Введение
Глава 1. Теоретические основы формирования микробно-ферментного комплекса 5
1.1. Микробиологическая биодеструкция древесно-опилочных материалов 5
1.2. Утилизация древесных отходов при участии почвенной биоты 17
1.3. Технология создания биокомпостов на основе отходов лесоперерабатывающего комплекса 20
Глава 2. Объекты и методы исследования 28
2.1. Объекты, описание почв, стационар 28
2.2. Использованные методы приготовления опилочно-почвенных субстратов 30
2.3. Технология посадки саженцев на опилочно-почвенных субстратах 32
2.4. Определение лесорастительной способности почвы с использованием показателей микробно-ферментной активности 33
2.5. Экологические условия в почвах под саженцами сосны 35
Глава 3. Микробно-ферментная активность почвы 39
3.1. Влияние опилочно-почвенных субстратов на трансформацию пищевой
активности почвенной биоты 39
3.2. Микробиологическая активность почвы 40
3.3. Ферментативная активность почвы 42
3.3.1. По фазам вегетации 42
3.3.2. По годам 48
3.4. Трансформация азотистых веществ в верхнем слое почвы 52
3.4.1. По фазам вегетации 52
3.4.2. По годам 55
Глава 4. Воздействие опилочно-почвенных субстратов на содержание азотистых веществ в хвое сосны 57
4.1. Анализ содержания белкового азота в хвое сосны 57
Выводы 59
Список использованной литературы 61
Актуальность темы исследования. Запасы трудногидролизуемого растительного сырья в Российской Федерации очень велики, только масса древесной зелени составляет более 3-х млрд. тонн, из которых только 30,4 млн. тонн являются доступными в экономическом плане, также в Красноярском крае - до 1,5-2 млн. тонн [12].
Опилки, кора, щепа и другие отходы лесоперерабатывающей промышленности представляют собой пожарную опасность, как на участках предприятий лесного комплекса, так и на месте рубок. А также антропогенное воздействие вызвало недостаток большинства элементов питания и спровоцировало ухудшение лесорастительных свойств почвы.
Для того чтобы повысить производительный потенциал почвы практикуется внесение древесных отходов: опилок, щепы, коры. Однако их включение в экосистему провоцирует азотное голодание растений, хотя при этом наличие в массе опилок целлюлозно-лигнинного комплекса способствует обогащению почвы гумусом и ее оструктуриванию. Чаще всего при выращивании сельскохозяйственных культур в опилки добавляют довольно высокие дозы минеральных удобрений и проводят длительное компостирование опилочной массы. Но при искусственном лесовыращивании совсем нет необходимости применения дорогостоящих минеральных удобрений. В последнее время все более часто используется способность почвенной микробиоты в улучшении качества состояния окружающей среды. При этом функциональная активность микроорганизмов и почвенных беспозвоночных применяется для активной деструкции органических соединений в виде щепы, опилок и других компонентов лигно-целлюлозного комплекса.
Для ферментативно-микробиологической переработки свежей опилочной массы достаточно применения «затравки», состоящей из микродоз удобрений,
Цель работы заключалась в разработке и применении опилочно¬почвенных композиций с добавлением микродоз удобрений для содействия естественному возобновлению сосны.
Задачи:
1) Создать удобрительные композиции на основе опилок и плодородного слоя почвы.
2) Изучить динамику биохимической и микробиологической активности почвы под насаждениями сосны.
3) Выявить наиболее подходящие удобрительные композиции в плане активизации микробного комплекса почвы для разложения древесно-опилочной массы.
1. Созданы удобрительные композиции на основе опилок и плодородного слоя почвы, а также изучена динамика биохимической и микробиологической активности почвы под насаждениями сосны.
2. Как через год, так и через два после применения удобрительных композиций наибольшая активность уреазы наблюдалась в варианте с кальциевой селитрой и сульфатом калия. Через год наиболее высокие значения активности фосфатазы отмечены в варианте с аммофосом и сульфатом аммония, а на второй год в варианте с сульфатом калия. Через два года активность инвертазы стала выше в варианте с добавлением сульфата аммония и мочевины. Результаты исследований активности оксидаз в первый год показали самый высокий коэффициент гумификации в варианте «опилки+почва», а также как и на второй год в варианте с мочевиной.
