако для успешной индукции пролиферации и дифференцировки в месте имплантации необходимо создать высокую начальную концентрацию клеток, поэтому возникает необходимость поиска адекватного носителя для закрепления трансплантируемых клеток в организме реципиента. Среди материалов, разрабатываемых и исследуемых применительно к этим задачам, -полигидроксиалканоаты (ПГА), линейные полиэфиры микробиологического происхождения, являются наиболее перспективными. ПГА представляют большой интерес для создания тканеинженерных конструкций в связи с их высокой биосовместимостью, медленной биодеградацией и механической прочностью.
В матриксы из ПГА могут быть депонированы биологически активные вещества, что позволяет реализовать наиболее комплексный подход в тканевой инженерии, включающий три компонента: клетки, каркасы, сигналы [2]. Эти свойства позволяет ПГА найти применение в широком спектре областей тканевой инженерии, связанных с восстановлением сердечно-сосудистой системы, поджелудочной железы и пищеварительной системы, почек и мочеполовой системы, опорно-двигательного аппарата, нервной системы, роговицы, зубов, кожи и т.д.
Особый интерес представляют материалы на основе хитозана - полисахарида, продукта деацетилирования хитина [3]. Пористые хитозановые матриксы используют как биосовместимые, биорезорбируемые и биоадгезивные изделия в медицинских и фармацевтических целях, в том числе в разных имплантационных системах [4]. Их применяют также при обработке ран, при регенерации мягких тканей [5], как гемостатические агенты с антитромбогенными свойствами [6] и как стимуляторы иммунной системы против вирусной и бактериальной инфекций [7].
Цель работы - разработка и изучение физико-химических и биологических свойств носителей на основе ПГА и хитозана в разных процентных соотношениях применительно к задачам тканевой инженерии.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
- изготовить плёночные образцы методом полива раствора из ПГА и хитин-содержащего биологического соединения и методами распылительного высушивания и испарения эмульсии;
- исследовать физико-химические свойства полученных образцов;
- оценить биосовместимость полученных плёночных образцов в культурах клеток животных.
Работа выполнена в Инновационном биомедицинском центре на базе «Сибирского Федерального Университета».


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь студентам в написании работ!


1. Готье, С.В., Органное донорство и трансплантация в Российской Федерации в 2015 г. IV сообщение регистра Российского трансплантологического общества / С.В. Готье, Я.Г. Мойсюк, С.М. Хомяков, О.С. Ибрагимова // Вестник трансплантологии и искусственных органов. - 2016. - №14 (3). - C. 6 - 18.
2. Хенч, Л. Биоматериалы, искусственные органы и инжиниринг тканей / Л. Хенч; под ред. А.А. Лушниковой. - Москва : Техносфера, 2007. - 304 с.
3. Pena, J. Destruction of chitosan matrix for tissue engineering / J. Pena, I. Izquierdo Barba, A. Martinez, M. Vallet Regi // Solid State Science. - 2006. - vol. 8. - P. 513 - 519.
4. Петрович, Ю.А. Композитные материалы на основе хитозана для тканевой инженерии / Ю.А. Петрович, А.Н. Гурин, Н.А. Гурин, С.М. Киченко // Российский стоматологический журнал. - 2008. - № 2. - С. 67-73.
5. Федотов А.Ю. Покрытия на основе хитозана для инжиниринга имплантов / Ю.А. Федотов [и др.] // Доклады Академии Наук. - 2011. - Т.437, № 1. - С. 65-67.
6. Li, X.Y. Chitosan-alginate microcapsules for oral delivery of egg yolk immunoglobulin (IgY) / X.Y. Li et al // Journal of Agricutural and Food Chemistry. - 2007. - vol. 55. - P. 2911 - 2917.
7. Байтукалов T.A. Ранозаживляющие свойства низкомолекулярного хитозана / Т.А. Байтукалов [и др.] // Известия РАН. Серия биологическая. - 2005. - № 6. - С. 659 - 663.
8. Langer, R. Tissue engineering / R. Langer, J.P. Vacanti // Science. — 1993. — vol. 260. — P. 920 - 926.
9. Hin, T. S. Engineering materials for biomedical application / T.S. Hin. - London : World Scientific Publishing Co. Pte. Ltd, 2004. - 350 p.
10. Кирилова, И.А. Новые виды материалов для костной пластики в свете современных представлений о костных трансплантатах / И. А. Кирилова, Н.Г. Фомичев, В.Т. Подорожная, В.И. Трубников // Хирургия позвоночника. - 2007. - №2. - С. 66 - 70.
11. Pittenger, M. F. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells/ M.F. Pittenger // Science. — 1999. — vol. 284. — P. 143-147.
12. Маланин, Д. А. Восстановление повреждений хряща в коленном суставе: монография / Д. А. Маланин, В. Б. Писарев, В. В. Новочадов. - Волгоград: Волгоградское научное издательство, 2010. - 518 с.
