Тема: МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТОЧЕК РАЗРЫВОВ ИНВЕРСИИ 2R1 У МАЛЯРИЙНОГО КОМАРА ANOPHELES MESSEAE
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
📋 Содержание
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, СОКРАЩЕНИЙ, ТЕРМИНОВ 3
ВВЕДЕНИЕ 4
1 Обзор литературы 6
1.1 Хромосомные перестройки в природных популяциях животных и растений 6
1.2. Хромосомные инверсии 7
1.3. Политенные хромосомы 11
1.4. Малярийные комары комплекса Maculipennis 15
1.5 Полиморфные инверсии малярийных комаров An. messeae и An. daciae 18
1.6 Инверсии - причина эволюции супергенов 22
2 Материалы и методы 30
2.1 Определение плодовитости самок малярийных комаров 30
2.2 Определение вида малярийных комаров по рисунку хориона яиц 30
2.3 Приготовление лактоацеторсииновых препаратов политенных хромосом
из слюнных желез личинок малярийных комаров 31
2.4 Приготовление суховоздушных препаратов политенных хромосом 31
2.5 Выделение ДНК 32
2.6 Полимеразная цепная реакция 32
2.7 Рестрикция ДНК 33
2.8 Электрофорез в агарозном геле 34
2.9 Разработка праймеров, фланкирующих точку разрыва полиморфной
инверсии 2R1 An. messeae 34
2.10 Флуоресцентная гибридизация in situ 34
3 Результаты и обсуждение 37
ВЫВОДЫ 49
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ И ЛИТЕРАТУРЫ 50
📖 Введение
Малярия - одно из самых распространенных и опасных заболеваний [Бронштейн и др., 2002]. В последнем Всемирном докладе ВОЗ о малярии сообщается, что в 2020 г. в мире было зарегистрировано около 241 миллиона случаев заболевания малярией и 627 000 смертей от малярии, что превосходит показатели за 2019 г. на 14 миллионов случаев заболевания и на 69000 случаев смерти. Переносчиками возбудителей этого заболевания - паразитических простейших рода Plasmodium - являются комары рода Anopheles. Малярийные комары обладают быстрой выработкой устойчивости к инсектицидам, что является большой проблемой для человека, как для основного объекта досягаемости малярийных комаров [Ayala et al., 2017]. Быстрая адаптация комаров к внешним воздействиям во многом обеспечивается высокой плодовитостью комаров [Стегний, 1991].
Цель исследования: Провести молекулярно-генетический анализ точек разрывов инверсии 2R1 у малярийного комара Anopheles messeae.
Задачи исследования
1. Определить частоты инверсионных генотипов Anopheles messeae по инверсии 2R1 в природных популяциях и определить плодовитость самок с разными инверсионными генотипами.
2. Провести верификацию геномных данных о локализации точек разрыва инверсии 2R1 Anopheles messeae в ортологах генов AATE009822 и AATE010343 Anopheles atroparvus с помощью FISH.
3. Оценить внутрипопуляционную и межвидовую изменчивость длины экзона 9 ортолога гена AATE009822, связанную со встройкой мобильных элементов, у особей Anopheles messeae и Anopheles daciae с разным генотипом по инверсии 2R1.
4. Разработать тест-систему для определения инверсионного генотипа Anopheles messeae по инверсии 2R1 с помощью ПЦР.
Выпускная бакалаврская работа выполнена в лаборатории экологии, генетики и охраны окружающей среды НИИ биологии и биофизики ТГУ Автор выражает благодарность Кириленко Кириллу Михайловичу и Артемову Глебу Николаевичу за предоставленные материалы и курирование выпускной работы.
✅ Заключение
2. Флюоресцентная in situ гибридизация ДНК-проб, фланкирующих точки разрыва инверсии 2R1 у Anopheles messeae подтвердила геномные данные об их вероятной локализации в ортологах генов AATE009822 и AATE010343 Anopheles atroparvus.
3. Обнаружен полиморфизм по встройке мобильных элементов в экзон 9 ортолога гена AATE009822 у Anopheles messeae, не связанный с инверсией 2R1. У Anopheles daciae встройки мобильных элементов в экзон 9 не выявлена.
4. Разработка тест-системы для диагностики инверсии 2R1 с помощью ПЦР требует доработки, поскольку наблюдаемые ложноположительные результаты ПЦР могут быть связаны с дупликацией ортолога гена AATE009822 у особей с генотипом, содержащим инверсию 2R1.





