Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


Влияние технологических параметров экстракции на выход и характеристики ПГА, синтезируемые бактериями Cupriavidus eutrophus

Работа №19489

Тип работы

Главы к дипломным работам

Предмет

биология

Объем работы35
Год сдачи2018
Стоимость7300 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
426
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


РЕФЕРАТ 2
СОДЕРЖАНИЕ 3
ВВЕДЕНИЕ 5
1 Обзор литературы 7
1.1 Полигидроксиалконаты : Структура и свойства 7
1.2 Методы экстракции ПГА из биомассы бактерий 11
1.2.1 Экстракция растворителем 12
1.2.2 Деградация поверхностно-активными веществами 13
1.2.3 Деградация с помощью гипохлорита натрия 14
1.2.4 Применение гидроксида натрия и гидроксида калия 14
1.2.5 Применение сверхкритических флюидов 15
1.2.6 Ферментативное расщепление 15
1.2.7 Центрифугирование и химическая обработка 17
1.2.8 Гомогенизация под высоким давлением с использованием
растворителя 17
1.2.9 Применение ферментов и растворителей 18
1.2.10 Осмотический шок 18
1.2.11 Ультразвуковая экстракция 19
1.2.12 Метод шаровой мельницы 19
1.2.13 Метод селективной флотации 20
2 Объект и методы исследования 21
2.1 Биосинтез бактерий Cupriavidus eutrophus B10646 21
2.1.1 Приготовление питательных растворов и их стерилизация 21
2.1.2 Получение инокулята из музейной культуры 23
2.1.3 Получения инокулята в ферментёре-инокуляторе 23
2.1.4 Двустадийная ферментация в производственном ферментёре 23
2.1.5 Концентрирование бактериальной культуры 24
2.1.6 Центрифугирование и лиофильная сушка сгущенной культуры .. 25
2.2 Объект исследования 25
2.3 Методы исследования
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Накопление пластиковых отходов стала серьезной проблемой с точки зрения окружающей среды. Широкое использование нефтехимическое производство в связи с их универсальными свойствами, особенно вызывает серьезные проблемы в области загрязнения отходами, влияющих на эстетическое качество городов, водоемов и природных территорий. Проблемы, касающиеся глобальной окружающей среды создали большое внимания при разработке ЭКО-продуктов. Биополимеры - это один из продуктов, который может помочь преодолеть проблемы, вызванные нефтехимическими полимерами [14].
Среди различных типов биополимеров, полигидроксиалканоаты (ПГА) представляют перспективную группу полимеров, так как они являются биологически совместимые, термопластичные и не токсичные, что делает их пригодными для различных областей применения в промышленности, медицине и сельском хозяйстве [4].
Масштабы использования полиоксиалканоатов в настоящее время тормозится достаточно большой стоимостью (практически на порядок более высокой по сравнению с полиолефинами). Однако усиливающиеся требования к охране окружающей среды и имеющиеся перспективы снижения стоимости биополимеров за счет увеличения эффективности производства делают ПГА, как одним из перспективных материалов XXI века [34].
Экономические оценки показали, что затраты на выделение ПГА из клеточной биомассы значительно уменьшаются с увеличением содержания полимера в клетке. Согласно этим расчетам, при 88%-ном содержании полимера стоимость выделения составит 0,92, а при 50%-ном - 4,8 $ США за 1 кг. Это удорожание обусловлено использованием большего количества вещества для выделения полимера [6].
При выборе метода выделения ПГА из биомассы необходимо учитывать стоимость реагентов, количество образующихся отходов, эффективность извлечения полимера, степень его чистоты [30].
Стоимость производства ПГА в основном зависит от дальнейшей обработки и, следовательно, разработка методов экстракции ПГА требуется сделать весь процесс гораздо проще и дешевле, что позволит при большой производительности снизить стоимость ПГА до 3-4 $ США за 1 кг, которые соизмеримы со стоимостью полилактидов и алифатических полиэфиров [19].
Цель работы: выявить влияние технологических параметров экстракции этанолом на выход ПГА.
Для достижения цели, поставлены следующие задачи:
1. Провести биосинтез бактерий Cupriavidus eutrophus B10646 и получить образцы биомассы для дальнейшего исследования;
2. Исследовать влияние технологических параметров экстракции этанолом (температуры, времени, концентрации и объема этанола в биомассе) на выход ПГА и его характеристики, а также определить оптимальные параметры процесса;
3. На основании полученных результатов, предложить математическую модель влияния параметров экстракции этанолом на выход ПГА.

Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!