13. Isla, N. Introduction to tissue engineering and application for cartilage engineering / N. de Isla et al // Biomedical Materials and Engeneering. - 2010. - vol. 20, № 3. - P. 127-133.
14. O’Brien, F. J. Biomaterials and scaffolds for tissue engineering / F. J. O’Brien // Matererials Today. - 2011. - Vol. 14. - P. 88 - 95.
15. Kerker, J. T. Cartilage repair: synthetics and scaffolds - basic science, surgical techniques, and clinical outcomes / J.T. Kerker, A.J. Leo, N.A. Sgaglione // Sports Med. Arthrosc. - 2008. - Vol. 16, № 4, - P. 208-216.
16. Lu, T. Techniques for fabrication and construction of three-dimensional scaffolds for tissue engineering / T. Lu, Y. Li, T. Chen // International Journal of Nanomedicine - 2013. - Vol. 8. - P. 337-350.
17. Zhang, L. The role of tissue engineering in articular cartilage repair and regeneration / L. Zhang, J. Hu, K. A. Athanasiou // Critical Reviews™ in Biomedical Engineering. - 2009. - vol. 37, № 1-2. - P. 1-57.
18. Материалы для медицины, клеточной и тканевой инженерии
[Электронный ресурс] : электрон. учеб. пособие / Т. Г. Волова, Е. И.
Шишацкая, П. В. Миронов. - Электронные данные (6 Мб). - Красноярск : ИПК СФУ, 2009. - 1 электрон. опт. диск (DVD).
19. Полимеры в биологии и медицине / под ред. М. Дженкинс. - Москва: Научный мир, 2011. - 256 с.
20. Bastioli, C. Handbook of Biodegradable Polymers / C. Bastioli. - United Kingdom : Rapra Technology Limited, 2005. - 552 p.
21. Chen, Q. Progress and challenges in biomaterials used for bone tissue engineering: bioactive glasses and elastomeric composites / Q. Chen, Z. Chenghao, T. George // Progress in Biomaterials. - 2012. - vol. 1 (2). - P. 1 - 22.
22. Duan, B. Customized Ca-P/PHBV nanocomposite scaffolds for bone tissue engineering: design, fabrication, surface modification and sustained release of growth factor / B. Duan, M. Wang // Journal of the Royal Society. - 2010. - vol. 7. - P. 615 - 629.
23. Glowacki, J. Collagen Scaffolds for Tissue Engineering / J. Glowacki, S. Mizuno // Biopolymers. - 2007. - vol. 89 (5). - P. 338 - 344.
24. He, L. Fabrication and characterization of poly (l-lactic acid) 3D nanofibrous scaffolds with controlled architecture by liquid-liquid phase separation from a ternary polymer-solvent system / L. He et al // Polymer. - 2009. - vol. 50(16). - P. 4128 - 4138.
25. Kang, S.W. Surface modification with fibrin/hyaluronic acid hydrogel on solid-free form-based scaffolds followed by BMP-2 loading to enhance bone regeneration / S.W. Kang, J.S. Kim // Bone. - 2011. - vol. 48 (2). - P. 298 - 306.
26. Kim, H. Sustained release of ascorbate-2-phosphate and dexamethasone from porous PLGA scaffolds for bone tissue engineering using mesenchymal stem cells / H. Kim, H. Kim, H. Suh // Biomaterials. - 2003. - vol. 24 (25) - P. 4671 - 4679.
27. Liu, X. Biomimetic nanofibrous gelatin/apatite composite scaffolds for bone tissue engineering / X. Liu et al // Biomaterials. - 2009. - vol. 30 (12). - P. 2252 - 2258.
28. Севастьянов, В. И. Биосовместимые материалы: учебное пособие / В.И. Севастьянов. - Москва : Медицинское информационное агентство, 2011. - 544 с.
29. Нудьга, Л.А. Получение хитозана, его производных и исследование их свойств: автореф. дис. ... канд. хим. наук : 02.00.06 / Нудьга Людмила Александровна. - Ленинград, 1979. - 20 с.
30. Muzzarelli, R.A.A. New derivatives of chitin and chitosan: properties and applications / R.A.A. Muzzarelli // New Dev. Ind. Polysaccharides Proc.Conf. - New York, 1985. - P. 207 - 231.
31. Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. - Москва : Наука, 2002. - 368 с.
32. Бондаренко, В.М. Воздействие хитозана на ультраструктуру клеток патогенных и условно патогенных микроорганизмов / В.М. Бондаренко, О.В. Рыбальченко, Н.Б. Вербицкая, С.Ф. Антонов // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана : материалы восьмой международной конференции / ВНИ-РО. - Москва, 2006. - С. 175-179
33. Дарашкевич, О.Н. Биоцидные свойства хитозана различной степени деполимеризации / О.Н. Дарашкевич, О.В. Добролеж, Н.Б. Вербицкая Н. Б., С.Ф. Антонов, Н.Н. Золина, О.В. Рыбальченко // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана : материалы седьмой международной конференции / ВНИ-РО. - Москва, 2003. - С. 239-240.
