Тип работы:
Предмет:
Язык работы:


ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ И ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ ПОДЗЕМНОЙ БИОСФЕРЫ

Работа №191011

Тип работы

Бакалаврская работа

Предмет

биология

Объем работы37
Год сдачи2019
Стоимость4370 руб.
ПУБЛИКУЕТСЯ ВПЕРВЫЕ
Просмотрено
15
Не подходит работа?

Узнай цену на написание


Условные обозначения 3
ВВЕДЕНИЕ 4
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 6
1.1. Экосистемы в глубоких горизонтах земли 6
1.2. СРБ в глубинной биосфере 7
1.3. Анаэробное дыхание СРБ 9
1.4. Адаптация бактерий к высоким температурам 10
1.5. Адаптация бактерий к экстремальным значениям pH 11
1.6. Филогенетический анализ последовательности гена 16 s РНК 14
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 16
2.1. Объекты исследования 16
2.1.1. Штамм Desulfotomaculum sp. BuA 16
2.1.2. Накопительная культура RBS - 3 16
2.1.3. Бинарная культура BU-25 17
2.2. Приготовление питательных сред 18
2.3. Приготовление добавок 19
2.3.1. Приготовление раствора микроэлементов 19
2.3.2. Приготовление раствора витаминов 20
2.3.3. Приготовление раствора H2SO4 21
2.3.4. Приготовление Na2S 21
2.4. Посев в ламинарном боксе 22
2.5. Выделение микроорганизмов методом предельных разведений 23
2.6. Выделение чистой культуры анаэробных микроорганизмов методом
посева на плотные среды 23
2.7. Выделение ДНК 23
2.8. Полимеразная цепная реакция 24
2.9. Гель электрофорез 26
2.10. Филогенетический анализ 26
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 27
3.1 Определение диапазона показателей pH для роста штамма Desulfotmaculum sp. BuA. 27
3.2. Филогенетический анализ штамма Desulfotomaculum sp. BuA 29
3.3. Выделение чистой культуры вибрионов из проб RBS - 3 методом
предельных разведений 29
3.4. Филогенетический анализ гена 16 s РНК чистой культуры вибрионов
RBS- 3 30
3.5. Выделение чистой культуры и филогенетический анализ подвижных
палочек из проб RBS - 3 31
3.6. Филогенетический анализ гена 16 s РНК чистой культуры вибрионов
RBS - 3 32
3.7. Бинарная культура BU-25 32
ВЫВОДЫ 34
Список использованной литературы

Глубинная биосфера Земли включает в себя экосистемы под поверхностью суши и под ложем океана и характеризуется экстремальными условиями для живых организмов. Прокариоты и археи в континентальных водоносных горизонтах и глубоких переломах, где их биомасса составляет до 19% всей биомассы Земли, могут играть важную роль в глобальных биогеохимических циклах, поскольку в процессе своей жизнедеятельности способны включать в биологический круговорот неорганические соединения, что делает их важными участниками в экосистемных процессах. Однако они остаются малоизученными, об общем размере, расположении, разнообразии глубинной биосферы известно мало (McMahon, 2014; Gold, 1992).
Условия глубинных континентальных экосистем обычно представлены анаэробными условиями, высоким или низким рН, высокой температурой и давлением и высокой соленостью. Микроорганизмы, глубинных экосистем, чья жизнь не зависит от энергии солнца или фотосинтеза, часто имеют уникальные свойства, и они идеально подходят для экологической биоремедиации, развития биотехнологий, используются как модельные объекты для изучения физиологических механизмов, позволяющих выживать в экстремальной среде обитания. (Dong, 2007). Однако практическое применение этих микроорганизмов затруднено из-за сложности культивирования и затруднительного отбора проб.
Среди микрофлоры глубинных систем суши встречается уникальная группа прокариот - сульфатредуцирующие бактерии. В пресноводной среде с низким содержанием сульфатов СРБ играют важную роль в ферментации и анаэробном окислении органических соединений. Благодаря действию сульфатредуцирующих бактерий сульфат в анаэробных условиях включается в биологический круговорот серы. В процессе сульфатредукции образуются малорастворимые сульфиды, это свойство можно использовать для отчистки окружающей среды от загрязнений сульфатами и тяжелыми металлами, полученный сульфидный осадок может быть использован в дальнейшем для излечения металлов. Также СРБ способны продуцировать практически значимые термостабильные и устойчивые к высоким значениям pH ферменты, в настоящее время на основе этих ферментов производят детергенты (Ленгелер и др., 2005). В группу объединяют представителей различных филогенетических линий по физиологической способности восстанавливать сульфат ( Rabus et al., 2015 ).
Таким образом, изучение физиологических особенностей бактерий глубинной биосферы имеет важное фундаментальное и прикладное практическое значение.
Цель научно-исследовательской работы: получение чистых культур микроорганизмов из накопительных культур глубинной биосферы, и изучение физиологических особенностей новых и выделенных раннее штаммов.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1. Определить способность роста штамма BuA при разных значениях pH среды, выявить оптимальные и критические значения pH для роста данного штамма.
2. Определить филогенетическое положение штамма BuA.
3. Выделить чистые культур микроорганизмов из накопительной культуры RBS - 3, определить их филогенетическое положение.
4. Определить круг субстратов используемых

Возникли сложности?