1. Реализована технология культивирования бактерий Cupriavidus eutrophus B10646 на опытном производстве ПГА, и получены образцы бактериальной биомассы для дальнейших исследований.
2. Исследовано влияние технологических параметров обработки биомассы этанолом на полноту извлечения и характеристики ПГА. Установлено, что изменение технологических параметров экстракции этанолом в исследованном диапазоне позволяет влиять на полноту извлечения полимера, а также его чистоту и не оказывает существенное влияние на его молекулярно-массовые характеристики. Использование этанола с концентрацией 96 % в соотношении этилового спирта к биомассе бактерий 8:1 при температуре экстракции 45°С в течение 60 мин обеспечивает выход 80 % ПГА с чистотой более 96%.
3. Уравнение Y = 61.35-5.34 X1 + 2.02 X2 + 4.82 X3 + 6.65 X4 (12) дает представление о количественном влиянии каждого фактора на выход ПГА в процессе экстракции и показывает возможное управление этим процессом.



1. Alarfaj A. A. Extraction and characterization of polyhydroxybutyrates (PHB) from Bacillus thuringiensis KSADL127 isolated from mangrove environments of Saudi Arabia / A. A. Alarfaj, M. Arshad, E. N. Sholkamy, M. A Munusamy // Brazilian Archives of Biology and Technology. - 2015. - Vol.5, №58. - Р. 781-788.
2. Bossio J. P. Detection and degradation of organic contaminants in an agricultural soil amended with alkaline-treated biosolids / J. P. Bossio, J. Harry, C. A. Kinney // Can. J. Soil Sci - 2014. - Vol. 94. - P. 595-604.
3. Brodsky V.Z Introduction to the Factorial Design of Experiments (Mathematical Foundations) /Manhattan Academia - 2013. - P. 44.
4. Bugnicourt E. Polyhydroxyalkanoate (PHA): review of synthesis, characteristics, processing and potential applications in packaging / E. Bugnicourt, P. Cinelli, A. Lazzeri, V. Alvarez // Express Polym. Lett.. - 2014. - № 11. - P. 791-808.
5. Divyashree M.S. Effect of gamma irradiation on cell lysis and polyhydroxyalkanoate produced by Bacillus flexus / M.S. Divyashree, T.R. Shamala // Radiation Physics and Chemistry. - 2009. - Vol.78, №2. - P. 147 - 152.
6. Filomena Doutora Maria Andrade de Freitas : Investigation of the Adhesive Properties of Bacterial Medium-Chain-Length Polyhydroxyalkanoates (mcl-PHA) for Medical Applications // Theses and studies in the field of biological diversity- 2016. - P. 13.
7. Gurtovenko A. A. Interaction of ethanol with biological membranes: the formation of non-bilayer structures within the membrane interior and their significance/ A. A. Gurtovenko J. Anwar //The Journal of Physical Chemistry - 2009. - P. 1983-1992.
8. Heinrich1 Daniel Large scale extraction of poly(3-hydroxybutyrate) from Ralstonia eutropha H16 using sodium hypochlorite./ Daniel Heinrich1,
Mohamed H Madkour, Mansour A Al-Ghamdi, Ibraheem I Shabbaj and Alexander Steinbuchel Heinrich et al. AMB Express. - 2012. - Р 234.
9. Hejazi P. Supercritical fluid disruption of Ralstonia eutropha for poly(3-hydroxybutyrate) recovery / P. Hejazi, E. Vasheghani-Farahani, Y. Yamini // Biotechnology Progress. - 2003. - №19. - P. 1519-1523.
10. Ipsita Roy. Polyhydroxyalkanoate (Pha) Based Blends, Composites and Nanocomposites./ Ipsita Roy, P. M. Visakh - RSC Green Chemistry No. 30, 2014. - Р. 47.
11. Jacquel Nicolas Isolation and purification of bacterial poly(3- hydroxyalkanoates)./ Nicolas Jacquel , Chi-Wei Lo, Yu-Hong Wei ,Ho-Shing Wu, Shaw S. Wang // Biochemical Engineering Journal - 2008. - Vol. 39(1). - P. 15- 27.
12. Jong-il Choi Efficient and economical recovery of poly(3- hydroxybutyrate) from recombinant Escherichia coli by simple digestion with chemicals / Jong-il Choi, Sang Yup Lee // Biotechnology and Bioengineering - 1999. - Vol . 62. - P. 546-553