3. В первый год проведение микробиологического анализа показало, что в почвенной микробиоте под культурами сосны содержится бактериальный комплекс численностью порядка 0,1- 1,4 млн. КОЕ/г почвы, а на второй год 0,25 - 3,76 млн. КОЕ/г почвы. Максимальная численность микроорганизмов зафиксирована в контрольном варианте и в варианте с мочевиной. Наиболее богатый микробный пул из всех трех групп микроорганизмов на второй год наблюдается в варианте с добавлением микродоз сульфата калия.
4. На второй год отмечается высокая минерализация гидролизуемых форм азота (до 19%) на участке с опилочно-почвенным субстратом с внесением микродоз кальциевой селитры. В варианте с аммонийной селитрой наблюдается иммобилизация азота, что свидетельствует об усвоении элемента почвенными микроорганизмами под культурами сосны.
5. По результатам тканевого анализа максимальным содержанием белкового азота в хвое сосны характеризуются варианты с мочевиной и сульфатом аммония. В контрольном варианте самое низкое содержание азота в
6. На основе показателей биохимической и микробиологической активности нами выявлено воздействие использования микродоз удобрений. Наиболее подходящими удобрительными композициями в плане активизации микробно-ферментного комплекса почвы для разложения древесно-опилочной массы и роста надземных органов (хвои) саженцев сосны являются: мочевина, сульфат калия, кальциевая селитра, сульфат аммония.
1. Абашеева , Н.Е. Агрохимия почв Забайкалья / Н.Е. Абашеева. - Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 1999 - 148 с.
2. Абашеева, Н. Е. Экологические проблемы агрохимии / Н.Е. Абашеева // Почвенные ресурсы Забайкалья-Новосибирск: Наука. Сиб. отд-е РАН. - 1989. - С. 122-136.
3. Абашеева Н. Е. Плодородие почв Прибайкалья / Н. Е. Абашеева, В. И. Дугаров, Г. Д. Чимитдоржиева. - Новосибирск : Наука, 1983. - 157 с
4. Абашеева, Н.Е. Динамика подвижных форм питательных элементов в каштановой почве Иволгинской котловины / Н.Е. Абашеева, Р.Н. Ракшаина // БГСХИ. Труды. Вып. 18. Агрономия. Улан-Удэ., 1965.-с. 64-76.
5. Авраменко И. Ф. Микробиология / И.Ф. Авраменко // М.: Колос. - 1979. - Т. 176.
6. Агабекян, Э. Л. Ультраструктурные перестройки поверхности гриба Aspergillus terreus 17р при росте на целлюлозосодержащих субстратах/ Агабекян Э. Л., Дмитриев В. В., Ратнер Е. Н. // Микробиология. - 1982. - Т. 51. - С. 472-475.
7. Бахтин, Н.П. Агроклиматический справочник по Красноярскому краю и Тувинской Автономной области / Н.П. Бахтин и др. //Л., Гидрометеоиздат. - 1961.
8. Александрова, Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации / Л.Н. Александрова. - Ленинград : Наука, 1980. - 287 с.
9. Аникеев, В. В. Содержание и хранение коллекционных культур микроорганизмов / В.В. Аникеев, К.А. Лукомская // Руководство по практическим занятиям по микробиологии. - 1977. - С. 57-64.
10. Антонов, Г. И. Влияние несплошных рубок на биологическую активность почв в сосняках Красноярской лесостепи (на примере Погорельского бора): дис.
11. Антонов, Г. И. Влияние несплошных рубок на почвенный
12. Антонов, Г.И. Оптимизация почвенного азотного фонда с использованием биоконверсии опилочной массы при искусственном лесовыращивании / Г.И. Антонов, О.Э. Кондакова, О.А. Чмуж, А.А. Поплаухин // Сборник статей по материалам V международной научно-практической конференции: «Актуальные проблемы науки XXI века», 1 часть, Москва, Международная исследовательская организация "Cognitio", 2015. - С. 11-15
13. Аринушкина, Е.В. Руководство по химическому анализу почв/Е. В Аринушкина. - М.: Изд. МГУ - 1970.
14. Аринушкина, Е. В. Руководство по химическому анализу почв/Е. В Аринушкина. - Изд-во Московского университета, 1961. - 489с.
15. Аристовская, Т.В. Микробиология процессов почвообразования / Т. В Аристовская. - Л.: Наука. - 1980. - 187с.
16. Билай, Т. И. Метод определения трансформирующей активности целлюлаз / Т. И. Билай, Е.Г. Мусич // Микробиологический журнал. - 1982. - №4 с. 75-76.
17. Биоэнергетика в России и мире - цифры, факты, тенденции
[Электронный ресурс]. - Режим доступа:
http://www.rgo.ru/2011/05/bioenergetika-v-rossii-i-mire-%E2%80%93-cifry-fakty- tendencii (дата обращения: 02.02.17).
18. Биоэнергетика, 2.- март-май 2006 г., Санкт-Петербург, Изд - во «Белл», 63 с.
19. Бугаева, К.С. Эколого-фитоценотический анализ сосняков «Погорельского бора» / К.С. Бугаева // Экология Южной Сибири и сопредельных территорий: Материалы IX Международной школы- конференции студентов и молодых ученых. - Абакан, 2005. - С. 22.
20. Бугаева, К.С. Сосновые боры на северной границе Красноярской лесостепи: динамика фитоценотической структуры за последние 40 лет / К. С.
21. Бызов, Б. А. Гидролитики как функциональная группа микроорганизмов - деструкторов органического вещества в почве / Б.А. Бызов, // Микробиологическая деструкция органического вещества в биогеоценозе: Тез.докл.Всесоюзн.совещ. - М. - 1987, -С. 19-21.
22. Васильева, А.А. Ферментативная активность и плодородие почв / А.А. Васильева. - Харьков, 1980.
23. Виноградский, С. Н. Микробиология почвы. Проблемы и методы. 50 лет исследований / С.Н. Виноградский // М.: Изд. АН СССР. - 1952.
24. Галстян, А.Н. Ферментативная активность почв /А.Н. Галстян. - Ереван: Айстан, 1974. - 245с.
25. Гантимурова, Н. И. Денитрификация в почвах Западной Сибири/Н.И. Гантимурова. - Новосибирск: Наука, 1984. - 116с.
26. Глазовская, М. А. Геохимические функции микроорганизмов / М.А. Глазовская, Н.Г. Добровольская. - Изд-во МГУ, 1984.
27. Головлева, Л. А. Разложение лигнина грибными культурами / Л.А. Головлева, Х.Г. Ганбаров , Г.К. Скрябин // Микробиология. - 1982. - Т. 51. - №. 4. - С. 543-547.
28. Головлев, Е.Л. Отбор грибных культур для твердофазной ферментации древесных опилок и соломы / Е.Л. Головлев, Д.Н. Черменский, О.Н. Окунев и др. // Микробиология. 1983, т. 52 С. 79-82.
29. Головлева, Л. А. Твердофазная ферментация растительных субстратов / Л.А. Головлева, Е.Л. Головлев // Мицелиальные грибы:(Физиология, биохимия, биотехнология): Тез. докл. Всесоюз. конф. Пущино. - 1983. - С. 157-159.
30. Дульгеров , А.Н. Микробиологическая активность и деструкция органических веществ интенсивно возделываемых почв / А.Н. Дульгеров // Микробиологическая деструкция органических остатков в биогеоценозе. Сб.тезисов. -М: 1987. -с. 35-37.
31. Ежов Г. И. Руководство к практическим занятиям по сельскохозяйственной микробиологии: Учебное пособие / Г.И. Ежов. - Высшая школа, 1981.
32. Запрометова, К. М. Пигменты темноокрашенных грибов и их экологическая роль / К.М. Запрометова, Т.Г. Мирчинк // Микробные метаболиты (физиологически-активные вещества микробного происхождения в природе и народном хозяйстве) - М.: Изд-во МГУ. - 1979.
33. Захаров В.Н. Повышение плодородия почв в Нечерноземной зоне / В.Н. Захаров. - М: Россельхозиздат, 1978 С-120.
34. Звягинцев, Д. Г. Почва и микроорганизмы/Д.Г. Звягинцев. М.: МГУ. - 1987. -256с.
35. Зелтин, Р.П. Биосинтез целлюлолитических ферментов термотолерантным Asperqillus terreus и изучение их свойств / Р.П. Зелтин // Дисс. канд биол. наук. Рига, ин-т микробиологии и вирусологии АН. Латв СССР. 1971, 228 с.
36. Зенова, Г.Н. Актиномицетные сообщества в биогеоценозах / Г.Н. Зенова // Кн. Почвенные организмы как компоненты биогеоценоза. - М: Наука, 1984. - С. 162-171.
