Тема: Влияние состава фитогормонов на содержание фенольных соединений в каллусной культуре Alfredia cernua(L.) Cass
Закажите новую по вашим требованиям
Представленный материал является образцом учебного исследования, примером структуры и содержания учебного исследования по заявленной теме. Размещён исключительно в информационных и ознакомительных целях.
Workspay.ru оказывает информационные услуги по сбору, обработке и структурированию материалов в соответствии с требованиями заказчика.
Размещение материала не означает публикацию произведения впервые и не предполагает передачу исключительных авторских прав третьим лицам.
Материал не предназначен для дословной сдачи в образовательные организации и требует самостоятельной переработки с соблюдением законодательства Российской Федерации об авторском праве и принципов академической добросовестности.
Авторские права на исходные материалы принадлежат их законным правообладателям. В случае возникновения вопросов, связанных с размещённым материалом, просим направить обращение через форму обратной связи.
📋 Содержание
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 3
ВВЕДЕНИЕ 4
1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 6
1.1 Химический состав и свойства Alfredia cernua(L.) Cass 7
1.1.1 Применение Alfredia cernua(L.) Cass. в медицине 7
1.2 Флавоноиды: строение, классификация, физико-химические свойства 8
1.2.1 Методы определения флавоноидов в растительном сырье 12
1.3 Методы экстракции биологически активных веществ (БАВ) 15
1.4 Культура клеток и тканей растений in vitro 18
1.5 Фитогормоны - стимуляторы развития и роста 19
1.6 Влияние фитогормонов на фенольные соединения 21
1.7 Практическое применение фитогормонов 22
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 23
2.1 Объект исследования: культура Alfredia cernua(L.) Cass 23
2.2 Культивирование каллусной кульуры 23
2.3 Методика стерилизации оборудования 25
2.4 Приготовление питательной среды и маточных растворов 26
2.5 Методика экстракции флавоноидов из Alfredia cernua(L.) Cass 27
2.6 Определение оптической плотности испытуемых растворов 30
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ 32
3.1 Культура Alfredia cernua(L.) Cass с составом гормонов НУК/БАП 32
3.2 Культура Alfredia cernua(L.) Cass с составом гормонов 2,4-Д/6-БАП 39
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 48
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 49
📖 Введение
На данный момент известно свыше 20000 биологически активных веществ (БАВ), получаемых из лекарственного растительного сырья, что существенно сказывается на истощении и воспроизводстве многих видов растений [4]. Поэтому все большее внимание привлекают фармацевтические субстанции, производимые на основе культур клеток и тканей растений. Данное направление является перспективным в биотехнологии лекарственных препаратов растительного происхождения. Источником растительного сырья служат суспензионные культуры клеток, полученные из каллусной культуры растения.
Альфредия поникшая (Alfredia cernua(L.) Cass.) - многолетнее лекарственное растение, обладающее ноотропными эффектами. Надземная часть растения широко применяется в народной медицине в виде сборов с другими лекарственными растениями, так как в своем составе содержит простые фенолы, флавоноиды (кверцетин, изокверцитрин, рутин), кумарины, органические кислоты, лигнаны и другие вещества, обладающие ноотропными эффектами. Экстракт альфредии содержит флавоноиды [18].
Для флавоноидов характерна высокая биологическая активность благодаря содержанию химических структур, обладающих различными физико-химическими свойствами, в том числе антиоксидантными, диуретическими, нейротропными и другими фармакологическими свойствами. В настоящее время для идентификации и количественного определения флавоноидов в лекарственном сырье широко используются физико-химические методы экстракции.
Цель данной выпускной квалификационной работы:
Изучить влияние ауксинов на содержание фенольных соединений в культуре Alfredia cernua(L.) Cass.
Исходя из цели были поставлены следующие задачи:
1. Провести литературный анализ по теме исследования, включая химический состав и свойства Alfredia cernua(L.) Cass, методы экстракции биологически активных веществ (БАВ), культивирование каллусных культур in vitro, роль фитогормонов в синтезе фенольных соединений.
2. Освоить методики культивирования каллусной культуры Alfredia cernua(L.) Cass.
3. Провести экстракцию биологически активных веществ и подобрать оптимальный метод их выделения.
4. Определить количественное содержание флавоноидов в экстрактах.
✅ Заключение
2. В ходе выполнения исследования были освоены методики культивирования каллусной культуры Alfredia cernua(L.) Cass на питательных средах с разными составами фитогормонов НУК/6-БАП (0,5/0,2 мг/л) и 2,4-Д/6-БАП (1,0/0,1 мг/л).
3. Проведены экстракции флавоноидов из каллусных культур альфредии поникшей с использованием этилового спирта различной концентрации 20, 40, 60, 80, 96%. Исследованы четыре условия экстракции: темновая экстракция, шейкерная экстракция, экстракция в термостате при 37 °C и экстракция в термостате при 60 °C.
Для первой культуры Alfredia cernua(L.) Cass, выращенной на среде с гормональным составом НУК и 6-БАП, наилучшие результаты показала темновая экстракция с концентрацией этилового спирта 96%. Этот метод экстракции обеспечивает не только высокую эффективность экстракции, но и высокий процент выхода флавоноидов в независимости от концентрации
Для второй культуры Alfredia cernua(L.) Cass, выращенной на среде с гормональным составом 2,4-Д и 6-БАП, лучшие условия показала шейкерная экстракция.
Показано, что состав фитогормонов в питательной среде значительно влияет на синтез флавоноидов в каллусной культуре Alfredia cernua(L.) Cass. Изменение концентраций и состава фитогормонов НУК, 2,4-Д и 6-БАП приводят к заметным различиям в количестве синтезируемых флавоноидов. Экспериментальные данные показали, что в первой культуре альфредии с гормональным составом НУК (0,5 мг/л) и 6-БАП (0,2 мг/л) сумма флавоноидов составила 23,10%, а у второй культуры с гормональным составом 2,4-Д (1,0 мг/л) и 6-БАП (0,1мг/л) сумма флавоноидов была несколько ниже и составила 22,29%.
4. С помощью спкетрофотометрического анализа было установлено, что максимальное
содержание флавоноидов наблюдается при длине волны 410 - 417. Реакция
комплексообразования с А1С1з подтвердила наличие флавоноидов в экстрактах. Содержание флавоноидов определяли в пересчете на рутин.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ





