АННОТАЦИЯ 3
Список сокращений 3
Введение 4
1 Обзор литературы 6
1.1 Таргетная терапия в онкологии 6
1.1.1 Предпосылки и история возникновения 6
1.1.2 Таргетная противоопухолевая терапия 8
1.1.3 Основные мишени таргетной терапии 10
1.2 JNK сигнальные пути 12
1.2.1 с-Jun N-терминальные киназы 12
1.2.2 JNK и опухоли 13
1.2.3 Ингибиторы JNK сигнальных путей 14
2 Материалы и методы 16
2.1 Материалы 16
2.1.1 Клеточные линии 16
2.1.2 Исследуемые соединения 16
2.2 Методы 18
2.2.1 Методика оценки клеточной пролиферации 18
2.2.2 Методика оценки апоптотической гибели клеток 19
2.2.3 Статистическая обработка полученных данных 20
3 Результаты и обсуждение 21
3.1 Оценка цитотоксического воздействия имплантов на МСК 21
3.2 Оценка адгезивных свойств поверхности имплантов 29
3.3 Сравнение эффективности триптантрина и его соединений, полученных при
помощи разных путей синтеза 32
Выводы 35
Список использованной литературы 36
Приложение А 40
Приложение Б 43
Приложение В 49
Одна из наиболее приоритетных задач современных биомедицинских наук - разработка и внедрение новых методов диагностики и лечения злокачественных новообразований. В действительности, согласно последнему докладу Международного агентства по изучению рака (МАИР, учреждение Всемирной организации здравоохранения - ВОЗ), в 2022 году было зарегистрировано более 20 миллионов случаев новодиагностированных онкологических заболеваний. Согласно статистике, каждый пятый человек в течение своей жизни сталкивается со злокачественными новообразованиями, и данная проблема не теряет своей актуальности с течением времени [International Agency for Research on Cancer, 2022].
В данный момент существует несколько основных клинических подходов к противоопухолевой терапии, однако одним из наиболее перспективных считается именно таргетная терапия - метод лечения онкологических заболеваний, при котором воздействие происходит избирательно на специфические маркеры опухолевых клеток. В качестве таких маркеров, или «мишеней», теоретически могут выступать любые биологические факторы, способствующие активной пролиферации и жизнедеятельности клеток раковых опухолей: рецепторы, ферменты, сигнальные молекулы и др. В связи с этим актуальной задачей современной онкологии является расширение пула потенциальных молекулярных целей для таргетной терапии.
Активация процессов фосфорилирования белков представляет собой универсальный механизм, характерный для клеток раковых опухолей, поэтому киназы - ферменты, катализирующие перенос фосфатных групп, - являются известной мишенью для таргетной терапии [Имянитов, 2010]. Широко применяются ингибиторы киназ семейств HER, SRC, BCR, KIT и других, и этот список постоянно пополняется. Так, существуют экспериментальные данные, указывающие на важную роль c-Jun N- терминальных киназ (JNK-киназ) и их сигнальных путей в жизнедеятельности и пролиферации клеток раковых опухолей [Antonyak et al., 2002; Heasley, 2006; Das et al., 2011; Tam and Law, 2021 и другие], что делает потенциально возможным использование ингибиторов JNK сигнальных путей в качестве таргетных противоопухолевых препаратов. Целью данного исследования является оценка сравнительной эффективности ингибиторов JNK сигнальных путей на основе триптантрина.
Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:
1. Произвести оценку влияния исследуемых соединений триптантрина на пролиферативную активность клеток аденокарциномы протоков молочной железы человека MCF-7.
2. Оценить влияние исследуемых соединений триптантрина на апоптотическую гибель клеток аденокарциномы протоков молочной железы человека MCF-7.
3. Произвести сравнение эффективности триптантрина и его соединений, полученных при помощи разных путей синтеза.
Работа выполнена на базе лаборатории молекулярной онкологии и иммунологии Научно-исследовательского института онкологии, филиала Федерального
государственного бюджетного учреждения «Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук» / НИИ онкологии ТНИМЦ под руководством кандидата биологических наук, старшего научного сотрудника Михаила Александровича Булдакова. Образцы соединений триптантрина для исследования предоставлены Томским политехническим университетом.
Проведенное исследование образцов ингибиторов JNK сигнальных путей на основе триптантрина и его соединений позволило сделать следующие выводы:
1. Все исследуемые образцы в концентрации растворов 20 мкМ/мл и выше оказывают ингибирующее воздействие на пролиферативную активность опухолевых клеток MCF-7, при этом эффективность воздействия растет с увеличением концентрации и достигает максимума при 80 мкМ/мл.
2. Все исследуемые образцы в той или иной степени обладают апоптогенными свойствами, при этом апоптогенность не связана с методом получения вещества.
3. Статистически значимые различия между триптантрином и группами его соединений обнаруживаются только при оценке их влияния на клеточную пролиферацию. Соединения Группы I в концентрациях 5 мкМ/мл и 40 мкМ/мл заметно отстают по эффективности от триптантрина, а в концентрации 80 мкМ/мл - от Группы II. Наибольшую эффективность в обоих тестах продемонстрировали образцы АК-79 (Группа I) и АМ-2 (Группа II).
Полученные данные свидетельствуют о наличии прямого цитостатического и апоптогенного воздействия исследуемых препаратов на опухолевые клетки, что открывает перспективы для дальнейшего изучения соединений триптантрина и их последующего использования в клинической практике.