37. Имшенецкий, А. А. Микробиология целлюлозы / А.А.
Имшенецкий, А.И. Опарин. - 1953.
38. Исмаилова Д.Ю. Физиологические особенности термотолерантного Asperqillus terreus 17 р - продуцента целлюлолитических ферментов и ксиналазы / Д.Ю. Исмаилова // Дисс.канд биолог наук. М. Ин-т микробиологии АН СССР. 1976, 199с.
39. Карпец И. Л. Вермикультура-источник нового эффективного удобрения / И.Л. Карпец, И.А. Мельник // Достижения науки и техники АПК. - 1990. - №. 10. - С. 17-19.
40. Кауричев Н.С. Разложение растительных остатков и образование гумусных веществ / Н.С. Кауричев // Известие ТСХА, 1972. - №4. -С.97-107.
41. Клевенская, И.Л. Микрофлора почв Западной Сибири / И.Л.
42. Клесов, А.А. Ферментативный гидролиз целлюлозы: Активность и компонентный состав целлюлозных комплексов из различных источников / А.А. Клесов, М.Л. Рабинович // Биоорганическая химия, 1980. т 6 с 1377-1395.
43. Корсунов, В. М. Почвенный покров бассейна оз. Байкал / В.М. Корсунов, Ц. Х Цыбжитов Ц // Почвенные ресурсы Забайкалья.-Новосибирск: Наука. - 1989. - С. 4-12.
44. Костенко, Т. С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии / Т. С. Костенко, В. Б. Родионова, Д. И. Скородумов. - М.: Колос, 2001.
45. Намжилов, Н.Б. Дефляция и методы оптимизации противоэрозионной устойчивости каштановых почв Бурятии / Н.Б. Намжилов — Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 2002. - 53с.
46. Намзалов, Ч.Б. Редкие растения Бурятии / Ч.Б. Намзалов // Бур кн изд., Улан -Удэ. 1998.- 76с.
47. Наплекова, Н. Н. Аэробное разложение целлюлозы микроорганизмами в почвах Западной Сибири / Н.Н. Наплекова. - " Наука" Сибирское отд-ние, 1974.
48. Нимаева, С. Ш. Микробиология криоаридных почв (на примере Забайкалья) / С.Ш. Нимаева. - Наука, 1992.
49. Ногина, Н. А. Почвы Забайкалья / Н.А. Ногина. - Наука, 1964.
50. Паринкина, О.М. Микрофлора тундровых почв: Экологогеографические особенности и продуктивность / О.М. Паринкина // Л: Наука, Ленингр отделение, 1994.-159с.
51. Прокушкин С. Г., Гирс Г. И. Минеральное питание сосны: на холодных почвах / С. Г. Прокушкин, Г.И. Гирс. - Наука, 1982.
52. Стебаев, И.В. Напочвенные фитофаги как участники биологической деструкции / И.В Стебаев, Л.Б. Пшеницына, О.Н Шиляева // кн. Разложение растительных остатков в почве. - М: Наука, 1985. -С 3-12.
53. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов. Полисахариды / Б.Н. Степаненко. - М.: Высшая школа, 1978.- 345 с.
54. Стриганова, Б.Р. Взаимодействие почвообитающих беспозвоночных и микроорганизмов в процессах деструкции / Б.Р. Стриганова // Микробиологическая деструкция органических остатков в биогенезе: Рез докл Всесоюзн совещ. - М., 1987. -с 84-87.
55. Стриганова, Б. Р. Современные аспекты изучения процессов разложения растительных остатков в почве / Б.Р Стриганова, Л.С. Козловская //Разложение растительных остатков в почве.-М.: Наука. - 1985. - С. 5-12.
56. Фогарти В. М. Микробные ферменты и биотехнология / В. М. Фогарти - Агропромиздат, 1986.
57. Хазиев Ф. Х. Методы почвенной энзимологии / Ф.Х. Хазиев, Н.А. Киреева, А.И. Мелентьев // Москва : Наука, 2005.
58. Химическая энциклопедия - М; Советская энциклопедия. - Т2., 1990.- С 38.
59. Цион, Р. А. Определитель микробов / Р.А. Цион // Огиз- сельхозгиз. -1948. - 487 с. - 1948.
