Тема: ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ И ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ ПОДЗЕМНОЙ БИОСФЕРЫ
Характеристики работы
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
📋 Содержание
ВВЕДЕНИЕ 4
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 6
1.1. Экосистемы в глубоких горизонтах земли 6
1.2. СРБ в глубинной биосфере 7
1.3. Анаэробное дыхание СРБ 9
1.4. Адаптация бактерий к высоким температурам 10
1.5. Адаптация бактерий к экстремальным значениям pH 11
1.6. Филогенетический анализ последовательности гена 16 s РНК 14
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 16
2.1. Объекты исследования 16
2.1.1. Штамм Desulfotomaculum sp. BuA 16
2.1.2. Накопительная культура RBS - 3 16
2.1.3. Бинарная культура BU-25 17
2.2. Приготовление питательных сред 18
2.3. Приготовление добавок 19
2.3.1. Приготовление раствора микроэлементов 19
2.3.2. Приготовление раствора витаминов 20
2.3.3. Приготовление раствора H2SO4 21
2.3.4. Приготовление Na2S 21
2.4. Посев в ламинарном боксе 22
2.5. Выделение микроорганизмов методом предельных разведений 23
2.6. Выделение чистой культуры анаэробных микроорганизмов методом
посева на плотные среды 23
2.7. Выделение ДНК 23
2.8. Полимеразная цепная реакция 24
2.9. Гель электрофорез 26
2.10. Филогенетический анализ 26
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 27
3.1 Определение диапазона показателей pH для роста штамма Desulfotmaculum sp. BuA. 27
3.2. Филогенетический анализ штамма Desulfotomaculum sp. BuA 29
3.3. Выделение чистой культуры вибрионов из проб RBS - 3 методом
предельных разведений 29
3.4. Филогенетический анализ гена 16 s РНК чистой культуры вибрионов
RBS- 3 30
3.5. Выделение чистой культуры и филогенетический анализ подвижных
палочек из проб RBS - 3 31
3.6. Филогенетический анализ гена 16 s РНК чистой культуры вибрионов
RBS - 3 32
3.7. Бинарная культура BU-25 32
ВЫВОДЫ 34
Список использованной литературы
📖 Введение
Условия глубинных континентальных экосистем обычно представлены анаэробными условиями, высоким или низким рН, высокой температурой и давлением и высокой соленостью. Микроорганизмы, глубинных экосистем, чья жизнь не зависит от энергии солнца или фотосинтеза, часто имеют уникальные свойства, и они идеально подходят для экологической биоремедиации, развития биотехнологий, используются как модельные объекты для изучения физиологических механизмов, позволяющих выживать в экстремальной среде обитания. (Dong, 2007). Однако практическое применение этих микроорганизмов затруднено из-за сложности культивирования и затруднительного отбора проб.
Среди микрофлоры глубинных систем суши встречается уникальная группа прокариот - сульфатредуцирующие бактерии. В пресноводной среде с низким содержанием сульфатов СРБ играют важную роль в ферментации и анаэробном окислении органических соединений. Благодаря действию сульфатредуцирующих бактерий сульфат в анаэробных условиях включается в биологический круговорот серы. В процессе сульфатредукции образуются малорастворимые сульфиды, это свойство можно использовать для отчистки окружающей среды от загрязнений сульфатами и тяжелыми металлами, полученный сульфидный осадок может быть использован в дальнейшем для излечения металлов. Также СРБ способны продуцировать практически значимые термостабильные и устойчивые к высоким значениям pH ферменты, в настоящее время на основе этих ферментов производят детергенты (Ленгелер и др., 2005). В группу объединяют представителей различных филогенетических линий по физиологической способности восстанавливать сульфат ( Rabus et al., 2015 ).
Таким образом, изучение физиологических особенностей бактерий глубинной биосферы имеет важное фундаментальное и прикладное практическое значение.
Цель научно-исследовательской работы: получение чистых культур микроорганизмов из накопительных культур глубинной биосферы, и изучение физиологических особенностей новых и выделенных раннее штаммов.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1. Определить способность роста штамма BuA при разных значениях pH среды, выявить оптимальные и критические значения pH для роста данного штамма.
2. Определить филогенетическое положение штамма BuA.
3. Выделить чистые культур микроорганизмов из накопительной культуры RBS - 3, определить их филогенетическое положение.
4. Определить круг субстратов используемых
✅ Заключение
2. Нижний критический показатель pH для штамма Desulfotomaculum sp. BuA составил 2.5, верхний находится выше 5.5.
3. Определено филогенетическое положение штамма
Desulfotomaculum sp. BuA. Ближайший валидно описанный штамм Desulfotmaclum putei BS1 со сходством 99%.
4. Из пробы RBS - 3 получены две морфологически однородные культуры бактерий. Одна из них в ходе филогенетического анализа была отнесена к роду Propionicimonas, другая к роду Rectinema.
5. Для выделенного штамма рода Propionicimonas был определен круг субстратов.





