Введение 3
Глава 1. Обзор литературы 6
1.1. Особенности строения и функционирования биомембран 6
1.1.1. Общий план организации биомембран 6
1.1.2. Особенности структурной организации мембран клеток крови 15
1.2. Пуринергическая сигнальная система 23
1.3. Характеристика функциональных параметров системы крови при развитии острого лимфобластного лейкоза 27
1.3.1. Итиология и патогенез лейкоза 27
1.3.2. Морфология и функционирование клеток крови при ОЛЛ 30
1.3.3. Пуринергическая сигнальная система при ОЛЛ 33
1.4. Методы определения заряда клеточной поверхности 35
Глава 2. Материал и методы исследования 41
Глава 3. Полученные результаты и их обсуждение 48
3.1. Концентрация АТФ в крови здоровых и больных ОЛЛ людей при активации пуринергической сигнальной системы 48
3.2. Поверхностный потенциал клеток крови в норме и при остром лимфобластном лейкозе 52
3.3. Поверхностный потенциал клеток крови здоровых людей и больных ОЛЛ в условиях механического стресса 54
3.4. Поверхностный потенциал клеток крови здоровых людей и больных ОЛЛ при активации внеклеточных пуринергических сигнальных путей invitro 55
3.5. Сравнительный анализ влияния механического стресса и экзогенной нагрузки с АТФ invitro на форменные элементы крови 57
Выводы 61
Список использованных источников 62
Пуринергическая сигнальная система является одной из самых эволюционно древних рецепторных систем, играющих существенную роль в изменении свойств и функций различных клеток организма [Cekic, Linden, 2016]. Известно, что пуриновые рецепторы локализованы практически во всех органах и тканях, они обнаружены на мембранах кардиомиоцитов, гладких мышечных клеток, форменных элементов крои и других клеток. Краткосрочные пуринэргические сигналы отмечаются при регуляции экзокринной и эндокринной секреции, агрегации-дезагрегации тромбоцитов, вазодилатации, механочувствительной трансдукции. Долгосрочные пуринергические сигналы участвуют в регуляции клеточной пролиферации, дифференциации, миграции и гибели клеток, заживлении ран, старении и раке [Eltzschig, etal., 2013].
Большую актуальность в настоящее время приобретает изучение влия-ния эндогенного АТФ на функциональную активность лейкоцитов, форми-рующих иммунологическую компетентность организма, а так же тромбоцитов, способных принимать участие в реакциях антибактериального иммунитета в условиях злокачественной пролиферации лимфоидного ростка кроветворения.
Объектом исследования выступали клетки крови здоровых людей и больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ).
Предметом исследования являлся потенциал поверхности клеток крови в норме и условиях активации внеклеточных пуринерических сигнальных путей.
Целью данной работы было оценить поверхностный потенциал клеток крови в условиях активации внеклеточных пуринергическх сигнальных путей.
В соответствии с целью были поставлены задачи:
□ оценить изменения концентрации АТФ в крови здоровых людей и больных острым лимфобластным лейкозом в условиях активации пуринергических сигнальных путей;
□ измерить поверхностный потенциал клеток крови в норме и при раз-витии острого лимфобластного лейкоза;
□ измерить поверхностный потенциал клеток крови в норме и при остром лимфобластном лейкозе в условиях активации пуринерических сигнальных путей посредствам моделирования механического стресса in vitro;
□ измерить поверхностный потенциал клеток крови в норме и при остром лимфобластном лейкозе в условиях активации пуринергических сигнальных путей посредствам нагрузочного теста с экзогенной АТФ;
□ провести сравнительный анализ влияния механического стресса и нагрузки с экзогенной АТФ на электрические свойства форменных элементов крови.
Новизна работы заключается в том, что впервые проведено исследование электрических свойств клеток крови при активации пуринергической сигнальной системы. Установлено что реакция клеток на молекулы АТФ про-являлась в повышении заряда плазмалеммы эритроцитов и тромбоцитов и снижении НИ. лейкоцитов. В условиях лимфопролиферативных заболеваний происходит снижение экскреции молекул в АТФ во внеклеточную среду, что препятствует изменению электрических свойств клеток крови.
Магистерская диссертация изложена на 71 страницах. Она состоит из оглавления, введения, трех глав, выводов. Список использованных источников насчитывает 104 наименования. В работе представлена 1 таблица, 22 рисунка....
1. В интактной крови здоровых людей концентрация АТФ выше по сравнению с интактной кровью больных ОЛЛ. При механической нагрузке концентрация АТФ в крови, как здоровых людей, так и больных ОЛЛ повышается.
2. Установлено, что развитие острых лимфоролиферативных процессов сопровождается появлением в переферической крови лимфоцитов и тромбоцитов с повышенным зарядом клеточной поверхности.
3. При активации пуринерических сигнальных путей посредствам моделирования механического стресса in vitro, у здоровых людей установлено повышение поверхностного потенциала эритроцитов и тромбоцитов, и понижение ПП лимфоцитов.
4. В условиях экзогенной нагрузки с АТФ, у здоровых людей, поверхностный потенциал эритроцитов и тромбоцитов увеличивался, а лимфоцитов снижался. У больных ОЛЛ экзогенная нагрузка с АТФ вызывала повышение ПП всех исследуемых клеток крови.
5. В условиях механическго стресса, а так же в условиях инкубации сэкзогенным АТФ ПП лимфоцитов и тромбоцитов людейбольных ОЛЛ был более положительным по сравнению с клетками здоровых людей после ана-логичных нагрузок.
