Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


КАРИОТИП МАЛЯРИЙНЫХ КОМАРОВ ANOPHELES BEKLEMISHEVI STEGNII ЕТ KABANOVA, ANOPHELES ARTEMIEV1 GORDEEV ET AL., ANOPHELES MESSEAE FALL. (DIPTERA CULICIDAE)

Работа №191503

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы36
Год сдачи2020
Стоимость4360 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
4
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


ВВЕДЕНИЕ 3
1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 5
1.1 Молекулярные исследования малярийных комаров
подгруппы Maculipennis 5
1.2 Митоз и метафазные хромосомы 6
1.3 Ядрышковый организатор 7
1.3 Гетерохроматин. Прицентромерный гетерохроматин 8
1.4 Кариотип, кариограмма и идиограмма 9
1.5 Кариотип малярийного комара 10
1.5.1 Кариотипы малярийных комаров комплекса gambiae 10
1.5.1 Кариотипы малярийных комаров подгруппы Maculipennis 15
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 18
2.1 Объекты исследования 18
2.2 Приготовление суховоздушных препаратов хромосом 20
2.3 Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH) 21
2.4 Микроскопирование 22
2.5 Обработка полученных снимков 22
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 23
ВЫВОДЫ 34
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРА

Малярийные комары Anopheles - опасные переносчики возбудителя малярии и малярийного плазмодия. В отдельных регионах, где риск заражения малярией очень высок смертность составляет около полумиллиона человек в год [World Health Organization. World Malaria Report 2018. 2018, World Health Organization: Geneva.]. Изучение хромосом малярийных комаров необходимо для понимания эволюции этих насекомых, для разработки генетических подходов в борьбе с ними, а также их способности переносить малярию. Политенные хромосомы, которые развиваются у большинства видов малярийных комаров не позволяют изучить межвидовые различия в размере гетерохроматических блоков в связи с его недорепликацией. Этого недостатка лишены митотические и мейотические хромосомы. Малярийные комары An. messeae s.l., An. artemievi и An. beklemishevi являются представителями подгруппы Мaculipennis. Митотический кариотип данных видов до сих пор не описаны.
Актуальность исследования заключается в недостаточной изученности кариотипов малярийных комаров подгруппы Мaculipennis An. messeae s.l., An. artemievi и An. beklemishevi, кариотипы митотических хромосом которых могут раскрыть закономерности эволюции этих видов и прояснить таксономический статус криптических видов. До сих пор детального изучения митотических кариотипов этих видов произведено не было, не построены идиограммы хромосомных наборов. Недавно An. daciae был выделен из An. messeae s.s. как самостоятельный вид на основе последовательности ITS2 [1], однако был не принят некоторыми учеными. Изучение различий по размеру гетерохроматина и рДНК между двумя близкими видами An. daciae и An. messeae s.s. способствует прояснению данного вопроса, а также понять роль гетерохроматина в видообразовании.
Цель работы: Описать кариотипы малярийных комаров An. messeae s.l., An. artemievi и An. beklemishevi.
Задачи:
1. Получить препараты митотических хромосом имагинальных дисков An. messeae s.s., An. daciae, An. artemievi и An. beklemishevi.
2. Локализовать кластер рДНК на митотических хромосомах An. messeae s.s., An.
daciae, An. artemievi и An. beklemishevi, а также прицентромерный
гетерохроматин (ПГХ) у An. artemievi.
3. Построить идиограммы кариотипа митотических хромосом An. messeae s.s., An. daciae, An. artemievi и An. beklemishevi.
4. Сравнить относительные размеры хромосом и хромосомных плеч, а также размер и положение гетерохроматиновых блоков и кластера рДНК у An. messeae s.s., An. daciae, An. artemievi и An. beklemishevi.
Работа выполнена на базе Научно-исследовательского института биологии и биофизики Томского государственного университета (НИИББ ТГУ), в лаборатории эволюционной генетики.


Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!


