ВВЕДЕНИЕ 5
Глава 1. Обзор литературы
1.1 Нормальное строение кожи 7
1.2 Виды повреждений кожи 9
1.2.1 Тканевая инженерия дермы 10
1.2.2 Клеточные элементы для тканевой инженерии кожи 11
1.3 Использование фибробластов в тканевой инженерии 14
1.4 Материалы, используемые для получения волоконных структур для
тканевой инженерии кожи 15
1.5 Опыт использования и преимущества биоразрушаемых полимеров на
основе карбоновых кислот в ТИ 17
1.6 Методы тестирования изделий медицинского значения и изделий,
предназначенных для тканевой инженерии 19
1.7 Типы клеток, которые используют для восстановления
кожи 20
Глава 2. Объекты и методы исследования
2.1 Объекты исследования 23
2.2 Методы исследования 24
2.2.1Анализ суммарной пористости трёхмерных блоков
25
2.2.2Способ определения белка в среде
25
2.2.3. Культивирование эмбриональных фибробластов мыши линии NIH
3T3 26
2.2.4 Культивирование ММСК жировой ткани крыс
27
2.2.5МТТ-тест,(3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия
бромид) 27
2.2.6 Визуализация клеток. Окрашивание клеток DAPI, световая
микроскопия 29
2.2.7 Способы получения 2-мерных матриксов для тканевой инженерии
дермы 30
2.2.8 Способы получения 3-мерных матриксов для тканевой инженерии
дермы 31
3 . Результаты и обсуждения 32
3.1 Суммарная пористость полученных матриксов 34
3.2 Содержание белка в
блоках 35
3.3 Активность клеток линии NIH 3T3 и МСК жировой ткани с композитом (90 % содержания сополимера , 10 % коллагена П3ГБ +
3ГВ) 35
3.3.1 Активность клеток линии NIH 3T3 с композитом ( 90/10 , 70/30 ) и пористыми композитами : коллагеновой губкой и пресованной сахарозой 38
3.3.2 Активность клеток линии NIH 3T3 и МСК жировой ткани и пористыми композитами: коллагеновой губкой и пресованной сахарозой 39
3.3.3 Активность клеток МСК жировой ткани с пористым композитом (70%
сополимер,30%коллаген) 40
3.4 DAPI 41
Выводы 44
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ
ИСТОЧНИКОВ 45
Тканевая инженерия Т.И., - раздел науки, который занимается разработкой элементов организма для замены повреждённой /отсутствующей ткани или органа. На месте дефекта должна быть восстановлена трехмерная структура ткани, с сохранением её физиологической функции. Для успешной замены необходимо обеспечить клеточным элементам условия для прикрепления, для чего разрабатывают различные субстраты, или матриксы (в англоязычной литературе «soaffold»). В 1993 году Роберт Лангер и Джозеф Ваканти обобщили и представили понятие тканевой инженерии, как «междисциплинарную область, в которой применяются принципы инженерии и наук о живом для разработки биологических эквивалентов, поддерживающих и улучшающих функции тканей». В роли скэфолда могут выступать материалы различных групп, среди которых - металлы, биокерамики, биополимеры синтетического и природного происхождений. Все материалы, используемые в клеточной инженерии, должны обладать следующим рядом свойств:
1. Выполнять объёмную и опорную функции ткани
2. Иметь хорошие показатели биосовместиости и биоинтеграции
3. Обеспечивать нормальный рост диффиренцированных клеток
4. Обладать свойствами биодеградируемости, не вызывая у реципиента иммунных и воспалительных реакций, и не иметь токсичности.
1) Получены четыре вида 3D пористых композитных блоков на основе ПГА с различными включениями коллагена.
2) Пористость блоков составила:
3) Включение белка составило:
3) Все полученные матриксы не оказывали цитотоксического эффекта.
