ВВЕДЕНИЕ 3
Глава 1. Обзор литературы 5
1.1 Негативные последствия накопления в биосфере синтетических полимерных материалов 5
1.2 Характеристика ПГА: синтез, свойства, распространение 6
1.3 Закономерности биодеградации ПГА 8
1.4 Биодеградация полигидроксиалканоатов и выявление микроорганизмов-деструкторов 10
Глава 2. Объекты и методы исследования 14
2.1 Характеристика района исследования 14
2.2 Схема эксперимента 15
2.3 Методы микробиологического анализа 16
Глава 3. Результаты исследования 20
3.1 Деградация образцов полимеров в почве Центральной Эвенкии 20
3.2 Определение общей численности микроорганизмов на поверхности образцов 20
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 23
Список использованной литературы 24
Развитие науки и техники приводит к все более широкому внедрению в практику целевых продуктов, синтезируемых микроорганизмами. Ценным продуктом биотехнологии являются микробные полигидроксиалканоаты (ПГА), полимеры гидроксипроизводных жирных кислот, которые обладают спектром полезных свойств, включая биосовместимость и биоразрушаемость. ПГА перспективны в качестве материала и изделий биомедицинского назначения, разрушаемой упаковки пищи и напитков, предметов гигиены и санитарии, изделий и препаратов для коммунального и сельского хозяйства. Наблюдаемое сегодня наращивание объемов выпуска и расширение сфер применения ПГА делают необходимым изучение способности окружающей среды к самоочищению от этого вида биологической продукции. Разрушаемость ПГА зависит от многих факторов: химический состав и структура полимера, численность и метаболическая активность микроорганизмов как главного агента их биодеградации, климатогеографические условия окружающей среды [1].
Скорость разрушения изделий из ПГА зависит от температуры и наличия сообщества первичных деструкторов, таксономический состав которых может отличаться в зависимости от региона. Центральная Эвенкия - регион, в котором продолжительность вегетационного периода незначительна, а колебания температур достигают от -60°С до +39°С. В таких условиях деструкция органического вещества в почве протекает со значительно меньшими скоростями, чем в средних широтах.
В связи с этим целью настоящей работы было исследование микробиологической деградации полимерных пленок из поли-3- гидроксибутирата (П3ГБ) в почвах Центральной Эвенкии.
Были поставлены следующие задачи:
1. Провести сравнительный анализ почвенной деградации образцов из П3ГБ и других наиболее часто используемых биоразрушаемых полимеров: целлюлозы и полиэтилена с деградирующими добавками.
2. Определить численность микроорганизмов на поверхности образцов изделий из П3ГБ и других биоразрушаемых полимеров, экспонированных в почве.
3. Выделить микроорганизмы-деструкторы П3ГБ с поверхности полимерных образцов и провести их идентификацию.
По результатам работы были сделаны следующие выводы:
1) За 15 месяцев экспозиции биолазлагаемых полимеров в субарктических почвах Центральной Эвенкии заметному разрушению подверглись только образцы из целлюлозы.
2) Максимальная численность бактерий на поверхности образцов, экспонированных на южном склоне, была зарегистрирована для полиэтилена с деградирующими добавками (пакет из супермаркета) и целлюлозы; на северном склоне - для П3ГБ. Численность микроорганизмов зависела от гидротермического режима почвы и свойств поверхности полимера.
3) В почвах Центральной Эвенкии выявлено и идентифицировано 28 штаммов бактерий первичных деструкторов П3ГБ.
1. Прудникова С.В., Волова Т.Г. Экологическая роль полигидрокси- алканоатов - аналога синтетических пластмасс: закономерности биоразрушения в природной среде и взаимодействия с микроорганизмами - Красноярск 2012.
2. Зайцев Ю.П. Введение в экологию Черного моря. - Одесса: «Эвен», 2006. - 224 с.
3. Потапов А.Г., Пармон В.Н. Биоразлагаемые полимеры - вперед в будущее // Экология и промышленность. - 2010. - №5. - С. 4-8.
4. Фомин В.А., Гузеев В.В. Биоразлагаемые полимеры, состояние и перспективы использования // Пластические массы. - 2001. - №2. - С. 42-46.
5. Cheng M.-L. Change of structure and free volume properties of semi-crystalline poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) during thermal treatments by positron annihilation lifetime// Polymer. - 2009.
6. Dawes, E.A. Novel biodegradable microbial polymers. Kluwer Academic, Dordrecht. - Netherlands, P.1990. - 287.
7. Словари и энциклопедии на академике. Эвенкийский округ: статья.
8. Официальный сайт Эвенкийского стационара ИЛ СО РАН. URL: http://forest.akadem.ru/State/EVE.html
9. Волова Т.Г., Беляева О.Г., Калачева Г.С. Исследование разрушаемости микробных полимеров //Сибирский экологический журнал - 1997, № 5 - С. 505-510.
10. Do Young Kim, Hyung Woo Kim, Moon Gyu Chung, Young Ha Rhee. Biosynthesis, modification and biodegradation of bacterial medium-chain-length polyhydroxyalkanoates // The Journal of Microbiology. - 2007. - Vol.4, No.2. - P. 87-97.
11. Grassie, N., Murray E.J. The thermal degradation of poly(-D-)-e- hydroxybutyric acid: part I - Identification and quantitative analysis of products // Polym Degrad. and Stability. - 1984. - V.6. - P.47-61.
12. Волова Т.Г., Калачева Г.С. Полиоксибутират - термопластичный биодеградируемый полимер (получение, свойства, применение). - Красноярск, 1990. - 47 с.