1. Получены препараты митотических хромосом имагинальных дисков An. messeae s.s., An. daciae, An. artemievi и An. beklemishevi. Был проведен FISH с прицентромерным гетерохроматином (ПГХ) и кластером рДНК для An. artemievi, а для An. beklemishevi, An. daciae и An. messeae s.s. только с кластером рДНК.
2. Построены идиограммы кариотипов для всех четырех видов. Х хромосома самая короткая у всех видов. Аутосомы An. artemievi и An. beklemishevi являются метацентриками, а Х-хромосома субметацентриком. Аутосомы An. messeae s.s., An. daciae являются метацентриками, а Х-хромосома субметацентриком.
3. Длинное плечо Х хромосомы An. artemievi содержит крупный блок гетерохроматина, но полностью гетероматизировано у An. beklemishevi, An. daciae и An. messeae s.s.. Прицентромерный район короткого плеча Х хромосомы An. beklemishevi также гетерохроматизирован.
4. Кластер рДНК локализован в гетерохроматине длинного плеча Х хромосомы. Наименьший размер кластера - у An. artemievi и An. beklemishevi. Размер кластера рДНК у An. beklemishevi меньше по сравнению с другими видами. Размеры кластеров рДНК у An. daciae и An. messeae s.s. имеют статистически значимые различия.



1. Nicolescu G. Mosquitoes of the Anopheles maculipennis group (Diptera: Culicidae) in Romania, with the discovery and formal recognition of a new species based on molecular and morphological evidence / Nicolescu G., [et. al.] // Bull Entomol Res. - 2004. - Vol. 94. - № 6. - P. 525-535.
2. Kampen H. The ITS2 ribosomal DNA of Anopheles beklemishevi and further remarks on the phylogenetic relationships within the Anopheles maculipennis group of species (Diptera: Culicidae) // Parasitol Res. - 2005. - Vol. 97. - № 2. - P. 118-128.
3. Danabalan R. Occurrence and host preferences of Anopheles maculipennis group mosquitoes in England and Wales / Danabalan R., [et. al.] // Medical and veterinary entomology - 2013 - Vol. 28.
4. Naumenko A.N. Chromosome and Genome Divergence between the Cryptic Eurasian Malaria Vector-Species Anopheles messeae and Anopheles daciae / A.N. Naumenko [et. al.] // Genes - 2020 - Vol.11. - №2 - P. 165.
5. Высоцкая, Л.В. Митотический цикл и его регуляции // Вавиловский журнал генетики и селекции. - 2014. - №1. - С. 81-92.
6. Genomic architecture and inheritance of human ribosomal RNA gene clusters / D.M. Stults [et. al.] // Genome Res. - 2008 - Vol. 18. - №1. - P. 13 -18
7. Human rRNA gene clusters are recombinational hotspots in cancer / D.M. Stults [et. al.] // Genome Res. - 2009 - Vol. 69. - №23.
8. Heitz E. Die ursache der gesetzmassigen zahl, lage, form und grosse pflanzlicher nukleolen / Zeitschrift fur wissenschaftliche Biologie. Abteilung E. Planta. - 1931. - Vol. 12. - №. 4.
9. McClintock B. The relation of a particular chromosomal element to the development of the nucleoli in Zea mays / B. McClintock Zeitschrift fur Zellforschung und mikroskopische Anatomie. - 1934. - Vol. 21. - №. 2. - С. 294-326.
10. Сравнительный анализ молекулярного состава прицентромерного гетерохроматина политенных хромосом малярийных комаров рода Anopheles (Culicidae, Diptera) / В.Н. Стегний [и др.] // Вестн. Том. гос. унта. Биология. - 2007 - №1.
11. Основы цитогенетики человека / Прокофьева-Бельговская А. А. [и др.] // Медицина - 1969. - С. 544
12. Fraccaro M. Karyotype, DNA replication and origin of sex chromosomes in Anopheles artoparvus / M. Franccaro [et. al.] // Chromosoma 1976. - №55. - P. 27-36.
13. Coluzzi M. Cytotaxanomic observation on species A and B of the Anopheles gambie complex / M. Coluzzi and A. Sabbatini // Parassitologia 1967. - №9. - P. 73-88.
14. Coluzzi M. Cytogenetic observation on species С of the Anopheles gambie complex / M. Coluzzi and A. Sabbatini // Parassitologia 1968. - №10. - P. 156164.
15. Coluzzi M. Cytogenetic observation on the salt water species, Anopheles merus and Anopheles melas, of the gambie complex / M. Coluzzi and A. Sabbatini // Parassitologia 1969. - №11. - P. 177-187.
..23

Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.




©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