Аннотация 2
ВВЕДЕНИЕ 4
1 Перспективы выращивания в культуре Vaccinium vitis-idaea L., V.
corymbosum L. и V. myrtillus L 5
1.1 Брусника, черника, голубика: пищевая ценность, биологическая
активность, ресурсы (биоморфа, ареал) 5
1.2 Микроклональное размножение как способ получения плантаций
Vaccinium vitis-idaea L., V. corymbosum L. и V. myrtillus 12
1.3 Влияние микоризообразователей на урожайность брусники, голубики
и черники 15
1.4 Грибные биопрепараты 17
2 Таксономический анализ микоризообразователей растений семейства
Ericaceae 19
2.1 Аскомицеты 19
2.2 Базидиомицеты 21
2.3 Современный таксономический анализ грибов 22
3 Материалы и методы 24
3.1 Объекты исследований 24
3.2 Методы изучения грибов-микоризообразователей 24
3.2.1 Приготовление питательных сред 24
3.2.2 Подготовка материала 25
3.2.3 Культивирование 26
3.2.4 Приготовление препаратов и микроскопирование 27
3.2.5 Выделение ДНК, ПЦР, секвенирование 28
3.2.6 Информационный анализ 29
3.3 Тестирование биопрепарата 29
3.3.1 Изготовление биопрепарата на основе полученных штаммов 29
3.3.2 Адаптация микроклонов и их обработка биопрепаратом 30
3.3.3 Изучение влияния биопрепарата на морфогенез растений 30
4 Результаты и обсуждение 32
4.1 Гистологический анализ корней брусники и черники 32
4.2 Рост мицелия 33
4.3 Морфологические и физиологические особенности чистых культур . . 38
4.4 Филогенетический анализ 48
4.5 Получение биопрепарата 52
4.6 Влияние биопрепарата на адаптацию и рост микроклонов голубики садовой 52
4.7 Влияние биопрепарата на адаптацию и рост растений из других семейств 58
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 59
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 60
Растения рода Vaccinium - брусника (V. vitis-idaea L.), черника (V. myrtillus L.) и голубика (V. corymbosum L.) - полезны для человека. Их ягоды съедобны и имеют насыщенный кисло-сладкий вкус. Другие части этих растений также обладают ценными свойствами и используются как в народной, так и традиционной медицине: листья и побеги брусники - сырье для приготовления диуретических средств, плоды применяют при авитаминозе; листья и плоды черники обладают антисептическим действием; ягоды голубики - мощный антиоксидант. Поэтому эти виды культивируются и выращиваются и в промышленных масштабах, и в частном садоводстве.
Все виды рода Vaccinium имеют особые симбиотические микоризные ассоциации с корневыми системами (эрикоидная микориза). Эти образования улучшают поглощение питательных и минеральных веществ, а также повышают устойчивость к некоторым токсичным элементам, например, к алюминию. Выявлено, что при выращивании в отсутствие эндомикоризообразователей брусника, голубика и черника медленно растут и хуже плодоносят. Заражение ими корней брусники и черники позволяет увеличить урожайность этих видов растений.
Целью нашей работы стало изучение грибов-микоризообразователей растений рода Vaccinium с дальнейшим их применением при производстве биопрепаратов. В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие задачи:
1. Получить чистые культуры микоризообразователей;
2. Определить филогенетическое положение полученных изолятов;
3. Изучить их морфологические и физиологические особенности;
4. Изучить влияние эндомикоризообразователей на адаптацию, рост и развитие микроклонов голубики высокорослой;
5. Оценить патогенное влияние исследованных изолятов на растения из других семейств.
По результатам исследования можно сделать следующие выводы:
1. Показано присутствие грибов-микоризообразователей в корнях брусники и черники;
2. Изоляты обладают разнообразной макро- и микроморфологией, а также имеют разную скорость роста;
3. Штамм BR2-1 был наиболее близок к Cadophora echinata (98.62 % гомологии) и C. gamsii (98.28 % гомологии). Сходство штамма CH3-1 составило 100 % с Penicillium thomii;
4. Штамм BR2-1 (Cadophora sp.) оказал благоприятное воздействие на адаптацию, рост и развитие микроклонов голубики. В дальнейшем эти результаты могут быть использованы при разработке биопрепарата, направленного на повышение урожайности ягодных культур рода Vaccinium;
5. Не выявлено патогенного воздействия штамма BR2-1 (Cadophora sp.) на растения жимолости и крыжовника.