13. Cheng M.-L. Change of structure and free volume properties of semi-crystalline poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) during thermal treatments by positron annihilation lifetime// Polymer. - 2009.
14. Lee J.-C. Higher-order structural analysis of bacterial poly[I-3- hydroxybutyrate-co-I-3-hydroxyhexanote] highly oriented films// Polymer. - 2008.
15. Волова Т.Г., Беляева О.Г., Калачева Г.С. Исследование разрушаемости микробных полимеров //Сибирский экологический журнал - 1997, № 5 - С. 505-510.
16. Волова Т.Г., Калачева Г.С. Полиоксибутират - термопластичный биодеградируемый полимер (получение, свойства, применение). - Красноярск, 1990. - 47 с.
17. Звягинцев Д.Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии. - М.: изд-во МГУ, 1990. 303 с.
18. Волова Т.Г., Бояндин А.Н., Васильев А.Д. [и др.]. Биодеградация поли-гидроксиалконатов(ПГА) в Восточном море и идентификация ПГА- деградирующих бактерий// Микробиология. - 2011. - Т.80,№2. - С.266-274
19. Мокеева В.Л., Чекунова Л.Н., Мышкина В.Л. [и др.] Биодеструкция поли-в-гидроксибутирата микроскопическими грибами: испытание грибостойкости и фунгицидных свойств полимера// Микология и фитопатология. - 2002. - Т.36, вып.5. - С.59-63.
20. Suayama T., Tokiwa Y., Ouichanpagdee P. [et al.]. Phylogenetic affiliation of soil bacteria that degrade aliphatic polyesters available commercially as biodegradable plastics// Appl. Environ. Microbiol. - 1998. - Vol.64, No.12. - P.5008-5011.
21. Волова Т.Г., Беляева О.Г., Калачева Г.С. Исследование разрушаемости микробных полимеров //Сибирский экологический журнал - 1997, № 5
22. Кузнецов А. Е., Градова Н. Б. Научные основы экобиотехнологии. - М.: Мир, 2006. - С. 504.
23. Могилевская И. В., Владимцева И. В. Современные проблемы загрязнения окружающей среды. Углеводородокисляющие микроорганизмы для биологической очистки сточных вод и загрязненных почв //Технические науки. - 2005. - С. 67-68
24. Мирчинк Т.Г. Почвенная микология. М.:Изд.-во МГУ, 1988. 220 с.
25. Успехи микробиологии. / Под редакцией А.А. Имшеницкого. - М.: «Наука», 1968б. - Т. 15. -225 с.
26. Никитина Е. В., Решетник О. А. Методы общей и специальной микробиологии. - 2007. - С.64.
27. Хенч Л., Джонс Д. Биоматериалы, искусственные органы и инжиниринг тканей / под ред. А.А.Лушниковой. - М.: Техносфера. - Серия «Мир биологии и медицины», 2007. - 304 с.
28. Штильман М.И. Полимеры медико-биологического назначения. - М.: ИКЦ «Академкнига», 2006.-399 с.
29. Asrar J. and Gruys K. J. Biodegradable Polymer (Biopol®) // Series of Biopolymers in 10 vol. / A. Steinbuchel Ed. - Wiley-VCY Verlag GmbH. - 2002. - Vol. 4. - P. 55-86.
30. Pandey J.K., Reddy K.R., Kumar A.P., Singh R.P. An overview on the degradability of polymer nanocomposites. // Polymer Degradation and Stability. - 2005. - V.88. - P.234-250.
31. Bahri Z., Taverdet J.L. Elaboration and characterization of microparticles loaded by pesticide model// Powder Technology. - 2006. - Vol. 172. - P. 31-41.
32. Kasuya K.I. [et al.] Biochemical and molecular characterization of the polyhydroxybutyrate depolyme-rase of Comamonas acidovorans YM1609, isolated from freshwater//. Appl. Environ. Microbiol. - 1997. - Vol.63, No.12. - P.4844-4852.
33. Bonartsev A.P., Zaikov G.E., Krylova L.P [et al.]. Biodegradation and medical application of microbial poly(3-hydroxybutyrate)// Biotechnology, Biodegradation Water and Foodstuffs. - Nova Science Publishers, Inc., 2009. - P.1-35.
34. Braunegg, G., Lefebvre G., Genzer K.F. Polyhydroxyalkanoates, biopolyesters from renewable resources: Physiological and engineering aspects (Rewiew article). - of Biotechnol,1998.-N 65.- P.127-161.
35. Brandl, H.J., Knee E. Ability of phototrophic bacterium Rhodospirillum rubrum to produce various poly(B-hydroxyalkanoates) potencial sources for biodegradable polyesters. - Int. J.Biol. Macromol. - Vol 11. - Feb. - 1989. - P. 49-56.
36. Масягина О.В. Эмиссия CO2 напочвенным покровом и почвой лиственничников криолитозоны Средней Сибири: дисс. ... канд. биол. наук : 03.00.16/ Масягина Оксана Викторовна. Красноярск, 2003
37. Нетрусов А. И., Егорова М. А., Захарчук Л. М. (2005). Практикум по микробиологии /Под ред. А.И. Нетрусова. М.: Академия.
38. Определитель бактерий Берджи = Bergey's Manual of Systematic Bacteriology/ Под ред. Д. Холт и др. Москва: Мир, 1997.
39. Garrity G.M., Brenner D.J., Krieg N.R., Staley J.T. (Eds.) Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Vol. 2. Berlin: Springer, 2005.
40. De Vos P., Garrity G.M., Jones D., Krieg N.R., Ludwig W., Rainey F.A., Schleifer K.H., Whitman W.B. (Eds.) Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Vol. 3. Berlin: Springer, 2009.