60. Цыбжитов, Ц. Х. Почвы бассейна озера Байкал / Ц.Х Цыбжитов, А.Ц. Цыбжитов // Байкал.- Улан-Удэ: БНЦ СО РАН. - 2000.
61. Частухин, В. Я. Исследования по разложению органических остатков под влиянием грибов и бактерий в дубравах, степях и полезащитных полосах / В.Я Частухин, М.А. Николаевская // Труды Бот. ин-та АН СССР, серия. - 1953. - Т. 2.
62. Чимитдоржиева, Г.Д. Гумус холодных почв / Г.Д. Чимитдоржиева. - Новосибирск: Наука. - 1992, - с. 14-20.
63. Чимитдоржиева, Г. Д. Гумусное состояние почв Бурятской АССР / Г.Д. Чимитдоржиева, Н.Е. Абашеева //Агрохимия. - 1986. - №. 4. - С. 56-61.
64. Эмифсен, Е. Полиморфные модификации целлюлозы/ Е. Эмифсен, Б. Теннесен // Успехи химии. - 1987. т 36 - с. 312-323.
65. Banischova - Franklova. Lignin chemistry - past, present and future /
66. Buchhols K. The concetration of extracellular superoxide radical as function of time during degradation by fungus Coriolus versicolor / K. Buchhols, J. Puis, B. Godelmann, H. Dietrichs // Develop. Ind. Microbiol., 1981, vol. 22, p. 479¬484.
67. Bunday H.R. Lignin degradation and utilization by microorganisms H.R. Bunday // In: Progress in industrial microbiology. Amsterdam: Elserver, 1981, vol. 14, p. 1-58.
68. Detroy R.W. Mechanism for the production of ethylene from methional: The generation of the hydroxy 1 radical by xantin oxidase / R.W. Detroy, G.S. Julian // J Biol. Chem., 1981, vol. 245, p. 41-46.
69. Kosaric N. Biodegradation of cellulosic materials: substrates, microorganisms, enzymes and products / N. Kosaric, A. Wieczorek, G.P. Cosentino // Enzyme Microbiol. Technol. 1979, p. 90-109.
70. Lechevakier Т.К. Economic evaluation of enzymatic utilization of waste cellulosic materials / T.K Lechevakier // Adv. Biochem. Eng. 1981, p. 55-76.
71. Linko M. Studies on the mechanism of enzymatic hydrolysis of cellulose substances / M. Linko // Biotechnol. and bioeng. 1977, p. 290-292
72. Markkanen P. M. alkil-phenil cleavage of the of lignin model compound guaicylglicol / P. Markkanen, M. Baley, T. Enari // Arch. Microbiol., 1980, p. 190¬195.
73. Moon G.D. Riboflavin-photosentized oxidative degradation of lignin model compounds / G.D. Moon, R. Katzen // Photochem. and Photobiol., 1984, p.1-7.
74. Odeir E. Cellulases: biosynthesis and applications / E. Odeir, B. Monties // Enzyme and Microb. Technol., 1983, p. 91-101.
75. Ooshima H. Cellulose and their application / H. Ooshima, K. Aso, O.Y. Harau, T.Yamamoto // Wash.: Amer. Chem. Soc, 1984. p. 315.
76. Petipher J.G. Process development studies on the Bioconversion of cellulose and production of ethanol / J.G. Petipher, M.J. Latham. - 1979 p. 38.
77. Pochon J. Manual technigue d analise microbiologigue du sol Masson
Co Paris 1954.
78. Potthoff M. Analysis of litter decomposition and mesofauna activity in different California grasslands using a classical litterbag approach and a bait lamina system / M. Potthoff et al. // Berichte der DBG. - 2008.
79. Shahal D.S. Overland R.P. Sulfatreducing bacteria in marine sediments / D.S. Shahal //J. Marine, 1982.
80. Sternberg D. Chemistry and methods of enzymes / D. Sternberg, P. Vijayakumar, E.T. Reese // 3 rd.Ed. Acad. Press, N.Y., 1977.
81. Tassinari Т.Н., Масі C.F., Spano L.A. Heat-resistant enzyme from bacterial spores / T.H Tassinari, C.F. Масі, L.A. Spano // Federat. Proc, 1982.
82. Tsao C.T. Crystalline enzymes / C. T. Tsao // N.Y. Columbia Univ. Press, 1978.
83. Waksman. Nitrite production by a thermophilic bacterium / Waksman. - Austral.,1961.