13. Kapritchkoff F. M. Enzymatic recovery and purification of polyhydroxybutyrate produced by Ralstonia eutropha / F.M. Kapritchkoff, P.A.Viott, R.C.P. Alli, M. Zuccolo, J.G.C Pradella, A.E. Maiorano, E. A. Miranda, A. Bonomi // Journal of biotechnology. - 2006. - Vol. 122, №. 4. - P. 453- 462.
Khosravi-Darani K. Application of Supercritical Fluid Extraction in Biotechnology/ K. Khosravi-Darani , E. Vasheghani-Farahani // Journal Critical Reviews in Biotechnology - 2008. - Vol. 25. - P. 231-242.
14. Koller M. Extraction of short-chain-length poly-[(R)- hydroxyalkanoates] (scl-PHA) by the ‘‘anti-solvent'' acetone under elevated temperature and pressure / M. Koller, R. Bona, E. Chiellini, G. Braunegg // Biotechnology Letters. - 2013. - № 35. - P. 1023-1028.
15. Kunasundari B. Isolation and recovery of microbial polyhydroxyalkanoates / B. Kunasundari, K. Sudesh // eXPRESS Polymer Letters. - 2011. - Vol.5. №7. - P.620 - 634
16. Ling Y. Recovery of poly-3-hydroxybutyrate from recombinant Escherichia coli by homogenization and centrifugation / Y. Ling, D.R.G. Williams, C.J. Thomas, A.P.J. Middelberg // Biotechnol. Technol. - 1997. - Vol. 11. - P. 409.
17. Linton E. A Synthetic Biological Engineering Approach to Secretion¬Based Recovery of Polyhydroxyalkanoates and Other Cellular Products / Elisabeth Linton / Utah State University. - 2010. - Р. 161.
18. Mikkili I. Isolation, Screening and Extraction of Polyhydroxybutyrate (PHB) producing bacteria from Sewage sample / I. Mikkili, A. P Karlapudi, T.C. Venkateswarulu, J. Babu D., S.B. Nath, V. P. Kodali // International Journal of PharmTech Research. - 2014. - Vol.6, №2. - P. 850 - 857.
19. Mohammadi M . Recovery and purification of intracellular polyhydroxyalkanoates from recombinant Cupriavidus necator using water and ethanol / M. Mohammadi, А. М. Hassan, L-Y. Phang, Н. Ariffin, Y. Shirai, Y. Ando // Biotechnology Letters. - 2012. - № 2. - P. 253-259.
20. Neves A. Use of Enzymes in Extraction of Polyhydroxyalkanoates Produced by Cupriavidus necator / A. Neves, J. Muller // Biotechnology Progress. - 2012. - Vol. 28, №6. - Р. 1575 - 1580
21. Paramjeet Khandpur Study on Production, Extraction and Analysis of Polyhydroxyalkanoate (PHA) from Bacterial Isolates./ Khandpur Paramjeet, E.T. Jabeen, K.V.L Rohini, Y. Varaprasad, B. Laxminarayana-IOSR Journal of Pharmacy and Biological Sciences (IOSRJPBS) ISSN : 2278-3008 - Volume 1, Issue 1 - (May-June 2012).
22. Quines Luci K. M. METHODS OF EXTRACTION OF POLYHYDROXYALKANOATES FROM BACTERIAL BIOMASS / Luci K. M. Quines, Melodi Schmidt, Kellen Zanfonato, Willibaldo Schmidell e Glaucia M. F. Aragao // Qrnm. Nova vol. 38 - 2015. - P. 1207-1218.
23. Rawte T. A rapid hypochlorite method for extraction of polyxydroxy alkanoates from bacterial cells/ T. Rawte S. , Mavinkurve. // Indian Journal of Experimental Biology - 2002. - Vol.40. - P 924-929.
24. Salmiati, Recovery of Polyhydroxyalkanoates (PHAs) from Mixed Microbial Cultures by Simple Digestion and Saponification. / Salmiati, Z. Ujang , M.R. Salim, G. Olsson - The 3rd IWA-ASPIRE. Conference 8 Exhibition, Taipei, Taiwan. - October 18-22, 2009.
25. Scott Gerald Degradable Polymers: Principles and applications./ Gerald Scott, Dan Gilead. - 1995. - Р 89.
26. Tan G-Y. A. Start a Research on Biopolymer Polyhydroxyalkanoate (PHA): A Review / Tan G-Y. A. C. Chia-Lung, L. Li , L. Ge, L. Wang, I. M. N. Razaad, Y. Li, L. Zhao, Y. Mo, J-Y. Wang // Polymers. - 2014. - № 6. - P. 706¬754.
27. Van Hee P. Selective recovery of polyhydroxyalkanoate inclusion bodies from fermentation broth by dissolved-air flotation //Journal of colloid and interface science. - 2006. - №. 2. Vol . 297. - P. 595-606.