34. Дорожкин, С.В. Биоматериалы: Обзор рынка / С.В. Дорожкин, С. Агатопоулус // Химия и жизнь. - 2002. - № 2. - С. 8 - 10.
35. Вольф, H.A. Производство поликапроамида / Л.А. Вольф, Б.Ш. Хайтин. - Москва : Химия, 1977. - 208 с.
36. Narayan, R. Biomedical Materials / Roger Narayan. — Springer, 2009. — 550 p.
37. Nirmala, R. Hydroxyapatite mineralization on the calcium chloride blended polyurethane nanofiber via biomimetic method / R. Nirmala, K.T. Nam // Nanoscale Research Letters. - 2011. - vol. 6 (2). - P. 134 - 147.
38. Schofer, M.D. Functionalisation of PLLA nanofiber scaffolds using a
possible cooperative effect between collagen type I and BMP-2: impact on growth
and osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells / M.D. Schofer et al // The Journal of Materials Science: Materials in Medicine. - 2011. - vol. 22. - P. 1753 - 1762.
39. Wang, Y. Porous poly (lactic-co-glycolide) microsphere sintered scaffolds for tissue repair applications / Y. Wang, X. Shi // Materials Science and Engineering. - 2009. - vol. 29 (8). - P. 2502 - 2507.
40. Биотехнология: принципы и применение / под ред. И. Хиггинс. - Москва : Мир, 1988. - 480 с.
41. Волова, Т.Г. Полиоксиалканоаты (ПОА) - биоразрушаемые полимеры для медицины: науч. изд. / Т.Г. Волова, В.И. Севастьянов, Е.И. Шишацкая. - Новосибирск : Издательство СО РАН, 2003. - 330 с.
42. Николаева, Е.Д. Влияние обработки Н2020-плазмой на свойства клеточных носителей из резорбируемых полиэфиров «биопластотан» / Е.Д. Николаева, Д.Б. Еончаров, Е.И. Шишацкая // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2011. - T.VI, № 2. - С. 65 - 70.
43. Williams, S.F. Applications of Polyhydroxyalkanoates (PHA) in Medicine and Pharmacy / S. F. Williams, D.P. Martin // Biopolymers Online. - 2005. - P. 91 - 103.
44. Шишацкая, Е.И. Клеточные матриксы из резорбируемых полигидроксиалканоатов / Е.И. Шишацкая // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2007. - T.II, №2. - С. 68 - 76.
45. Murueva A.V. Microparticles prepared from biodegradable polyhydroxyalkanoates as matrix for encapsulation of cytostatic drug / A.V. Murueva et al // Journal of Materials Science: Materials in Medicine. - 2013. - vol. 24. - P. 1905 - 1915.
46. Murueva, A.V. The use of polymeric microcarriers loaded with anti-infl ammatory substances in the therapy of experimental skin wounds / A.V. Murueva, A.M. Shershneva, E.I. Shishatskaya, T.G. Volova // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2014. - vol. 157. - P. 597 - 601.
47. Карпюк, В.Б. Клеточные технологии в восстановительной хирургии
опорных и мягких тканей челюстно-лицевой области / В.Б. Карпюк, П.М. Лаврешин, М.Д. Перова // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. - 2015. - №3. - С. 87 - 96.
48. Руднева, А.А. Реакция тканей кожи на синтетический материал «Тиопрост», разработанный для использования в тканевой инженерии / А.А. Руднева [и др.] // Гены и Клетки. - Москва, 2010. - Т.5, №1. - С. 53 - 57.
49. Гусева, А.С. Реакция тканей гиподермы на конструкционные материалы, применяемые в стоматологии в интересах тканевой инженерии / А.С. Гусева, Л.М. Рысева, А.С. Гук, В.П. Румакин // Гены и Клетки. - Москва, 2007. - Т.2, №1. - С. 60 - 64.
50. Гусев, С.А. Система отбора перспективных имплантируемых трехмерных полимерных материалов для тканевой инженерии / С.А. Гусев, П.А. Щеплев, Н.Н. Гарин, Г.Г. Борисенко // Перспективные материалы. - Москва, 2005. - №6. - С. 49 - 56.
51. Craigie, J.E. Autogenous breast reconstruction with the deep inferior epigastric perforator flap / J.E. Craigie, R.J. Allen, F.J. DellaCroce, S.K. Sullivan // Clinics in Plastic Surgery. - 2003. - vol.3 - P. 30 - 39.
52. Disa, J.J. Dextran-related complications in head and neck microsurgery: do the benefits outweigh the risks? A prospective randomized analysis / J.J. Disa et al // Plastic and Reconstructive Surgery. - 2003. - vol. 12. - P. 1512 - 1534.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.



Подобные работы


©2024 Cервис помощи студентам в выполнении работ