Нужна помощь преподавателя?

Помощь в написании работ!


1. Показан рост штамма Desulfotomaculum sp. BuA в диапазоне значений значениях pH 2.5 - 5.5.
2. Нижний критический показатель pH для штамма Desulfotomaculum sp. BuA составил 2.5, верхний находится выше 5.5.
3. Определено филогенетическое положение штамма
Desulfotomaculum sp. BuA. Ближайший валидно описанный штамм Desulfotmaclum putei BS1 со сходством 99%.
4. Из пробы RBS - 3 получены две морфологически однородные культуры бактерий. Одна из них в ходе филогенетического анализа была отнесена к роду Propionicimonas, другая к роду Rectinema.
5. Для выделенного штамма рода Propionicimonas был определен круг субстратов.



1. Громов Б.Б. Экология бактерий /Б.В. Громов, Г.В. Павленко - Л.:
Издательство Ленинградского Университета, 1989. - 248 с.
2. Курильщиков А. М.. Методы и объекты метагеномных исследований / , Н. В.
Тикунова, М. Р. Кабилов, А. М. Курильщиков А. М., // Вестник
Новосибирского государственного университета. Серия биология клиническая медицина. - 2012. - Т 10, №1 с. 191 - 201.
3. Ленгелер Й. Современная микробиология: Прокариоты: в 2 т. / Й. Ленгелер, Г. Древс, Г. Шлегель; пер. с англ. - М.: Мир, 2005. - Т.2 - 496 с.
4. Шлегель Г. Общая микробиология: пер. с нем. / Г. Шлегель. - М.: Мир, 1987.
- 567с.
5. Altschu W. Basic local alignment search tool / W. Altschu , W. Gish, W. Miller, E. Myers, and D. Lipman// Journal of Molecular Biology - 1990 - Vol. 213 - P 403410.
6. Aullo T. Desulfotomaculum spp. and related gram-positive sulfate-reducing bacteria in deep subsurface environments / T. Aullo [et al.] // Frontiers in Microbiology. - 2013. -Vol. 4. P 1-12.
7. Barton L. Sulphate-reducing bacteria: environmental and engineered systems / L. Barton, W. Hamilton - Cambridge. : Cambridge University Press, 2007. - 533 P.
8. Birkeland N. K. Sulfate-reducing bacteria and archaea // Petroleum Microbiology.
- Washington, 2005 - P. 35-54.
9. Bonch-Osmolovskaya E.A. High-temperature deep-subsurface microbial communities as a possible equivalent of ancient ecosystems / E. A. Bonch- Osmolovskaya // Paleontological Journal. - 2010. - Vol. 44(7). P. 851-859.
10. Bonch-Osmolovskaya E.A. Thermophilic Microbial Communities: New
Physiologic Groups, New Habitats / E.A. BonchOsmolovskaya, M. L. Miroshnichenko, T. G. Sokolova , A. I. Slobodkin // Proceedings of the Institute of Microbiology Vol. 12 Nauka Moscow 2004 - P. 29-40.
11. Davey, M.E. Isolation of three species of Geotoga and Petrotoga: two new genera, representing a new lineage in the bacterial line of descent distantly related to the “Thermotogales”, Syst. Appl. Microbiol.,// Davey, M.E. Wood, W.A., Key, R., Nakamura, K., and Stahl, D. - 1993 - Vol. 16, - P. 191-200.
12. Dipippo J.L. Kosmotoga olearia gen. nov., sp. nov., a thermophilic, anaerobic heterotroph isolated from an oil production fluid / C.L. Nesbo , H. Dahle, W.F. Doolittle, N.K. Birkland, K.M. Noll // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. - 2009. - Vol. 59, - P. 2991-3000.
13. Dong H. Geomicrobiological processes in extreme environments: a review /H. Dong, B. Yu // Episodes. - 2007 - Vol. 30, - P. 202-216.
14. Gold T. The deep, hot biosphere // Proc Natl Acad Sci USA. - 1992. - Vol. 89. - P. 6045-6049.
15. Hallbeck L. Characterization of microbial processes in deep aquifers of the Fennoscandian Shield / L. Hallbeck, K. Pedersen // Appl Geochem. - 2008. - Vol. 23. - P. 1796-1819.
..28


Работу высылаем на протяжении 30 минут после оплаты.



Подобные работы


©2025 Cервис помощи студентам в выполнении работ