28. Yasotha K. Recovery of medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (PHAs) through enzymatic digestion treatments and ultrafiltration / K.Yasotha, M. K. Aroua, K. B. Ramachandran, I. Tan // Biochemical Engineering Journal. - 2006. - № 30. - Р. 260-268.
29. Барановский С. В. Культивирование микроорганизмов в ферментере BioFlo115 (7,5л.) [Электронный ресурс] : методические указания к лабораторному практикуму / С. В. Барановский, А. В. Демиденко, Е. Г. Киселев. - Красноярск: СФУ, 2016. - Режим доступа : http://publishing.sfu- kras.ru/content/uchebno-metodicheskoe-posobie-1615
30. Введение в биотехнологию. Версия 1.0 [Электронный ресурс] : метод. ука-зания по лаб. работам / сост. : Т. Г. Волова, Н. А. Войнов, Е. И. Шишацкая, Г. С. Калачева. - Электрон. дан. (2 Мб). - Красноярск : ИПК СФУ, 2008.
31. Влияние различных факторов на протекание процесса экстракции [Электронный ресурс] / Режим доступа:
https: //znaytovar.ru/new740. html
32. Воинов Н. А. Полигидроксиалканоаты - биоразрушаемые полимеры гидроксипроизводстных алкановых кислот: синтез, свойства, области применения [Электронный ресурс] / Н. А. Воинов, Т. Г. Волова // Медицинский сайт MedBe.ru - 2013. - Режим доступа: http://medbe.ru/materials/problemy-i-metody- biotekhnologii/poligidroksialkanoaty-biorazrushaemye-polimery-gidroksipro izvodstn ykh-alkanovykh-kislot-sintez-svoys/
33. Воинов Н.А. Современные проблемы и методы в биотехнологии [Электронный ресурс] : электронный учебный методический комплекс / Н. А. Воинов, Т. Г. Волова, С.В. Маркова, Л.А. Франк, Е.И. Шишацкая . - Красноярск, ИПК СФУ, -2009. - С. 288.
34. Волова Т.Г. Полиоксиалканоаты (ПОА) - биоразрушаемые полимеры для медицины/ Волова Т.Г., Севастьянов В.И., Шишацкая Е.И. - Новосибирск, Издательство СО РАН. - 2003. - С. 330.
35. Дорожкин В.П. Химия и физика полимеров: учебное пособие / Нижнекамск- Нижнекамский химико-технологический институт, 2013 - С. 189.
36. Жила Н.О. Характеристика культуры Cupriavidus eutrophusВ- 10646, синтезирующей полигидроксиалканоаты при росте на сахарах и липидных субстратах / Н. О. Жила, Т. Г. Волова, Г. С. Калачева // Журнал Сибирского Федерального Университета. Сер. 2. Биология. - 2014. - № 2. - С.161-173.
37. Киселев Е. Г. Масштабирование технологии синтеза биодеградируемых полигидроксиалканоатов в условиях опытного производства / Е. Г. Киселе, А. В. Демиденко, С. В. Барановский,Т. Г. Волова // Журнал Сибирского Федерального Университета. Сер. 2. Биология. - 2014. - № 7 - С. 134-147.
38. Киселев Е. Г. Технико-технологические основы биосинтеза резервных полигидроксиалканоатов водородными бактериями : автореф. дис. .. канд. биол. наук : 03.01.06 / Киселев Евгений Геннадьевич. - Красноярск. - 2012. - С. 20.
39. Киселев Е.Г. Сравнительное исследование методов экстракции полигидроксиалканоатов из биомассы бактерий. / Е.Г. Киселев, А.В Демиденко: Журнал СФУ, Биология. - 2014 (7). - С. 148 - 160
40. Сутягин В. М. Основные свойства полимеров: учебное пособие / В. М. Сутягин, О. С. Кукурина., В. Г. Бондалетов; Национальный исследовательский Томский политехнический университет. - Томск: Изд-во Томского политехнического университета. - 2010. - С. 96.
41. Сырвачева Д. А. Микробиологический синтез и характеристика полигидроксиалканоатов, содержащих мономеры среднецепочечного 3- гидроксигексаноата : дис. ... канд. биол. наук : 03.02.03 / Сырвачева Дарья Анатольевна. - Красноярск. - 2016. - С.138.
42. Терлецкая В. А. Влияние технологических факторов на процесс экстракции плодов рябины черноплодной / В. А. Терлецкая, Е. В. Рубанка, И. Н. Зинченко // Техника и технология пищевых производств № 4. - 2013. - С. 127-132.


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.



Подобные работы


©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