Аннотация 3
СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ 5
ВВЕДЕНИЕ 7
1 ВИДЫ МОДЕЛИРОВАНИЯ ИНСУЛИНОРЕЗИСТЕНТНОСТИ 9
1.1 Виды сахарного диабета у людей 9
1.2 Модели диабета 1 типа 10
1.3 Модели диабета 2 типа 15
1.4 Механизм трансмембранного поглощения глюкозы 22
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 24
2.1 Объект исследования 24
2.2 Методика моделирования инсулинорезистентности 24
2.2 Моделирование физической нагрузки на клеточной культуре посредством
электрической стимуляции 25
2.3 Электрофорез в полиакриламидном геле и иммуноблоттинг 25
2.4 Статистические методы исследования 27
2.5 Материалы и реагенты 27
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ 43
3.1 Влияние гипергликемических условий на содержание p-Akt в клеточных
пробах 43
3.2 Влияние электростимуляции на содержание p-Akt в клеточных пробах.. 44
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 47
ВЫВОДЫ 48
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 49
На сегодняшний день 537 миллионов человек во всем мире страдают от диабета. Это заболевание проявляется в виде нарушений обмена веществ, а именно, нарушение метаболизма белков, жиров и углеводов. При заболевании сахарным диабетом второго типа клетки становятся не чувствительны к инсулину, то есть инсулинрезистентные, главным инициатором которого является генетическая предрасположенность [Error! Reference source not found.].
Инсулинорезистентность - это нарушение биологического ответа на воздействие эндогенного или экзогенного инсулина тканей -мишеней - преимущественно печени, адипоцитов и скелетных мышц. К основным биологическим эффектам инсулина относят регуляцию углеводного, жирового, белкового обменов и процессов роста, дифференцировки тканей, синтеза ДНК, транскрипции генов. То есть при повышении инсулинорезистентности в организме развивается сахарный диабет [47Error! Reference source not found.].
Весь мир пытаются решить проблему. Чтобы достичь своих целей, ученые разработали ряд решений для изучения данной патологии. В свою очередь, это моделирование сахарного диабета 1 и 2 типов, одной из важных целей которого является изучение влияния физической нагрузки на механизм транспорта глюкозы.
Разработка новых методов лечения диабета 2 типа требует надежных, воспроизводимых и хорошо проверенных методов лечения, экспериментальных систем.
Объект исследования: инсулинорезистентность в контексте её
моделирования на клеточной культуре.
Предмет исследования: электростимуляция как метод влияния на механизм трансмембранного транспорта глюкозы.
Цель исследования: изучить влияние электростимуляции на восстановление транспорта глюкозы в миоцитах при гипергликемических условиях.
Задачи:
1. Реализовать модель формирования инсулинорезистентности в клеточной культуре миоцитов С2С12.
2. Изучить влияние гипергликемических условий на механизм транспорта глюкозы в миоцитах через путь, связанный с активацией Akt.
3. Выявить влияние электростимуляции на каскадный путь, связанный с Akt, стимулирующий трансмембранную транспортировку глюкозы в клеточной структуре
1. Моделирование инсулинорезистентности в клеточной культуре проводилось при помощи высокоглюкозной среды, содержащей 25 мМ глюкозы.
2. При концентрации 25 мМ глюкозы в дифференцировочной среде у клеток не наблюдалось выраженной инсулинорезистентности.
3. Электростимуляция повысила уровень концентрации p-Akt как в контрольной, так и в экспериментальной группе, независимо от добавления инсулина. При стимулировании клеток в течение 24 часов уровень концентрации p-Akt приблизился к значениям контрольной группы
